肺癌的基因治疗

肺癌的基因治疗

白春学张新复旦大学呼吸病研究所中山医院肺部肿瘤综合诊疗中心

复旦呼研所基因治疗的定义

依靠遗传物质即基因（无论是人本身或外源的）来治疗疾病,包括纠正人自身基因的结构或功能上的错乱，阻止病变的进展,杀灭病变的细胞，或抑制外源病源体遗传物质的复制，从而达到治病目的。肺癌分子发病机制通常观察到的遗传变化烟草致癌物对外界信号的异常反应

丢失细胞周期控制丢失凋亡途径丢失抑制转移能力血管生成永生化自分泌生长环非典型肺泡增生前恶变腺瘤肺癌原位癌发育不良支气管花生正常上皮基因治疗的要素确定目的基因选用基因载体目的基因在受体细胞中表达

恶性肿瘤基因治疗靶基因

（目的基因）的选择（一）抑制癌细胞生长1.抑癌基因

(1)．p53(2).pRB(3).p15,p16,p21

恶性肿瘤基因治疗靶基因

（目的基因）的选择2.癌基因——反义基因、RNAi

(1).N-rasKi-ras(2).IGFIR,IGFIIR(3).c-myc

恶性肿瘤基因治疗靶基因

（目的基因）的选择（二）自杀基因恶性肿瘤基因治疗靶基因

（目的基因）的选择（二）增强免疫反应：Immuno-GeneTherapy肿瘤免疫：癌细胞免疫原性降低，机体免疫系统缺陷1.增强免疫原性

(1)B-7(2)肿瘤抗原基因(3)细胞因子IL-2,IL-3,GM-CSFetc.(4)B细胞融合

恶性肿瘤基因治疗靶基因

（目的基因）的选择2.过继免疫基因治疗

TIL导入TNFα扩增导入体内IL-2

恶性肿瘤基因治疗的其它策略抑制肿瘤血管生成（angiostatin,endostain)诱导正常组织产生抗肿瘤物质（IL-2,INF)保护正常组织免受化疗的影响（谷胱甘肽合成酶）癌症基因治疗(113trialscurrentlyopeninUSinimmunotherapyofcancer)54%ofimmunotherapytrialsdedicatedtomelanomaDeliveryofthetumour-suppressorgeneTP53accountsforthenextlargestgroup

SuicideGTInhumansCancer69%基因治疗对肺癌有效吗？腺病拍毒载丸体转案染野络生型扒ｐ53基因浇的临喂床试昌验Ⅰ期临扬床试款验1煎99梨9年，Sw孟is墨he棕r等2易8例晚旱期Ｎ抵ＳＣ溪ＬＣ2撤6例标摇本中疮有1焦2例(4奥6垮%)被检荐出转怪导的蜓特异薄性ｐ53ｍＲ叫ＮＡ授。有1飘1例患委者组句织标施本出现现了菜细胞骂凋亡员。Ⅱ/李Ⅳ期临久床试陡验肺癌象和头托颈部蝴肿瘤粒中有竞抗瘤银活性晃。瘤内诞注射rA逝d-Ｐ53试验病例匀：12例气蜂道阻桶塞而哑无法锋手术俘的肺菌癌患赔者剂量佣：1×棉106～1×吓1011pf陪u，28天注鼻射1次，疗效片：6例气缺道堵息塞症击状缓胁解3例肿屠瘤部溜分缓冻解瘤内兰注射rA哄d-Ｐ53联合逼放疗弯的Ⅱ期临赔床试锯验NS辩CL阁C83％的胖患者饿局部苗组织答病理越活检重未见娃肿瘤甩组织16％的威患者施仍可插观察士到肿榜瘤病埋灶单独善放疗娇的有杯效率绪不到20％免疫村基因支治疗纳临床偏试验经GM泉-C春SF基因膝修饰勒的肿鉴瘤疫绍苗治较疗进骂展期NS懂CL览C（I、II期）83例中亲，有3例患迹者达围到完部全缓绳解抑制TG盆F-揉β表达反义RN观A转染商肺癌碎细胞什株，事然后银将此夜细胞疯给59位II牧IB或IV期的坐肺癌它患者靠注射馆，结目果有14例部蛮分缓跨解，捞一年讲生存沉率达70％SC循ID惯:场No堵n-蓬CG尸T兔Ex津am博pl挑eGe稍ne钞T睁he犯ra佛py贯f赶or秧C改an筋ce像rSC话ID势m吵ea踪蝶ns踏“厨se引ve跪re换c眨om锁bi狐ne只dim歌mu犁node花fi钉ci粉en识cy乌d诊is储ea饰se“b催ub娘bl哑e若bo大y妖di静se榴as拿e”Re器ce辜ss馆iv宋e障ge兆ne猴ti仿c倍di轰so幻玉rd语erMu就ta瘦ti达on廉i识n罗ge绕ne亦f投or戒b视lo丑oden有zad挺en恰os触in凤ede日am圆in壁as中e(A环DA失)Pr浑ec蛮ur负so辨r蚁ce柴ll换s演go羡ne迷s滨oim堡msy掘s踩go辈neNo宅t乞he袜ra茄py筑t螺o山tr袭ea梯t沾th疗is味d弹is累ea判se销u葛nt访il箩G太TNo宿rm离al害A唉DA轮g们en旬e饺is沃t热ra蹲ns右pl靠an存te效d掏in牺to钢p沈at被ie淹ntRe僚st棒ar平tsim紧msy扭sBe舱st照t轻o扎at酬ta怖ck颜d立is饰ea筐se绵a滑t竭so度ur宋cePu释t床wi喷ld停g食en树e雁in造s茧te倾m刘ce良ll探s雅th网at称p女ro丙du求ceim秀msy鸣s光us费in堡gav纸ir宣ul矿en挠tre察tr滋ov悉ir扯usAtr移an逮sg寸en析ein顷te男gr肆at丽es惑w胳it护h洁bo贼dy丑c河el挂lsSC昆ID患:鸦No遵n-畅CG沿T画Ex概am谁pl永e基因磨治疗仍安全楚吗？？？No著t功he湾ra掏py觉t必o保tr迷ea挽t物th颜is佣d交is乘ea坏se千u车nt幕il悠G俘TNo问rm识al郊A还DA较g轨en奇e剂is奔t长ra刮ns序pl窝an毅te结d蛛in功to肢p汉at花ie近ntRe倾st粱ar尊tsim馅msy慌sBe粥st归t裂o歪at宿ta五ck佣d熔is秆ea趋se首a膏t疫so熔ur写cePu侍t嫩wi埋ld乎g循en纹e救in矮s会te劝m妇ce韵ll羞s停th眯at聚p滩ro城du厌ceim通msy础s武us夸in爸gav盘ir跃ul虽en轮tre舟tr隔ov谢ir谈usAtr毅an毅sg斗en负ein埋te珍gr虎at也es冒w或it奴h龄bo谅dy酱c问el烘lsSC赶ID许:祝No蚁n-候CG出T牧Ex亦am惧pl君e基因怠治疗拆所致害首例贪死亡19露99年9月，脏一例娃遗传疏性鸟互氨酸栽氨甲或酰转扒移酶(O恭TC阅)缺乏伯的患肃者，眠于接贿受以兔腺病利毒为湿载体屠的OT杜C基因进治疗4天后象死亡搁。Je淋ss申eGe费ls乘in族ge感r他是50鸟00多例辉临床迅试验智者中招因基躺因治声疗副带反应秀发生伶死亡恋的唯喊一例身。四个翻主要饼问题FDA还没有批准任何人类基因治疗药物上市

2)免疫反应.降低疗效3)病毒载体的问题.毒性、免疫炎症反应、恢复复制能力的危险。4)多基因病变.单基因治疗疗效有限.1)基因治疗作用时间.很难做到不让基因整合到基因组而取得长期效果。世界摧首个槽获准纱上市瞒的基轧因治径疗药勾物深圳好市赛范百诺舒基因树技术印有限雕公司通用劣名：重组仙人p5普3腺病赚毒注减射液注册批商标拼名：今又觉生（Ge佛nd输ic西in钳e）英文亏名：Re尝co巡寿mb负in腥an揭t淋Hu断ma满n条Ad蔑-p葵53坚I鹊nj旱ec勾ti途on主要呢组成湿成分哑：重组聪人p5地3腺病秧毒颗邮粒今又或生临床工疗效联合量放疗治疗合中晚方期头储颈部封鳞癌爷患者晒，CR率达64％，赞是单刑纯放抵疗CR率的3.拴4倍联合笛常规原放/化疗治疗业非头党颈部智实体拢瘤（30种，糖包括陈主要询实体而瘤）巩，CR亭3休2％；PR载2纤7％；NC牺4稍1%。单药玩治疗复发奖性晚悄期头单颈部走鳞癌梯患者玩的治祸疗结概果：50％以待上的形病人冤肿瘤天缩小腹，最冷大缩刑小率匆达95％。今又备生瘤内蔽注射着重组牵人腺萄病毒猪治疗腾晚期摔肺癌版临床竟试验蜻观察例数炊：15用药绸方式船：经皮纱肺穿脚刺剂量阔：1次/周X4页/疗程疗效洞：缩肥小5例无变剥化7例增赤大3例H1铃01H1奏01复活制煤型颗腺很病脚毒违治临癌摘机救制H1坑01的E1许B蛋白铺缺失,P朗53蛋白星行使听职能P5驱3蛋白凝阻止怖腺病黎毒在缘瑞细胞票中复帐制繁浩殖正常吴细胞铺存活正常没细胞H1女01感染P5蛋3功能核失常的癌爽细胞H1户01在癌栽细胞玻中复饥制繁侨殖H1鼓01选择着性杀仅死P5蓝3功能银失常拣的癌素细胞P5绸3缺失桐的癌肥细胞H1烫01P53P53P53我们捞还能洞做些仁什么忌？更好替的载贱体提高某转染售效率治疗池基因Im签mu准no床li照po期so彩me横sfo窝r佳ac纵ti供ve古t坚ar轻ge貌ti悔ngAn其ti句bo苏dy丹a女ga蔑in趣sttu俩mo董r暑sp柔ec美if则ic腔m朗ol滥ec悬ul苦eswi吴ll标t愚ar毫ge狂t壳th咐em届t念o店tu嘉mo贩rs更好趟的治禾疗策掉略RN确A干扰采？RN鸡Ai现象胳的发腥现RN窜A干扰延特点专一颤性高作用煌稳定效率脉高操作盆较简起便IR临ES戚SA治疗卖肺癌蒙疗效NS得CL捉C40确-8皂0%Pr皮os挥ta不te40响-8烦0%Ga扮st复ri配c33要-7挤4%He单ad驻a密nd株n鲁ec劝k90校-1屿00错%Br麦ea禽st14腥-9敲1%Co盏lo舍re旺ct致al25党-7监7%Pa昏nc肃re顷at愉ic30允-5畏0%Ov炭ar注ia柜n35辜-7租0%高表竭达EG迷FR的肿灵瘤荧光五显微辛镜下扭观察si代RN妙A-E蹲GF滩R的抑禾制效筐应怀（A5岛49细胞暗）a空白对照bLF2000

c无关siRNAdsiRNA－EGFR生长负抑制符试验A5逼49汽：8饥5.购0%SP椒C-家A1步：7券8.绞3%集落哈形成狭实验图15

dsRNA-EGFR抑制A549（左）、SPC-A1（右）细胞集落形成。a：对照组，b：空白载体组，c：dsRNA-unrelated组，d：dsRNA-EGFR组63祝.3贡%66堂.8广%化疗斩敏感处性分菌析图18RN拆Ai抑制EG轨FR表达站对A5嚼49（左）尺、SP祖C-妹A1（右）育细胞慢化疗咱敏感铜性的拣影响沈。A5香49对照封组、名空王白载最体组石、ds蚀RN革A-u确nr改el祥at芽ed组、ds道RN毙A-E劲GF弃R组IC霉50依次所为2.冈67幻玉μg昼/m首l、2.馆30臭μg厚/m岛l、2.建19行μg片/m旺l、0.巨50绩μg炸/m幕l。SP称C-爬A1在IC膊50依次部为3.培67志μg劈燕/m辣l、3.拐11类μg齿/m茶l、3.泊07阵μg晋/m宾l、0.抚43豆μg肉/m丧l化疗孕增敏4～7倍肿瘤食生长磨抑制帅率图3各实眯验组度肿瘤好生长沙曲线廊图。余空白衬载体垃组、ds教RN屋A-u务nr只el生at稿ed组、ds便RN汗A-E俭GF骂R组肿腾瘤生端长抑杨制率像依次茧为19谣.7举2%、13瞧.5阻9%、75丑.0洋3%75齿.0糟3%13野.5挥9%19狠.7序2%相关性的课坐题及鹊论文课题磁：基于RN鸦Ai技术萝抗肿芝瘤新饼药研飘究04朴DZ牲19敞20乌8；上栏海市赴科委纠重大分项目用新四方法示提高