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文档简介
第6章黄酮类化合物----黄酮类的鉴定鉴定一、薄层色谱法(TLC)二、
纸色谱法(PC)一、
薄层色谱法
一般采用吸附薄层,吸附剂大多用硅胶和聚酰胺。(1)硅胶薄层色谱:用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物分离苷元常用展开剂:甲苯-甲酸甲酯-甲酸;氯仿-甲醇等。(2)聚酰胺薄层色谱:分离含游离酚羟基的黄酮苷与苷元。展开剂:具有较强的极性,大多含有醇、酸或水如:乙醇-水(3:2),水-乙醇-甲酸-乙酰丙酮(5:1.5:1:0.5)聚酰胺薄层(乙醇/水)二、纸色谱法(PC)
PC适于分离各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物。黄酮苷:一般采用双向展开
7黄酮类化合物的检识和结构鉴定第一相展开采用醇性展开剂如:BAWn-BuOH:HOAc:H2O=4:1:5上层
TBAt-BuOH:HOAc:H2O=3:1:1
水饱和n-BuOH层析行为:Rf值:苷元>单糖苷>双糖苷一般:苷元在0.70以上,而苷则小于0.7。第二相展开采用水性展开剂如:2~6%HOAc水溶液
3%NaCl水溶液
HOAc:浓HCl:H2O=30:3:10层析行为:连接糖链越长,Rf
越大(>0.5);
苷元Rf较小,有的留在原点。ABCDABCD苷元苷元纸色谱
第I向醇性展开剂第II向水性展开剂(BAW、TBA、水饱和正丁醇)
(2~8%HAc、3%NaCl、1%HCl)
正相色谱
反相色谱固定相(水)极性>流动相
(有认为是吸附原理)Rf规律:极性小的化合物Rf大
极性大的化合物Rf大苷元>单糖苷>双糖苷Rf规律与左边相反母核相同,二-OH>三-OH>四-OH>五-OH黄酮主要应用:苷元的分离鉴别
黄酮苷及花色素类的分离鉴别双相色谱9纸层析(PC):采用双向纸层析。
苷元:
平面型分子:黄酮(醇)、查耳酮的Rf小,几乎留在
原点不动(Rf<0.02);
非平面型分子:二氢黄酮(醇)、二氢查耳酮的Rf大,
因亲水性较强(Rf0.10-0.30)。
层析检查方法:
①观察荧光,用紫外光灯照射看到有色斑点,NH3处理
产生明显的色变。
②用2%AlCl3甲醇液喷雾,UV灯下呈亮黄色荧光斑点。习题有下列四种黄酮类化合物A、R1=R2=HB、R1=H,R2=RhaC、R1=Glc,R2=HD、R1=Glc,R2=Rha比较其酸性及极性的大小:
酸性()>()>()>()极性()>()>()>()比较这四种化合物在如下三种色谱中Rf值大小顺序:(1)硅胶TLC(条件CHCl3—MeOH4:1展开),Rf值()>()>()>()(2)聚酰胺TLC(条件60%甲醇—水展开),Rf值
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