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文档简介

项目七组培实例

蝴蝶兰的植物组织培养技术

学习目标了解蝴蝶兰的简介；了解蝴蝶兰组培的原因；掌握蝴蝶兰的组织培养技术。兰花介绍

一、蝴蝶兰简介蝴蝶兰（Phalaenopsis

aphrodite

Rchb.F.）别名蝶兰、台湾蝴蝶兰，为兰科、蝴蝶兰属多年生草本植物。原产于亚热带雨林地区，分布在泰国、菲律宾、马来西亚、印度尼西亚以及中国台湾。蝴蝶兰是在1750年发现的，迄今已发现70多个原生种，大多数产于潮湿的亚洲地区。蝴蝶兰为附生性兰花，其白色粗大的气生根露在叶片周围，除了具有吸收空气中养分的作用外，还有生长和光合作用。新春时节，蝴蝶兰植株从叶腋中抽出长长的花梗，并且开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐，素有“洋兰王后”之称。

二、蝴蝶兰组培的原因可以有效地保持母本的优良性状，变异率最低。

三、蝴蝶兰组培技术

1.外植体的选取与消毒

将蝴蝶兰的花梗由植株上剪下，如果已开花的部份可以剪下，留下未开花的节，再将花梗裁剪适当长度，再将包覆在梗节生长点外的苞片，小心的剥除，勿伤及生长点，置入超音波震荡器中，以稀释的漂白水溶液消毒。如无震荡器时，可置入装有稀释过的漂白水溶液的试管中，手动的大力摇晃试管，也可达到消毒的目的。

将震荡器或是试管中的花梗取出，置入无菌水中，摇晃瓶身，可重覆此一动作2-3次，但需取出花梗，置入有无菌水的新瓶中，藉此洗净漂白水，洗净后，以镊子取出花梗，以酒精浓度75%的酒精棉花擦拭花梗，以梗芽生长点向下，酒精棉花擦拭由上而下单一方向擦拭，切勿以来回的方式擦拭梗芽生长点。将花梗两端切除：芽尖端切90度另一端则呈45度斜切。

再将切面为45度端插入培养基中。塞子消毒后塞住瓶口，瓶口处再以酒精灯消毒，覆盖上铝箔纸避免感染。

新长出的株体消毒不彻底瓶内发霉2.培养基及培养条件基本培养基为B5或MS；愈伤组织诱导培养基①B5+KT0.2mg•L-1+NAA1.5mg•L-1+椰子汁150g•L-1；原球茎增殖培养基：②B5+GA30.05mg•L-1+水解酪蛋白；壮苗培养基③1/2MS+20%香蕉泥；生根培养基④1/2MS+IBA0.3mg•L-1。培养温度25℃-28℃，光照10h/d，光照度为2500lx。3.愈伤组织及芽的诱导将灭过菌的外植体接种于培养基①上，暗培养4-5d后，转为光照培养15d，根尖切口处膨大并产生绿色瘤状愈伤组织，30d后将愈伤组织切下接种到增殖培养基②上，再培养30d后从愈伤组织表面绿色颗粒逐渐形成芽点，进而分化出芽。待芽长到1cm以上时，将其分切接种于培养基③中，继续长大形成壮苗。蝴蝶兰芽的诱导5.生根与炼苗移栽将具有3-4片叶，高约3-4cm芽苗切下转移到培养基④中。因苗在生根培养基中生长缓慢，约90d转移1次，生根率达100%。移栽时，小心取出小苗，洗净根部培养基，栽入消毒液浸泡过的水苔中。防阳光直射，保持湿度85%左右，温度25℃-30℃的环境，待新根伸长、新叶长出时，每隔7d喷1次0.5%KH2PO4溶液进行叶面追肥，成苗率95%以上。思

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