无名高热的理论及其解决思路

第1页，课件共38页，创作于2023年2月近年来猪越来越难养、病越来越多！根本原因何在？猪群的健康状态下降两大免疫抑制性疾病猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病PRRS)猪圆环病毒2型感染(PCV-2)第2页，课件共38页，创作于2023年2月猪蓝耳病(PRRS)1.PRRS的危害2.目前的流行特点3.关于病毒的血清型4.如何诊断？5.疫苗使用存在的问题？6.PRRSV致病机制7.利用猪只免疫及攻毒试验测试PRRS免疫营养剂的功效性第3页，课件共38页，创作于2023年2月蓝耳病(PRRSVdisease)呼吸与繁殖综合症Porcinerespiratorydiseasecomplex(PRDC)母猪流产及死亡症状SowAbortionandMortalitySyndrome(SAMs)仔猪多系统综合衰竭消耗症PostweaningMultisystemicWastingSyndrome(PMWS)第4页，课件共38页，创作于2023年2月蓝耳病毒的感染哺乳期怀孕期保育期育肥期胎儿胎盘PRRSV母猪症状：发烧、嗜睡、厌食、无乳、发情不顺链球菌、TGE圆环病毒圆环病毒、猪瘟沙氏杆菌、巴氏杆菌副嗜血杆菌圆环病毒、附红细胞体放线杆菌AP仔猪泌乳PRRSV保育猪PRRSV肥猪PRRSV死胎、木乃伊胎晚期流产呼吸症状、肺炎下痢、脐带出血免疫下降、死亡化脓性脑炎肺炎、PDWN虚弱、死亡呼吸道症状整体免疫下降肺炎第5页，课件共38页，创作于2023年2月除此而外，公猪也会感染PRRSV已感染PRRS的精虫未感染PRRS的精虫黑点第6页，课件共38页，创作于2023年2月PRRSV与猪瘟免疫感染PRRSV后对猪瘟抗体有很大的免疫抑制性感染PRRSV后即使做了猪瘟疫苗免疫仍然会爆发猪瘟由于PRRSV的存在，使猪瘟疫苗免疫失效第7页，课件共38页，创作于2023年2月PRRS对于猪瘟疫苗功效性的影响PRRSVHCvaccineCSFvirusdpcill/dead

--V2/9~11

-VVnosymptomV-V2/9~11VVV2~3/6---nosymptom第一组给予猪瘟病毒之攻毒而不免疫疫苗第二组注射猪瘟疫苗并于三周后进行猪瘟病毒攻毒第三组进行PRRS病毒(01NP1,美洲病毒株)攻毒后隔四周再给予猪瘟病毒之攻毒第四组进行PRRS病毒攻毒后一周免疫注射猪瘟疫苗，再隔三周进行猪瘟病毒之攻毒第五组为本试验之空白组，不免疫疫苗亦不攻毒任何病毒。泰国病理学家Kesdangsakonwuti等人(2005)也就是说,即使您打了猪瘟疫苗,因为PRRSV的侵袭,使猪瘟疫苗失去了保护力,用猪瘟病毒攻毒时,照样引起感染猪瘟而死亡!第8页，课件共38页，创作于2023年2月结论：PRRSV潜在的危害很大猪群的生产性能下降猪群免疫力下降呼吸道疾病发病率上升继发感染增多母猪发情障碍、滞后产现象增多第9页，课件共38页，创作于2023年2月PRRS病毒的血清型国际上分美洲型和欧洲型我国分离的毒株都属美洲型我国猪群中还未发现欧洲型毒株第10页，课件共38页，创作于2023年2月如何诊断?明确猪场各阶段猪群的蓝耳病病毒感染率（用ELISA试剂盒进行抗体监测）监测感染动态情况（每季度1次），是否升高或降低出现繁殖障碍问题，应同时检测（胎儿体内、母猪血清中）病毒和抗体，单纯的抗体阳性并不能说明就是由蓝耳病造成的繁殖障碍第11页，课件共38页，创作于2023年2月当一个猪场符合以下3点时应诊断患PRRS1.猪群表现典型的PRRS症状及有PRRS患病史2.猪群出现PRRS病变3.患病猪中找到PRRS病毒如果仔猪出现典型的临床症状、病变、血液中有PRRS抗体时，又知该猪群没有注射PRRS疫苗的则可诊断患有PRRS。第12页，课件共38页，创作于2023年2月疫苗使用存在的问题：1.使用活疫苗造成蓝耳病暴发已是不争的事实（国内外均有实例）2.活疫苗的返强、变异、重组可产生新病毒3.免疫接种猪造成疫苗毒的持续性感染和长期带毒；引起免疫猪场和猪群处于长期感染状态第13页，课件共38页，创作于2023年2月PRRSV致病机制第14页，课件共38页，创作于2023年2月猪的肺泡巨噬细胞上的Heparinlike接受器与PRRS病毒母体蛋白的接合情况(InvolvementoftheMatrixProteininAttachmentofPorcineReproductiveandRespiratorySyndromeVirustoaHeparinlikeReceptoronPorcineAlveolarMacrophages)

pSn=receptorforPRRSVORF5ORF6C-S-S-CPRRSVSialo-adhesinprotein(涎黏着蛋白)

HeparinlikeReceptor第15页，课件共38页，创作于2023年2月Nucleus核ORF5ORF6MhcIIMhcIMhcIMhcIICD8+cellCD4+cellNTdomain结合部位Hostcells,Antigenpresentcells第16页，课件共38页，创作于2023年2月利用猪只免疫及攻毒试验测试

PRRS免疫营养剂的功效性第17页，课件共38页，创作于2023年2月(1)猪只免疫及攻毒试验代号免疫营养剂组别头数H

高剂量6L

低剂量6BK

空白组6组别1stimmunized2nd3rdchallenge高剂量低剂量空白组21~28days3-wkage5-wk7-wk9-wkHalf-doseHalf-doseFull-dose3-wkage5-wk7-wk9-wkImmunizationandchallengeinpigsmodel第18页，课件共38页，创作于2023年2月Group

coatingantigen

IgM-ELISAtitres(S/BK)IFAtitresNTtitres

Hdosegroup

3~1010~3016~3216~32

Ldosegroup310168~32BKgroupNegativeCTL11<8<8

(2)各试验组免疫三次后2周(9周龄)之血清免疫力价分析第19页，课件共38页，创作于2023年2月(3)攻毒后(14-DPC)临床症状及健康情形：攻毒后之DPI-14之临床症状(P8)P10-experimentgroup总头数发烧咳嗽死亡毛粗(H)Highdose61102(L)Lowdose621~202(BK)Placebo(15%ISA206)64~53~403~5疫苗组，于攻毒后一至二天内都有一至二头发生40.5℃以上发烧反应，但是二周后大都回复原来之40.3℃以下，攻毒后(H)及(L)显然大多较活泼健康、不再咳嗽、皮毛渐渐恢复亮丽，而(BK)对照组之猪只咳嗽现象比较频繁。以下表为攻毒后1~14-DPC观察之将康状态及患病情形第20页，课件共38页，创作于2023年2月观察项目点数观察项目点数1.粪便3.关节坚固1正常1半固状2肿胀2下痢3无法支撑重量3死亡4死亡42.行为4.步行活泼机警1正常1昏睡2跛行2挤在一堆3不能站立3死亡4死亡4观察项目点数观察项目点数5.食欲8.毛发正常1平滑1食量减少2粗糙2无食欲3竖立3死亡4死亡46.身体状况9.皮肤腹部圆满1正常1消瘦2疹斑2脊骨突出肋骨明显3发疳3死亡4死亡47.神经肌肉10.呼吸正常1正常1歪头斜头2快速2震颤3呼吸困难，咳嗽3死亡4死亡4健康状况与临床症状观察指标表每只动物每日需作10项观察指标，每个观察项目正常为1点，每日总计正常为10点，最严重的临床症状为30点，死亡40点。第21页，课件共38页，创作于2023年2月攻毒后之14-DPC依观察项目计分之临床症状P10

观察项目12345678910T*Hdose1.01.01.01.01.01.21.01.31.21.210.9Ldose1.01.21.21.21.21.21.01.51.51.212.2BK1.51.81.71.72.02.21.52.51.52.318.7P10

观察项目12345678910T*Hdose1.01.01.01.01.01.21.01.31.21.210.9Ldose1.01.01.01.21.21.21.01.31.51.211.6BK1.51.81.71.72.02.21.52.31.52.318.5*：观察10项之临床症状，每一组6头猪分别给分后取其平均值后分别填入表格，T为10项临床症状之总分。攻毒后之21-DPC依观察项目计分之临床症状第22页，课件共38页，创作于2023年2月(4)试验猪只在免疫及攻毒后重量变化情形攻毒第23页，课件共38页，创作于2023年2月*:ThebloodsamplesoftestedpigscanbedetectedPRRSVinfectedbyRT-PCRrunning(5)猪只攻毒试验后病毒血症检出情况组别疫苗名称头数2-DPC7-DPC*14-DPC21-DPCH

60210L

60220BKPlacebo

61363第24页，课件共38页，创作于2023年2月(6)各试验组攻毒后21DPC解剖后肺脏之病变严重性分析猪只攻毒后，第21天起进行试验猪只之屠体解剖，观察肺部之肉眼病变结果可知，空白组之6头猪都有明显的间质性肺炎，坏死病变症状之病变指数Lesionscore约在15-40，高剂量组有一肺脏病变严重，可能有二次感染发生，其指数约在25左右，其他5头的指数都在15以下。LesionscoreHighdose251510885Lowdose2018151055BK403530262515

各组的6头猪只其肺脏病变指数第25页，课件共38页，创作于2023年2月(7)各试验组攻毒后21DPC解剖后分析肺脏组织切片病理分析间质性肺炎之严重性

耳號

scoreHighdosevaccine100111002110031100411005010061Lowdosevaccine101111012110131101411015210161BK102161022510236102461025510266C103101032110330空白组的感染指数最高第26页，课件共38页，创作于2023年2月结论：由猪只免疫及攻毒试验模式可知：高剂量及低剂量的PRRS免疫营养剂经前二次半剂量及第三次全量免疫仔猪后，该免疫的猪只对于PRRSV（5T-type1;TCID50=104)攻毒皆具有相当强的保护力！第27页，课件共38页，创作于2023年2月PRRSV感染途径与免疫营养增强剂的开发策略多重感染路径：Step1.上呼吸道及下呼吸道上皮细胞感染路径Step2.呼吸道周边组织的monocyte（单核球）,macrophage（巨噬细胞）感染路径Step3.Antibodydependentenhancement(ADE)ofphagocytosis第28页，课件共38页，创作于2023年2月可以诱发产生较高的中和力价。减低PRRSvaccine抗原过敏性问题。可以有效诱发T细胞免疫机制。

（1）诱发中和力价之液体或粘膜免疫反应机制

（2）诱发细胞免疫机制清除被感染的细胞

PRRSV感染途径与免疫营养增强剂的开发策略第29页，课件共38页，创作于2023年2月千呼万唤始出来免疫营养增强剂制作原理第30页，课件共38页，创作于2023年2月ProcedureofV.S.P:PRRSVirusEffectiveDNAORF5ORF6C-S-S-CCopyincarr