生物样品的制备 （溶剂萃取法液液萃取法）_第1页
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文档简介

在生物样品的制备过程中，进行选择性分离、纯化与浓集。分离—消除内源性物质、代谢物或其它共存药物的干扰。纯化与浓集—提高被测药物的灵敏度。样品经分离、纯化与浓集与测定方法相结合，达到专属性强、灵敏度高、准确性好。

三、溶剂萃取法（一）液—液萃取法(传统的方法)（二）固相萃取法(液—固萃取法)（三）自动化固相萃取技术（四）固相微萃取（五）膜萃取技术（六）微透析技术（七）超临界流体萃取法

三、溶剂萃取法（一）液—液萃取法

（liquid-liquidextraction,LLE）大多数药物为脂溶性，在有机溶剂中溶解度大于水中大多数内源性杂质是强级性的水溶性物质采用有机溶剂萃取法

三、溶剂萃取法

溶剂选择—合适的溶剂是成功的主要条件了解药物与溶剂的化学结构及其性质—相似相溶的原则对药物未电离分子可溶，电离形式分子不溶沸点低、易挥散，毒性小与水不相混溶不影响紫外检测具有较高的化学稳定性和惰性 （一）液—液萃取法

（liquid-liquidextraction,LLE）

三、溶剂萃取法有机溶剂萃取次数

—通常为1次，必要时2~3次有机溶剂每次用量

—与水相体积比通常为1:1或2~5:1

通过萃取回收率确定最佳萃取次数与每次的溶剂用量

三、溶剂萃取法（一）液—液萃取法

（liquid-liquidextraction,LLE）由药物的pKa确定碱性药物最佳pH值：高于pKa值1~2个pH单位酸性药物最佳pH值：低于pKa值1~2个pH单位一般规则：碱性药物在碱性pH值、酸性药物在酸性pH值介质中提取。

液-液萃取法水相pH值

三、溶剂萃取法（一）液—液萃取法

（liquid-liquidextraction,LLE）生物样品宜在碱性或近中性提取，生物基质中内源性物质多为酸性，在碱性下不易萃取。空白血清在pH2、pH7和pH13缓冲液中乙醚提取，提取液用RP-HPLC(UV)测定，碱性药物在pH13下提取液杂质峰少。

液-液萃取法水相pH值:

三、溶剂萃取法（一）液—液萃取法

（liquid-liquidextraction,LLE）第三章附图五空白血清乙醚提取物的HPLC色谱图

三、溶剂萃取法（一）液—液

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