药典动态对药品制剂研发影响和原始记录常见问题探讨详解

药典动态对药品制剂研发影响和原始记录常见问题探讨详解演示文稿目前一页\总数八十九页\编于二十三点（优选）药典动态对药品制剂研发影响和原始记录常见问题探讨目前二页\总数八十九页\编于二十三点建立标准时要考虑的问题Growth200820072006200520042003200220012000常见研究误区以及供参考的经验和体会

新版药典动态对药品制剂质量研究的影响

研发原始记录中常见问题及改进建议

主要讨论内容目前三页\总数八十九页\编于二十三点药用辅料的增修订情况及要求1、新增附录－附录Ⅱ药用辅料

对药用辅料进行定义、分类，对其生产、贮存、应用等提出原则性要求

2、正文收载的药用辅料

共收载132个品种（新增62个、修订52个）

05版收载的三氯甲烷为二类毒性有机溶剂，删除3、注射用辅料质量、未收载的药用辅料附加标准

目前四页\总数八十九页\编于二十三点辅料对测定的干扰1、避免使用

2、排除辅料干扰方法要明确3、不排除可以默认为杂质

目前五页\总数八十九页\编于二十三点辅料影响的排除无影响有影响，可定位有影响，难定位

目前六页\总数八十九页\编于二十三点制剂通则变化几个重点提示修订的12种制剂通则（共20种）注射剂片剂眼用制剂酊剂胶囊剂丸剂颗粒剂糖浆剂气雾剂粉雾剂喷雾剂凝胶剂鼻用制剂搽剂涂剂涂抹剂目前七页\总数八十九页\编于二十三点片剂制剂通则变化几个重点提示1）含片定义：系指含于口腔中缓慢溶化（解）产生（持久）局部或全身作用的片剂含片的溶化性照崩解时限检查法（附录ⅩA）检查，除另有规定外，10分钟内不应全部崩解或溶化。

2005年版：含片照崩解时限检查法（附录ⅩA）检查，除另有规定外，30分钟内应全部崩解。

但标准正文中仍然是：

其他应符合片剂项下有关的各项规定（附录ⅠA）。目前八页\总数八十九页\编于二十三点片剂制剂通则变化几个重点提示2）分散片的【分散均匀性】：检查法：取供试品6片，置250ml烧杯中，加15～25℃的水100ml，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛。2005年版：取供试品2片，置20℃±1℃的100ml水中，振摇3分钟，应全部崩解并通过二号筛。目前九页\总数八十九页\编于二十三点眼用制剂通则变化重点提示1）定义：系指直接用于眼部发挥治疗作用的无菌制剂。2）基本分类等文字修改3）【渗透压摩尔浓度】【无菌】均为必检项目

删去了【微生物限度】检查产品的工艺处方设计、生产环境的升级、供检样品的数量都要随之改变目前十页\总数八十九页\编于二十三点注射剂品种收载及增修订品种数量

二部收载品种删除上版品种新增品种修订品种变动幅度注射液粉针269个126个15个59个264个82%共计395个未修订品种2005年版收载346个（248注射液＋98粉针）

目前十一页\总数八十九页\编于二十三点注射剂品种增修订项目增订HPLC鉴别：64个品种增订TLC鉴别：11个品种增订IR鉴别：6+1个品种(+1原有)增订细菌内毒素检查：86个品种热原改细内：27个品种增加降压物质的品种：3个增加过敏反应的品种：4个增加异常毒性的品种：9个增订渗透压：25个品种增加颜色或溶液的颜色的品种：9个增加澄清度或溶液的澄清度的品种：7个头孢类增订高分子聚合物的品种：6个（老品种）增订5-羟甲基糠醛的品种：7个

目前十二页\总数八十九页\编于二十三点注射剂制剂通则变化重点提示

1）除另有规定外，静脉输液应尽可能与血液等渗。

★之前为静脉输液的一般要求，新版要求此项为静脉输液品种必设必检项目，包括氯化钠注射液

（例外：葡萄糖注射液不检）【渗透压摩尔浓度】除另有规定外，静脉输液及椎管注射用注射液按各品种项下规定，照渗透压摩尔浓度测定法（附录ⅨG）检查，应符合规定。

目前十三页\总数八十九页\编于二十三点【渗透压摩尔浓度】的表述形式

例1：己酮可可碱葡萄糖注射液（等渗）

渗透压摩尔浓度

取本品，依法测定（附录ⅨG）毫渗透压摩尔浓度应为260～320mOsmol/kg。

例2：甘油果糖氯化钠注射液（高渗）

渗透压摩尔浓度

取本品，依法检查（附录ⅨG），本品的渗透压摩尔浓度比应为6.5～7.5。

目前十四页\总数八十九页\编于二十三点渗透压摩尔浓度检查项的研究与标准制订

注意仪器的线性范围浓溶液可以适当稀释但结果不能简单乘以稀释倍数

出具报告要注明稀释情况！小容量注射液增订渗透压的目的？胶体渗透压滴眼液的渗透压

目前十五页\总数八十九页\编于二十三点注射剂制剂通则变化重点提示2）注射剂所用的原辅料应从来源及工艺等生产环节进行严格控制并应符合注射用的质量要求（热原或细菌内毒素、无菌等应符合要求）。

纯度要高、杂质要少、生物负荷要低＊从源头控制杂质的数和量、染菌的数和量、热原或细菌内毒素目前十六页\总数八十九页\编于二十三点Clicktoedittitlestyle杂质控制微粒控制安全性控制注射剂所用的原辅料应从来源及工艺等生产环节进行严格控制并应符合注射用的质量要求。标准增项杂质谱的比较供注射用原料质控重点应在制剂申报资料中体现！目前十七页\总数八十九页\编于二十三点供注射用原料可见异物检查头孢他啶：取本品5份，每份3.0g，加1%碳酸钠溶液（经0.45μm滤膜滤过）溶解，依法检查（附录ⅨH），应符合规定。头孢地嗪钠：取本品5份，每份2.0g，分别加微粒检查用水溶解，依法检查（附录ⅨH），应符合规定。目前十八页\总数八十九页\编于二十三点有些品种如碱性药物与玻璃容器久置起反应，产生白点、白块和玻璃屑有些品种如甲硝唑等与重金属发生反应产生不溶物有些品种如喹诺酮类药物对金属设备产生腐蚀，易有金属屑有些品种如胰岛素等提取的生化大分子易产生蛋白沉淀有些品种如头孢噻肟钠等成盐不完全，溶解度太低，产生白点、白块引发不合格的部分原因目前十九页\总数八十九页\编于二十三点控制生产环境和过程中的污染-外源异物考察药物与容器的兼容性-内源异物考察活性成分的稳定性以及与溶剂/添加物的稳定性-内源异物深刻理解“药品的质量源于设计”认真做好处方研究/工艺验证和稳定性考察！可见异物检查的目的目前二十页\总数八十九页\编于二十三点供注射用原料不溶性微粒检查头孢他啶：取本品3份，加1%碳酸钠溶液（经0.45μm滤膜滤过）溶解制成每1ml中含30mg的溶液，依法检查（附录ⅨC），每1g样品中含10μm以上的微粒不得过6000个，含25μm以上的微粒不得过600个。头孢曲松钠：取本品3份，加微粒检查用水溶解并制成每1ml中含50mg的溶液，依法检查（附录ⅨC），每1g样品中含10μm以上的微粒不得过6000个，含25μm以上的微粒不得过600个。目前二十一页\总数八十九页\编于二十三点供注射用的原料药增加不溶性微粒检查以保证制剂能符合注射剂的要求由于光阻法测定结果仅与一定浓度范围内样品溶液成正比，故标准给出了不溶性微粒检查供试品溶液浓度制剂最多有11个规格，均按每1g样品中含10µm以上的微粒不得过6000粒，含25µm以上微粒不得过600粒；

强化不溶性微粒等项目控制强化不溶性微粒等项目控制供注射用原料不溶性微粒检查目前二十二页\总数八十九页\编于二十三点可见异物/不溶性微粒检查原始记录问题不详细无趋势缺方法摸索及分析原始记录建议目前二十三页\总数八十九页\编于二十三点注射剂制剂通则变化重点提示3）供注射用的非水性溶剂，应严格限制其用量，并应在品种项下进行相应的检查。除植物油外，其他还有乙醇、丙二醇和聚乙二醇等2010年版药典中收载了几十个非水性溶剂注射剂，仅有几个在标准中增订了非水性溶剂的含量测定目前二十四页\总数八十九页\编于二十三点注射剂制剂通则变化重点提示比如：依托咪酯注射液为依托咪酯加1，2-丙二醇制成的灭菌水溶液。标准中增订“1，2-丙二醇”检查项，采用GC法测定含量，规定“每1ml中含1，2-丙二醇应为315mg～385mg”。硝酸甘油注射液为硝酸甘油的灭菌无水乙醇溶液。标准中增订：“乙醇量”检查项。按一部附录ⅨM方法测定，规定“应为90.0%～110.0%（ml/ml）”目前二十五页\总数八十九页\编于二十三点增设有效项目指标-甲氧基苯胺值

含不饱和脂肪酸的品种增加甲氧基苯胺值检查多烯酸乙酯（P272）含有不饱和脂肪酸的药物在生产和贮藏过程中易被氧化，初级氧化产物一般不稳定，又可进一步生成醛类等化合物，而甲氧基苯胺值（也称p-茴香胺值）就是ISO推荐的一种对此类降解产物进行评价的手段，欧洲药典附录收载了此测定方法。药物的甲氧基苯胺值越高，说明其劣变程度越严重。测定原理：甲氧基苯胺与醛反应生成醇胺，醇胺脱水生成的醛亚胺可采用紫外-可见分光光度法在350nm波长处测定。目前二十六页\总数八十九页\编于二十三点增设有效项目指标-甲氧基苯胺值

注意：甲氧基苯胺试剂为无色结晶，具有一定毒性，使用时应避免接触皮肤，一旦失误，需用水冲洗15分钟以上。甲氧基苯胺的冰醋酸溶液不稳定，需当天配制使用。以异辛烷作空白做基线校正时，如果测得的甲氧基苯胺冰醋酸溶液的吸光度超过了0.2，则需重新配制试剂。供试品溶液中加入0.25％的4-甲氧基苯胺冰醋酸溶液后应注意避光，在350nm波长处的吸光度随时间的延长缓慢增加，需准确放置10分钟后测定，尽量减小误差。本试验受水分影响较大，样品及试剂中水分的存在会导致反应不完全，测定值偏低，当样品中水分含量超过0.1%时，可按10g样品加1～2g无水硫酸钠的比例脱除水分后测定。另外，应取用新开启包装的供试品。目前二十七页\总数八十九页\编于二十三点注射剂制剂通则变化重点提示4）配制注射剂时…所用附加剂…使用浓度不得引起毒性或明显（过度）的刺激。注射剂所用辅料，在标签或说明书中应标明其名称，抑菌剂还应标明浓度；注射用无菌粉末，应标明注射用溶剂（加有抑菌剂的注射剂，在标签中应标明所加抑菌剂的名称与浓度；注射用无菌粉末，应标明所用溶剂）目前二十八页\总数八十九页\编于二十三点例如：盐酸林可霉素注射液中添加苯甲醇人类红血球悬浮液接触到浓度低于80mM（约为8.6512mg/ml）的苯甲醇时，在37℃，60分钟内极少或不会发生溶血。当苯甲醇浓度高于80mM时，溶血作用则会增加。对于体内醇类脱氢酶水平低下者、因基因多态性而显性表达醇类脱氢酶2（ADH2）为3个等位异构体——ADH2＊1;ADH2＊2;ADH2＊3者均很容易因血浆中苯甲醇的浓度蓄积增高并使其毒性随之增加。注射剂中添加物（如防腐剂）的控制目前二十九页\总数八十九页\编于二十三点人类红血球悬浮液接触到浓度低于80mM（约为8.6512mg/ml）的苯甲醇时，在37℃，60分钟内极少或不会发生溶血。当苯甲醇浓度高于80mM时，溶血作用则会增加。对于体内醇类脱氢酶水平低下等个体很容易因血浆中苯甲醇的浓度蓄积增高并使其毒性随之增加。注射剂中添加物（如防腐剂）的控制目前三十页\总数八十九页\编于二十三点体外试验显示：凡是含有超过9.45mg/ml苯甲醇的盐酸林可霉素注射液在加入到2%普通级家兔血红细胞混悬液中后，在2.5小时～3小时内，至少会引起血红细胞变性。4小时后则会出现溶血，尤以含有20mg/ml苯甲醇的盐酸林可霉素注射液为甚，凡是未加苯甲醇者则均不会出现红细胞变性和溶血现象。注射剂中添加物（如防腐剂）的控制目前三十一页\总数八十九页\编于二十三点所有抑菌剂都具有一定的毒性，制剂中抑菌剂的量应为最低的有效剂量，且最终包装容器中的抑菌剂有效浓度应低于对人体的有害浓度。中国药典2010版首次在附录中收载了“抑菌剂效力检查法指导原则”，用于测定灭菌、非灭菌制剂中抑菌剂的活性，以评价最终产品的抑菌效力，同时也用于指导生产企业在制剂研发阶段进行抑菌剂的筛选。为保证添加到制剂中的抑菌剂的量在规定范围，2010年版药典一些品种参照USP等国外药典一般将其含量控制为其处方量的80%～120％。注射剂中添加物（如防腐剂）的控制目前三十二页\总数八十九页\编于二十三点

美国FDA继1982年发布了禁止给新生儿使用苯甲醇或应调整配方的警示之后，又于2008年12月在其工业指南中要求生产厂商必须依照规定，将苯甲醇等非活性成分按其在处方中作用的显著性的顺序列出并明确标示于药品标签上。2010年版药典中盐酸林可霉素注射液（二部P729）增订苯甲醇检查项，规定“每1ml中含苯甲醇不得过9.45mg”。注射剂中添加物（如防腐剂）的控制目前三十三页\总数八十九页\编于二十三点注射剂制剂通则变化重点提示5）容器用胶塞…要有足够的弹性和稳定性，…倒置试验结果显示：多个头孢类抗生素粉针品种可与丁基胶塞中成分相互作用形成不溶性物质比如：注射用头孢唑啉钠、注射用头孢曲松钠、注射用头孢拉定温度越高，溶液浑浊越快，溶液的澄清度超过Ⅱ号就易引起过敏反应目前三十四页\总数八十九页\编于二十三点包材释放物（BHT对头孢曲松钠澄清度的影响）

目前三十五页\总数八十九页\编于二十三点包材释放物－头孢曲松钠溶液的澄清度－过敏溶液澄清度不合格样品中皮肤被动过敏试验的阳性率(31.6%)远远超出合格样品的过敏试验阳性率(0%)。过敏反应主要集中在浊度浓于2号标准比浊液的样品中，澄清度介于1号和2号标准比浊液之间的样品均未引起过敏反应。因此，溶液的澄清度检查规定“不得比1号浊度标准液更浓”是必要的、合理的、有科学依据的。2009年湖北所评价性抽验结果目前三十六页\总数八十九页\编于二十三点注射剂制剂通则变化重点提示6）除另有规定外，容器应足够透明，以便内容物的检视。因为注射剂出厂检验可见异物会有漏检，或某些品种在出厂后还会产生内源性可见异物，需要临用前在自然光下进行目视检查（避免阳光直射），如有异物，不得使用。目前三十七页\总数八十九页\编于二十三点注射剂制剂通则变化重点提示7）必要时应增设相应的安全性检查，如异常毒性、过敏反应、溶血与凝聚、降压物质、热原或细菌内毒素等因为有些药物成分复杂、组分结构不清晰（如多组分抗生素动物来源提取的生化药等）、采用化学手段难于监控杂质异常毒性：有可能污染生物毒性物质的品种（发酵）过敏反应：有可能污染异源蛋白或未知过敏反应物质的品种降压物质：有可能污染组胺、类组胺样物质的品种（腐败）注射剂安全性检查目前三十八页\总数八十九页\编于二十三点增设安全性监控项目用化学手段不能控制组成、杂质无法控制的生物来源品种均增加了异常毒性、过敏反应等动物试验：如硫酸鱼精蛋白等目前三十九页\总数八十九页\编于二十三点硫酸鱼精蛋白

鱼精蛋白主要存在于鱼类的成熟精巢组织中，与DNA紧密结合在一起，以核精蛋白的形式存在。它是一种小而简单的球形碱性蛋白质，分子量在1万以下，由30个左右的氨基酸组成，其中2/3以上是精氨酸，几乎不含芳香族氨基酸。吸光度参照BP2008/EP6.0增订。根据本品组成，如果纯化步骤将核酸和杂蛋白均去除的话，在260280nm的波长范围内吸光度应很小，但考察结果远远超过BP2008/EP6.0所规定的0.1。

目前四十页\总数八十九页\编于二十三点增设有效项目指标加强安全性监控

结合药品的制法和工艺特点，以及杂质的特殊性设立特色有针对性检测项目。

人尿制品增加乙肝表面抗原检查：如尿激酶、尿促性素、绒促性素、乌司他丁等重组品种增加菌体蛋白残留量、外源性DNA残留量、生物活性检测，如重组人生长激素、重组人胰岛素等。对含有皂甙的植物提取注射剂等增加溶血与凝聚检查：如去乙酰毛花苷注射液等。目前四十一页\总数八十九页\编于二十三点按照凡例要求，在标准中增订【制法要求】来源于人尿或动物组织，采用提取工艺制备的供注射用的原料药或直接与伤口接触的制剂应在质量标准中增加【制法要求】，重申其生产过程的安全性要求。供其他剂型用原料（如口服制剂）暂未在质量标准中制订【制法要求】，而由凡例作统一规范。目前四十二页\总数八十九页\编于二十三点【制法要求】的表述形式

例1：肝素钠（动物组织提取）本品应从检疫合格的猪或牛肠粘膜中提取，生产过程均应符合现行版《药品生产质量管理规范》要求。生产工艺要经病毒灭活验证，并能去除有害的污染物，生产过程中应确保不被外来物质污染。

例2：尿促性素（人尿提取）本品应从健康人群的尿中提取，生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》要求。本品在生产过程中需经适宜的工艺方法处理，以使任何病毒如肝炎病毒和人免疫缺陷病毒等灭活。

例3：凝血酶冻干粉（直接与伤口接触的制剂）本品应从检疫合格的牛或猪血中提取，生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》要求。

目前四十三页\总数八十九页\编于二十三点2-乙基己酸β-内酰胺类抗生素对生产工艺过程中使用2-乙基己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；方法增订为附录－2010年版药典二部（附录ⅦL）；如:头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多酯钠、氨苄西林钠等。目前四十四页\总数八十九页\编于二十三点2-乙基己酸勘误：β-内酰胺类抗生素对生产工艺过程中使用2-乙基己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；方法增订为附录－2010年版药典二部（附录ⅦL）；如:头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多酯钠、氨苄西林钠等。勘误：目前四十五页\总数八十九页\编于二十三点高聚物凝胶色谱法（2010年版新增的19个标准）原料制剂头孢唑肟钠注射用头孢唑肟钠头孢替唑钠注射用头孢替唑钠头孢尼西钠注射用头孢尼西钠头孢噻吩钠注射用头孢噻吩钠磺苄西林钠注射用磺苄西林钠阿洛西林钠注射用阿洛西林钠美洛西林钠注射用美洛西林钠氯唑西林钠注射用氯唑西林钠苯唑西林钠注射用苯唑西林钠普鲁卡因青霉素目前四十六页\总数八十九页\编于二十三点高聚物2010版：品种增加,方法多元化

1、自填柱和商品玻璃柱：填料常用葡聚糖凝胶G-10（SephadexG10）；短柱子的使用，减少分离时间

2、商品凝胶柱TSK-GELG2000SWXL：头孢地嗪（北京所）

3、ODS柱，聚合物-氨苄西林钠舒巴坦钠（浙江所)

4、柱切换（中检所），实现凝胶色谱与反相色谱的统一目前四十七页\总数八十九页\编于二十三点高聚物

盐酸头孢替安聚合物分析方法的比较SephadexG-10系统TSK-GelG2000swxl系统

0.8ml/min目前四十八页\总数八十九页\编于二十三点头孢羟氨苄高分子杂质分析图谱SephadexG-10系统TSK-GelG2000swxl系统

0.8ml/min1-头孢羟氨苄；2-高分子杂质目前四十九页\总数八十九页\编于二十三点

标准统一、规范、明确、严谨

典型项目-无菌检查方法无菌检查是药物安全性风险控制的重要项目之一，但具体检查方法以前标准中均不给出，由检验者自己摸索。抗生素阳性菌选用不注意抗菌谱，存在试验的有效性、一次成功率等问题对每个品种均要求经过验证，确定样品使用的最适宜方法（直接接种法？薄膜过滤法），最佳溶解方式、最佳冲洗液、冲洗方式、敏感的阳性对照菌等操作关键因素，并将上述内容按统一规范格式在质量标准中单独立项表述详细。供注射用原料无菌检查目前五十页\总数八十九页\编于二十三点供注射用原料无菌检查头孢呋辛钠：取本品3份，加1%碳酸钠溶液（经0.45μm滤膜滤过）溶解制成每1ml中含30mg的溶液，依法检查（附录ⅨC），每1g样品中含10μm以上的微粒不得过6000个，含25μm以上的微粒不得过600个。头孢曲松钠：取本品3份，加微粒检查用水溶解并制成每1ml中含50mg的溶液，依法检查（附录ⅨC），每1g样品中含10μm以上的微粒不得过6000个，含25μm以上的微粒不得过600个。目前五十一页\总数八十九页\编于二十三点无菌检查方法规范表述方式举例氧氟沙星氯化钠注射液：

无菌取本品，经薄膜过滤法处理，用0.1%无菌蛋白胨水溶液分次冲洗（每膜不少于500ml），每管培养基中加入0.1mol/L硫酸锰溶液1ml，以大肠埃希菌为阳性对照菌，依法检查（附录ⅪH），应符合规定。乙酰谷酰胺注射液：

无菌取本品，经薄膜过滤法处理，用0.1%无菌蛋白胨水溶液分次冲洗（每膜不少于100ml），以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌，依法检查（附录ⅪH），应符合规定。目前五十二页\总数八十九页\编于二十三点注射剂制剂通则变化重点提示纯度要高、杂质要少、生物负荷要低＊从源头控制杂质的数和量、染菌的数和量、热原或细菌内毒素重点品种为营养性、无抑菌性、制剂有注射剂型注射剂用原料注重数量口服原料也要限定菌属种类（沙门氏菌）原料药微生物限度检查目前五十三页\总数八十九页\编于二十三点注射剂制剂通则变化重点提示胰岛素（制剂为注射剂）取本品0.2g,依法检查（附录ⅪJ），每1g中含细菌数不得过300个。胰酶（制剂为口服制剂，来源于动物提取）取本品,依法检查（附录ⅪJ），每1g供试品中细菌数不得过10000个，霉菌和酵母菌总数不得过100个。并不得检出大肠埃希菌；每10g供试品中不得检出沙门菌。原料药微生物限度检查目前五十四页\总数八十九页\编于二十三点增设有效项目指标加强安全性监控成分复杂、杂质无法控制但质量与颜色相关度高的品种增加溶液的颜色，如糜蛋白酶等。目前五十五页\总数八十九页\编于二十三点溶液颜色检查的目的

溶液颜色

自身性质

纯度

杂质含量-简易、直观、快速、综合的对有色杂质进行检查目前五十六页\总数八十九页\编于二十三点稳定性差质量与颜色联系紧密的安全性要求高用仪器定量测杂质困难注射剂用原料仅在紫外区查杂质成分复杂变质就变色检查颜色的品种适宜进行溶液的颜色检查的原料目前五十七页\总数八十九页\编于二十三点建立方法时要考虑的问题溶剂浓度稳定性临床安全性需要工艺生产能力同类产品水平溶液的颜色目前五十八页\总数八十九页\编于二十三点制订限度时要考虑的问题主成分纯度杂质的含量稳定性数据临床安全性需要工艺生产能力同类产品水平颜色的限度目前五十九页\总数八十九页\编于二十三点应用色差计转换进口药注册标准

-举例溶液的颜色取本品0.5g，加水10ml溶解后，溶液应无色；如显色，与同体积的比色液（取棕红色贮备液1.8ml加8.2ml水，混匀）比较（中国药典2010年版二部附录ⅨA第一法），不得更深。目前六十页\总数八十九页\编于二十三点色差计法应用举例说明：企业标准按EP检查，规定“与B5号标准比色液（EP第5版溶液的颜色）比较不得更深”。因EP标准比色液从三原色开始就与中国药典不同，如按此检查会有困难，故采用色差计进行了对比测定，结果EP的B5号标准比色液的色差值（△E*=3.58）与中国药典BR3号（△E*=3.19）和BR4号（△E*=4.46）的中值（3.82）较为接近，约相当于BR3.5号。因BR3号是取棕红色贮备液1.5ml加8.5ml水，BR4号是取棕红色贮备液2.0ml加8.0ml水配制而成，所以本次复核将棕红色贮备液1.8ml加8.2ml水配制了专用比色液，该比色液的△E*为3.64，与EP

B5号标准比色液的色差值几乎一致，按此转换限度既不改变质控原有水平，又方便在国内检验。应用色差计转换进口药注册标准

-举例目前六十一页\总数八十九页\编于二十三点药典采用现代分析技术举例

由于某些药物组成的复杂性，特别是一些生物大分子药物，使用传统的分析方法已经不能满足当前的质控需要，2010年版药典逐渐改用现代分析技术。

首次运用毛细管电泳法注射用抑肽酶：检查两个特定杂质

注射用盐酸头孢吡肟：方法1-毛细管电泳法

N-甲基吡咯烷方法2-HPLC法（羧基柱，电导检测）目前六十二页\总数八十九页\编于二十三点毛细管电泳法检查特定杂质抑肽酶由上海药检所起草，参考USP增订去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶和去丙氨酸抑肽酶检查项色谱条件：石英毛细管分离柱，毛细管温度：30℃，电极液：磷酸二氢钾溶液；分离压：12KV；波长：214nm结果：去丙氨酸抑肽酶RT为0.99，去丙氨酸-去甘氨酸-抑肽酶RT为0.98，两相关物间分离度1.40，去丙氨酸-抑肽酶与抑肽酶间分离度1.24、抑肽酶拖尾因子1.8目前六十三页\总数八十九页\编于二十三点抑肽酶SDS凝胶电泳图

本品系自牛胰或肺中提取、纯化制得的肽酶抑制剂。采用SDS凝胶电泳的方法抑肽酶的有关物质，结果如图所示，都只有一个条带。可能是抑肽酶和有关物质的分子量相差不大，使用凝胶电泳不能将其分离目前六十四页\总数八十九页\编于二十三点药典采用现代分析技术举例首次运用柱串联技术-抑肽酶

参照USP32用三根TSK柱串联检查高分子蛋白质。采用分子排阻色谱法，用三根色谱柱串联（TSK-G4000SWXL柱）柱温35℃，流速1.0ml/min,二聚体RT0.9，与主峰分离度1.4，主峰拖尾因子0.91。目前六十五页\总数八十九页\编于二十三点药典采用现代分析技术举例柱串联技术适用于溶解度无明显差异但电荷上有明显差异的难分离物质，通过将一根SCX（阳离子交换）短柱与一根MGⅡC18长柱串联就可以简单达到将其分离的目的。原理：有电荷差异的被分离物质进入色谱柱串联系统后，带正电荷的物质（通常是碱性物质）会由于SCX短柱的离子交换作用而被保留在短柱中，而带负电荷的物质（通常为酸性物质）与中性物质则会毫无阻碍的通过短柱进入C18长柱中，从而成功分离；然后由于MGⅡC18长柱中疏水性基团间的相互作用而对中性物质有强保留作用，但对带负电荷物质无强保留作用，这样带负电荷物质与中性物质也简单被分开了如果为了让峰形更好，各峰间分离更开，还可在阳离子交换短柱与C18长柱前接一根NH2短柱（它可与阴离子发生交换作用），进行三根串联，也可以使带负电荷的酸性物质与中性物质达到更好的分离效果。

目前六十六页\总数八十九页\编于二十三点药典采用现代分析技术举例首次运用肽图分析技术：根据蛋白质、多肽的分子量大小以及氨基酸组成特点，使用专一性较强的蛋白水解酶，一般为肽链内切酶，作用于特殊的肽链位点将多肽裂解成小片断，再通过一定的分离检测手段形成特征性指纹图谱，用此法进行鉴别，专属性强，可鉴别仅相差一个氨基酸残基的不同种属来源的样品。如胰岛素-采用V8酶解+HPLC法；

重组人生长激素-采用胰蛋白酶酶解+HPLC法获得肽图进行鉴别等。目前六十七页\总数八十九页\编于二十三点胰岛素肽图人胰岛素酶解-HPLC肽图猪胰岛素酶解-HPLC肽图目前六十八页\总数八十九页\编于二十三点电泳法-等电聚焦水平板电泳法琼脂糖凝胶电泳法醋酸纤维素薄膜电泳法纸电泳法等点聚焦水平板电泳法聚丙烯酰胺凝胶电泳法SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法目前六十九页\总数八十九页\编于二十三点典型的等电聚焦图谱重组人生长激素（二部第566页）用此法做鉴别

目前七十页\总数八十九页\编于二十三点附录通用检测方法中的变化提示澄清度检查法：增加“几乎澄清”的定义：0.5号～1号溶液颜色检查法

恢复“无色或几乎无色”的定义

性状颜色描述与颜色检查项匹配：原有些液体制剂品种颜色检查项规定“与黄色2号标准比色液比较，不得更深”，但性状描述为“无色或几乎无色的澄明液体”，与附录定义不匹配，现修订为“无色至微黄色的澄明液体”。本版药典中极个别品种仍然存在此问题！尼莫地平注射液

目前七十一页\总数八十九页\编于二十三点药典附录变化提示

－钠盐的鉴别反应重金属检查法：pH测定法：不溶性微粒检查法：可见异物检查法：渗透压摩尔浓度：

2010年版2005年版钠盐（1）取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。（2）取供试品约100mg，置10ml试管中，加水2ml溶解，加15%碳酸钾溶液2ml，加热至沸，应不得有沉淀生成；加焦锑酸钾试液4ml，加热至沸；置冰水中冷却，必要时，用玻棒摩擦试管内壁，应有致密的沉淀生成。（替换使用醋酸氧铀锌试液的方法）（1）取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。（2）取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试液，即生成黄色沉淀。目前七十二页\总数八十九页\编于二十三点药典附录变化提示

－锌盐的鉴别反应重金属检查法：pH测定法：不溶性微粒检查法：可见异物检查法：渗透压摩尔浓度：

2010年版2005年版锌盐（1）取供试品溶液，加亚铁氰化钾试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在稀盐酸中不溶解。（2）取供试品溶液，制成中性或碱性溶液，加硫化钠试液，即产生白色沉淀。（替换使用硫氰酸汞铵试液的检查方法）（1）取供试品溶液，加亚铁氰化钾试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在稀盐酸中不溶解。（2）取供试品溶液，以稀硫酸酸化，加0.1％硫酸铜溶液1滴及硫氰酸汞铵试液数滴，即生成紫色沉淀。重新做考察:取样量,辅料干扰,延伸-环境友好目前七十三页\总数八十九页\编于二十三点吸收系数

物理意义为当溶液浓度为1%（g/ml）,液层厚度为1cm时的吸光度数值。研究意义及应用趋势的改变原始记录问题目前七十四页\总数八十九页\编于二十三点仿制药品研究的原则主基调比较研究研发目标≥被仿制药参考文献被仿药的标准《中国药典》局颁标准（成册标准、散页标准）包括进口药注册标准企业注册标准四国药典目前七十五页\总数八十九页\编于二十三点《已有国家标准化学药品研究技术指导原则》在选择参比对照时一般遵循以下原则：如原发厂家生产的产品已在我国上市，一般首选原发厂产品作为参比对照；如不能获得原发厂产品，可以考虑选用研究基础较好、临床应用较为广泛的非原发厂产品作为参比对照；也可以对不同厂家生产的同品种进行质量对比，优选质量较好的产品作为参比对照。

比较研究的标尺问题

-被仿制药品的选择原则目前七十六页\总数八十九页\编于二十三点原研品认可度高首仿品被仿品注意：可比性

-

贮存时间大致相同！包装条件相同！真实性–

提供发票、标签、批号或照片

比较研究的标尺问题

-被仿制药品的选择原则目前七十七页\总数八十九页\编于二十三点

比较研究的标尺问题

-购买的对照品/标准品对照品/标准品

权威性

真实性

准确性-发票、标签、批号、分析报告单、盐基/碱基、水分目前七十八页\总数八十九页\编于二十三点详细精制方法、质量检验报告标定方法与结果

详细提取精制方法、质量检验报告、标定方法与结果详细合成精制方法、质量检验报告、标定方法与结果

纯化精制提取精制

合成精制

比较研究的标尺问题

-非购买的对照品/标准品目前七十九页\总数八十九页\编于二十三点标定者测定结果（%）n均值（%）RSD（%）

1.98.82%，99.12%，99.18%，99.25%，99.17%599.11%

0.17%2.98.96%，99.04%，99.24%，98.98%，98.