肿瘤标志物(上课用sale)课件

肿瘤标志物检测的运用内容一,肿瘤现状二,肿瘤标志物的应用领域三,肿瘤标志物的分类和介绍四,肿瘤标志物在临床的具体应用五,常见问题分析一：我国恶性肿瘤发病的现状肿瘤是严重威胁人类健康的重大疾病，死亡率高1991～2000

城市居民死亡率123.92/10万→146.61/10万增加18.31%

农村居民死亡率101.31/10万→112.57/10万增加11.03%目前我国男女前三位的恶性肿瘤是肝癌，肺癌，胃癌，

5年生存率不到30%恶性肿瘤死亡率上升的主要因素人口年龄结构的变化是最主要的影响因素环境因素：化学因素物理因素病毒及细菌感染和慢性炎症的刺激生活方式的改变二：肿瘤的主要诊断技术物理学方法：X线CTB超等肿瘤至少达到1-2CM才能检测（肿瘤细胞已达到109）生物学方法：PCR肿瘤细胞在106

但此时可能已经转移免疫学方法：肿瘤标志物TM较其他方法可以提前3-6个月发现肿瘤的复发和转移1μɡ1㎎1ɡ10～100ɡ1㎏肿瘤大小1021061091010～10111012肿瘤细胞免疫检测生物物理学技术诊断价值潜伏期（数月至数年）早期发病期晚期三：肿瘤标志物（TM）1：定义

肿瘤标志物通常是指由肿瘤细胞合成、释放，或者是机体受肿瘤刺激而产生的物质。2：理想的肿瘤标志物

灵敏度

100%使肿瘤能早期发现，早期诊断特异性

100%即肿瘤患者为阳性，而非恶性肿瘤患者为阴性，因此，能对良、恶性肿瘤进行鉴别；能对肿瘤进行定位，即具有器官特异性；与病情严重程度、肿瘤大小或分期有关，即肿瘤越大或越晚期，肿瘤标志物浓度越高；监测肿瘤治疗效果，即肿瘤标志物浓度增高或降低与治疗效果密切相关；监测肿瘤的复发，即肿瘤治疗后肿瘤标志物浓度降低，肿瘤复发时明显升高；预测肿瘤的预后，即肿瘤标志物浓度越高，预后越差，反之亦然。但至今还没有一种肿瘤标志物能完全满足上述要求。

3：肿瘤标志物的分类一种称之为特异性肿瘤标志物，即只有患某种特定肿瘤时，它才会显著性升高另一类称为辅助性肿瘤标志物，它在正常情况下也可由某种正常组织产生，但在类似组织发生肿瘤时，其含量会急剧胚胎抗原肿瘤相关糖脂及糖蛋白激素肽，酶及蛋白四：肿瘤标志物的应用价值普查定位分期疗效检测1：普查：由于目前临床常用的肿瘤标志物在诊断恶性肿瘤时灵敏度和特异性不够高，故目前主要用于肿瘤的辅助诊断；不能作为肿瘤诊断的主要依据；也不提倡对无症状人群进行普查，个别指标（如甲胎蛋白和前列腺特异性抗原）可用于高危人群筛CEA普查结肠癌结果发病率37/10万特异性95%灵敏度70%假阳性数4998人/10万检出肿瘤病人数26人/10万所以肿瘤标志物的筛查对高危人群有很大应用价值。

TM应用于高危人群筛查的原则

⑴该肿瘤标志物对早期肿瘤的发现有较高的灵敏度

⑵测定方法的灵敏度、特异性高和重复性好。

⑶筛查费用经济、合理。

⑷筛查时肿瘤标志物异常升高，但无症状和体征者，必须复查和随访。

2：定位

由于绝大多数肿瘤标志物的器官特异性不强，因此肿瘤标志物阳性不能对肿瘤进行绝对定位。但少数肿瘤标志物，如前列腺特异性抗原（

PSA）、甲胎蛋白（AFP）和甲状腺球蛋白（TG）等对器官定位有一定价值。

3：确诊因目前TM无足够的灵敏度，不能排除假阴性的结果，所以不能用于肿瘤的确诊，应用原则：筛查出来的高危人群应作近一步的确诊检测影像学检测病理诊断等4：TM在判断肿瘤的大小和临床分期的价值

大多数情况下，肿瘤标志物浓度与肿瘤的大小和临床分期之间存在着一定的关联。但需注意各期肿瘤的肿瘤标志物浓度变化范围较宽，会有互相重叠

,因此,不能根据肿瘤标志物浓度高低来判断肿瘤的大小和进行临床分期。

5：TM最重要的临床应用价值——疗效检测和预后判断临床可通过对肿瘤标志物治疗前、后及随访中浓度变化的监测，来了解肿瘤治疗是否有效，判断其预后，为进一步治疗提供参考依据。为确定何种肿瘤标志物适用于对该患者的监测，在治疗前应做相关肿瘤标志物检测。目前尚无一种被普遍认可的用TM浓度来评价治疗有效的标准，Beastall提出的方案是可行的无效：TM浓度与治疗前相比下降<50%改善：TM浓度与治疗前相比下降>50%有效：TM浓度与治疗前相比下降>90%显效：TM浓度下降到非恶性肿瘤参考范围内以CEA为例治疗中或治疗后TM浓度变化3种类型A：提示肿瘤全部除去病情缓解B：提示复发或转移C：提示肿瘤残留或肿瘤转移注：化疗放疗和手术后测定TM浓度可能有短暂的升高，由于肿瘤的坏死所致化疗放疗和手术后测定TM浓度重新恒定升高，表示治疗无效肿瘤标志物的分类胚胎性肿瘤标志物：如

AFP，CEA等，含糖物质类标志物：如CA125，CA15-3，CA19-9

，CA50，CA242等。酶类标志物：当机体某个部位发生肿瘤时,肿瘤细胞代谢异常，使某些酶或同工酶合成增加；或由于肿瘤组织的压迫和浸润，导致某些酶的排泄受阻，使肿瘤患者血清中酶活性异常升高，酶是较早发现并用于临床诊断的一类肿瘤标志物，如NSE升高等。激素类标志物：正常情况下不产生激素的某些组织，在发生恶变时能产生和释放一些肽类激素（异位内分泌激素）并导致相应的征候群

其它蛋白质类标志物：β2微球蛋白，铁蛋白等在肿瘤发生时会升高；甲胎蛋白（AFP）一、原发性肝癌

AFP升高是原发性肝癌的重要指标之一，其特异性强、灵敏度高。血清含量大于500ug/L作为原发性肝癌的诊断阈值。大部分患者呈持续性高水平升高，部分患者呈低水平升高，即20ug/L-400ug/L。

但AFP阴性不能排除原发性肝癌，因为18%-20%的原发性肝癌患者血清AFP正常。

癌胚抗原（CEA）

一般情况下，CEA是由胎儿胃肠道上皮组织、胰和肝的细胞所合成。通常在妊娠前6个月内CEA含量增高，出生后血清中含量已很低。健康成年人血清中CEA浓度小于25μg/L。

CEA属于非器官特异性肿瘤相关抗原，分泌CEA的肿瘤大多位于空腔脏器，如胃肠道、呼吸道、泌尿道等。正常情况下，CEA经胃肠道代谢，而肿瘤状态时的CEA则进入血和淋巴循环，引起血清CEA异常增高，使上述各种肿瘤患者的血清CEA阳性。临床上血清CEA浓度的变化主要有下列原因：1,原发性结肠癌，患者CEA升高者占45－90%。2,腺胰癌、胆管癌、胃癌、食道癌、肺癌、乳腺癌和泌尿系肿瘤，阳性率50－70%。3,结肠癌患者手术切除后1－3周内血中CEA可下降到正常水平。如术后CEA持续阳性，说明手术切除不完全或癌肿发生转移，提示病人预后较差或者有复发的可能。

良性肿瘤、炎症和退行性疾病，如结肠息肉、溃疡性结肠炎、胰腺炎和酒精性肝硬变病人CEA也有部分升高，但远远低于恶性肿瘤，一般小于20μg/l。所以测定CEA可以作为良性与恶性肿瘤的鉴别诊断依据。癌抗原CAl25

癌抗原125(CancerAntigen，CA125)是一种与上皮性卵巢癌相关的高分子量糖蛋白。卵巢癌多见于55-75岁妇女中，其发病率随年龄的增长而上升，由它引起的死亡占40岁以上妇女死亡原因的2%。研究表明，浆液性子宫内膜样癌、透明细胞癌、及未分化卵巢癌患者血清中的CA125含量明显升高。

据统计，60%卵巢癌，80%播散型卵巢癌患者的血清CA125浓度大于35kU/L。另外，CA125血清浓度轻微上升还见于1％健康妇女，3%良性卵巢疾患，6%或非肿瘤患者，包括孕期起始3个月、行经期、子宫内膜异位、子宫纤维变性、急性输卵管炎、肝病、胸腹膜和心包感染等。

CA125测定和盆腔检查的结合可提高检测的特异性。动态观察血清CA125浓度有助于卵巢癌的预后评价和治疗控制，经治疗后，CA125含量可明显下降，若不能恢复至正常范围，应考虑有残存肿瘤的可能。

目前，CA125是诊断卵巢癌和监测其复发的最敏感指标。癌抗原CAl5—3

CA15-3存在于多种腺癌内，如乳腺癌、肺癌、肺腺癌及卵巢癌等，是检测乳腺癌比较重要的抗原。

30-50%的乳腺癌患者CA15-3明显升高；60-80%进展期乳腺癌病人CA15-3血清水平高于30kU/L。CA15-3通常可用于判断乳腺癌进展与转移；因其含量的变化与治疗结果密切相关，因此也可用于检测治疗效果。它也是检测乳腺癌患者术后复发的最佳指标，当CA15-3大于100kU/L时，可认为有转移性病变。

CAl5—3又被称为乳腺癌抗原，用CAl5—3诊断乳腺癌，阳性率为30％左右，有转移灶的乳腺癌阳性率可达63％以上。其他肿瘤的阳性率为胰腺癌20％，大肠癌16％，胃癌10％，但早期乳腺癌和非恶性乳腺肿瘤的阳性率较低。癌抗原CAl9—9

CA19-9是胰腺癌，胃癌，结、直肠癌、胆囊癌的相关标志物，大量研究证明CA19-9浓度与这些肿瘤大小有关，是至今报道的对胰腺癌敏感性最高的标志物。临床上CA19-9测定主要用于以下领域：（一）、消化道恶性肿瘤：胰腺癌、肝癌系癌、胃癌、结直肠癌的CA19-9水平分别是正常均值的683、535、279、115倍。而阳性率以胰腺癌为最高，故CA19-9是胰腺癌较好的标志物；癌抗原CA50

CA50升高见于胰腺癌，阳性率为87％；胆道癌、胆囊癌阳性率为80％一90％；肝癌阳性率也可达80％；结肠癌、直肠癌的阳性率为51％，其他肿瘤如卵巢癌、子宫癌、肺癌、乳腺癌等阳性率也较高，故CA50的检测虽敏感性高，但特异性较差，只能作为辅助诊断。前列腺癌检测标志物PSA、FPSA、PAP

PSA是前列腺癌最有价值的肿瘤标志物，已被广泛应用于前列腺癌的筛选、早期诊断和分期上，其特异性高达97％。虽然PSA被公认为是一种有效的肿瘤标志物，但其仅具有器官特异性，并不具有肿瘤特异性。例如，在PSA值在４－10μg/l之间时，前列腺癌和良性前列腺疾病间有很大的重叠，这个范围称为诊断的灰色区域。因为PSA升高亦可见于7％～20％的急性前列腺炎及前列腺肥大患者。

游离前列腺特异性抗原（FPSA）

血清中的前列腺特异性抗原(PSA)有不同的分子形式，F—PSA以游离的形式循环于血液中。游离PSA／总PSA＞25%，前列腺癌的可能性极小（＜10%）。游离PSA／总PSA＜10%，前列腺癌的可能性极大（＞80%

），必须作前列腺活检以确诊。神经元特异性烯醇化酶（NSE）NSE主要是神经母细胞瘤和小细胞肺癌的检测指标神经母细胞瘤是常见的儿童肿瘤，占1-14岁儿童肿瘤的8％-10％。NSE作为神经母细胞瘤的标志物，对该病的早期诊断具有较高的临床应用价值。小细胞肺癌（SCLC）是一种恶性程度高的神经内分泌系统肿瘤，占肺癌的25％-30％。小细胞肺癌可表现神经内分泌细胞的特性，患者血清中有过量的NSE表达，比其它肺癌和正常对照高5-10倍以上。小细胞肺癌对复合化疗及放疗敏感，且有相关治愈报道，因此正确诊断癌症的类型，特别是确定小细胞肺癌的诊断十分重要.人绒毛膜促性腺激素（hCG）滋养细胞肿瘤的诊断和病情监测:

葡萄胎时HCG血浓度经常超过100，000IU／L，如果孕三个月后HCG维持高浓度不降，提示葡萄胎；在葡萄胎胎块清除术后，HCG应呈大幅度下降，且在清除后的16周下降到阴性水平。若下降缓慢或下降后上升，或16周未转阴为侵蚀性葡萄胎的征象。HCG的下降与侵蚀性葡萄胎的治疗效果一致。绒毛膜癌时HCG水平可很高，常用于诊断和检测病情及治疗效果。

hCG还会在乳腺癌、睾丸癌、卵巢癌增高。当子宫内膜异位症、卵巢囊肿等非肿瘤状态时，hCG也会增高。铁蛋白（Ferr）

铁蛋白是人体内铁的储存形式,其降低见于缺铁性贫血而增高则有各种原因,如肝脏疾病、血色病、急性感染、恶性肿瘤等。血清铁蛋白降低见于：⑴缺铁性贫血，具有早期诊断价值。⑵营养不良、严重慢性疾病体内贮存铁减少导致的继发性贫血。血清铁蛋白增高见于：⑴体内铁贮存过多，如长期接受输血和不恰当的铁剂治疗；⑵恶性肿瘤；⑶急性感染和炎症；⑷肝脏疾病如肝硬化、肝坏死和心肌梗死等。肿瘤标志物的合理应用和注意事项

1：动态纪录肿瘤标志物的浓度变化

肿瘤标志物测定的临床价值在于动态观察，有时即使在参考值范围内的浓度变化，可能也是有价值的。某些肿瘤如术后CEA浓度快速增（>4μg/L）高表示骨和肝转移，而术后浓度缓慢增加（<2-4μg/L）表示脑，软组织和皮肤转移。因此每个病人总有最佳的自身对照。但为了保证结果的可靠性，当测得的标志物浓度增加时，应在短期内抽取另一样本进行重复测定。2：定期测定肿瘤标志物的浓度应根据不同的病人，不同的肿瘤制定不同的测定时间表。一般而言治疗前应测定每个病人肿瘤标志物的基础值，治疗后1-2年，应每月测定（测定时间应根据肿瘤标志物的半衰期而定，通常在2-14d内完成），至肿瘤标志物浓度明显下降后，每3个月测定一次。第3-5年，应每年测定1-2次。第6年起，每年测定一次。每次改变治疗之前，或怀疑复发和转移时，均应及时测定标志物的浓度。

3：合理选用肿瘤标志物同一肿瘤可含有一种或多种TM，而不同肿瘤或同种肿瘤的不同组织类型即可有共同的TM，也可有不同的TM.因此选择一些特异性较高的联合测定某一肿瘤，有利于提高检出的阳性率，而且，合理选用TM常可在临床症状出现之前数月鉴别出复发和转移。TM的组合测定可提高监测的灵敏度，但常导致特异性下降。因此，TM的组合测定应遵循一定的原则。常用诊断价值及合理使用见下表肿瘤首选标志物补充标志物

肺癌CEA、NSE、CYFRA21-1

TPA、SCC、TSA、降钙素

肝癌AFPAFU,CEA、CA199、

Ferr

乳腺癌CA15-3、CEACA549、hCG

、TPA、TPS

胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA242

前列腺癌PSA、f-PSAPAP

结肠直肠癌CEACA19-9、CA50

胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125

卵巢癌CA125CEA、hCG

、CA19-9

睾丸肿瘤AFP、hCG

宫颈癌SCCCA125、CEA、TPA

膀胱癌无TPA、CEA

骨髓瘤本-周蛋白、β2-M4：临界参考值及结果的判定实验室的临界值地域性参考值确定的时间问题个体差异TM分泌极其微量，使用抗体特异性较差，原料批间差异

临界值仅能起到参考的作用总结：80年代以后，肿瘤标志物大量涌现，所能使用的单克隆抗体数以千计，而且新的单抗还在不断问世，但至今还没有一种标志物为肿瘤细胞所特有，所以TM测定在健康人群筛查、对有症状的病人进行鉴别诊断、癌症的临床分级、估计肿瘤的体积或者预测病情进展等方面所起的作用还是有限的。病理诊断仍是肿瘤的最可靠手段。虽然肿瘤标志物目前还不能用于确诊肿瘤，但在疗效监测，预后，指示复发和高危人群的普查中具有独特的价值。随着对肿瘤发病机理的深入研究和分子生物技术的不断发展，新抗体的不断出现，以及人染色体基因工程的完成，有望在分子水平的检测中出现更多，更特异性的TM肿瘤标志物检测的影响因素和质量控制

㈠分析前

标本的采集

血液标本的正确采集和保存是肿瘤标志物测定结果准确的重要保证

标本的保存血液标本采集后应及时离心，保存

於4℃冰箱中，24小时内测定；如在短期内测定，则应-20℃保存，长期保存应置-70℃冰箱,标本应防止反复冻融㈡分析中测定方法和试剂对检测结果的影响

不同的试剂盒测定也有差异,有研究报道，使用12种不同的CEA试剂盒检测某一混合血清中CEA的浓度，结果其差异超过100%

其原因可能是由于使用的单克隆抗体针对抗原的位点不同所致。有时即使使用同一抗体，也可能因抗原异质性（如原发肿瘤转移后，失去了原有的抗原性而停止分泌原有的肿瘤抗原）或基质的影响而得到不同的结果。是没有测定的标准化，包括缺乏统一的抗原、抗原成分、校正品和参考方法等。因此，在工作中要尽量使用同一种方法，同一种仪器和同一厂家的试剂盒进行测定。

“钩状效应”对检测结果的影响对样本进行适当稀释后重新测定

交叉污染对检测结果的影响类风湿因子