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3-α羟基类固醇脱氢酶睾酮假单胞菌分泌的多种类固醇脱氢酶01简介应用目录02基本信息3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD,E.C.1.1.1.50)是睾酮假单胞菌分泌的多种类固醇脱氢酶的一种。简介简介3α-羟类固醇脱氢酶(3α-HSD,E.C.1.1.1.50)是睾酮假单胞菌分泌的多种类固醇脱氢酶的一种,可作用于多种类固醇基质,可逆地催化C<,19-27>类固醇3位羟基/酮基的氧化还原<'>.胆汁酸是3α-HSD的作用底物之一,临床上用3α-HSD作为工具酶来测定人血清中的总胆汁酸(TBA)浓度.目前,TBA测定中所用的工具酶3α-HSD均从睾酮假单胞菌直接提取而来.天然3α-HSD提取工艺复杂,为了和其它蛋白相分离,需经过多步层析和制备性等电聚焦电泳技术来纯化<'>,步骤繁琐,纯化过程中伴有酶活性的丢失,酶蛋白的得率低,并且3α-HSD与β-HSD也难以分离,这使得直接从细菌中分离的天然3α-HSD价格昂贵,在一定程度上限制了TBA测定的临床推广.因此,研究以pET15b质粒为载体建立了3α-HSD的原核表达系统,并成功地表达了融合蛋白.利用pET15b质粒编码重组蛋白N端的His标签经Ni-Sepharose柱进行亲和层析,所得样品中3α-HSD的纯度较高,在SDS上呈现单一的条带,回收率达68%.这为血清TBA酶循环法测定的建立奠定了基础.应用应用产品以及化学式(4张)睾酮假单胞菌—3α羟类固醇脱氢酶及其在总胆汁酸测定中的应用（睾酮假单胞菌(comamonaspseudomonastestosteroni,CPT)是一种需氧、非发酵的革兰氏阴性菌.它可产生多种类固醇脱氢酶,其中之一是3α-羟类固醇脱氢酶(3α-hydroxysteroiddehydrogenase,3α-HSD).3α-HSD可作用于多种基质,可逆地催化C19～27类固醇3位羟基/酮基的氧化还原反应.1956年,Talalay等首先证实3α-HSD是类固

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