茶叶有效成分分离技术-茶氨酸的提取纯化（茶叶深加工）

茶叶有效成分分离制备技术茶氨酸的的提取纯化目录壹贰概述茶氨酸的提取纯化壹概述一、概述茶氨酸(L-theanine)系统命名为：N-乙基-L-谷氨酰胺(N-ethyl-L-glutamine)，是1950年酒户弥二郎博士在研究玉露茶鲜爽滋味成分的过程中，从新梢中分离鉴定岀的不参与组成蛋白质的一种氨基酸，为茶叶的特征氨基酸。它在绿茶中占游离氨基酸的40%〜60%，是茶叶中含量最多的氨基酸，在高级绿茶、新茶中含量丰富，占干茶含量的1%〜2%。其结构式(陈宗道等，1999)：贰茶氨酸的提取纯化二、茶氨酸的提取纯化提取茶氨酸特殊试剂沉淀法是采用某些有机或无机物与相应氨基酸形成不溶性衍生物的一种分离方法。茶氨酸与碱式碳酸铜生成淡紫色柱状铜盐，利用此性质可将茶氨酸分离。因茶叶中存在的游离氨基酸为水溶性的，选用热水浸提。用醋酸铅沉淀去除茶汤中的蛋白质、多酚类和部分色素。通H2S去除过剩的铅，用氯仿萃取去除咖啡碱。茶汤中茶氨酸经碱式碳酸铜成盐后，过滤除去其他组分。茶氨酸铜盐经稀硫酸溶解、加入H2S和适量Ba(ＯH)2抽滤去滤渣、浓缩、精制后得天然茶氨酸纯品。但是此法收率较低，引入杂质重金属离子Pb2+、Cu2+，得用硫化氢除Pb2+、Cu2+，而硫化氢制气比较麻烦，还要加入Ba(ＯH)2沉淀硫酸根离子，工序较多。茶氨酸铜盐在稀硫酸中溶解度不大，为使铜盐溶解，加入稀硫酸量相当大，这样造成除铜盐硫酸根时，形成大量硫酸锐沉淀，且造成茶氨酸损失。（一）用特殊试剂沉淀法二、茶氨酸的提取纯化（二）离子交换法提取茶氨酸用茶末6倍量的热水于60°C下浸提3h，过滤，滤液用盐酸调节溶液的pH为3.5，加入1%的壳聚糖溶液絮凝去杂后，用非极性大孔吸附树脂脱色及除去大分子物质，过滤浓缩，浓缩液调节至中性后加热至70°C，搅拌下加入碱式碳酸铜，得紫色沉淀物。沉淀用1mol/LH2SO4溶解得茶氨酸、硫酸铜混合液，通入足量的H2S气体以去除铜离子，加入适量Ba(OH)2沉淀硫酸根离子，抽滤得茶氨酸溶液，经减压浓缩，真空干燥，得茶氨酸粗品，无水乙醇重结晶干燥得白色针状结晶。二、茶氨酸的提取纯化（三）从茶多酚工业废液中提取茶氨酸茶氨酸茶多酚生产企业的工业废液中含有约2%的茶氨酸，如能利用工业废液为原料提取纯化茶氨酸，不仅产品成本相对较低，而且可以很好地解决茶多酚生产厂家工业废液的出路问题，具有较好的应用前景。以茶多酚工业废液为原料提取纯化茶氨酸的工艺流程如下：二、茶氨酸的提取纯化（三）从茶多酚工业废液中提取茶氨酸在烧杯中加入一定浓度的茶多酚工业废液，用1mol/L稀盐酸调节pH。在搅拌下缓慢加入絮凝剂，使其完全混合均匀，然后慢速搅拌养絮，直至絮凝反应结束。具体方法：取10mL吸附材料于三角瓶中，加入待处理液50mL，水浴摇床中平衡2h，过滤分离去除吸附剂，取清液。1.絮凝2.吸附二、茶氨酸的提取纯化（三）从茶多酚工业废液中提取茶氨酸具体方法：3.离子交换静态交换实验：在烧杯中分别加入已用不同pH的柠檬酸缓冲液平衡过的树脂20g及原料液100mL，恒温水浴摇床中平衡2h，吸附平衡后过滤分离树脂与清液。动态交换实验：转H+型的732树脂装柱(20mmX200mm)后用缓冲液平衡，样液调pH后上柱吸附，观察不同浓度样液和不同流速下树脂渗漏、饱和的情况。流出液分段收集。二、茶氨酸的提取纯化（三）从茶多酚工业废液中提取茶氨酸具体方法：4.结晶结晶取粗茶氨酸(经阳离子交换工艺)少量配成80%(m/V)的水溶液，添加数倍体积无水乙醇，0°CT冷藏24h析晶。经过以上工艺可得到纯度达90%的茶氨酸产品，得率为0.8%。此茶氨酸提取纯化的工艺较简单，设备要求不高，且利用茶多酚工业废液作为原料进行生产，成本相对较低，因而具有较好的应用与开发前景。二、茶氨酸的提取纯化（四）茶树细胞培养提取茶氨酸法茶树细胞培养完成后，将细胞冻干后磨碎成粉，用70%的乙醇