流行性脑脊髓膜炎诊断标准及处理原则GB168841997

流行性脑脊髓膜炎则GB16884197^~`前言流行性脑脊炎脑菌(eea e，)通过呼吸道引脑成受Nm大数，刺Nm可暴型作。贯工，病回行标。本标准录A和B录CDE和F为示附录。民。病京医京防。芝。术染室。1围本标准规定了流脑。各流。2断则1应根据流行病学资料和临床表现及实验室检验结果做出临床诊断。2确诊需要培养Nm或检测Nm群特异多糖抗原或Nm的DNA性期和抗Nm特抗体。3断准1史在冬春季节和流行地区内前7。2现1。2面色、发皮发有的血、及青唇纯疱。3。4合。5。6、。7呼吸快慢及。8、多现。3断1血象达40×(上始)9终)在80～90％上。.2疑为流脑者应做腰椎穿刺检查，脑脊液(CS)压力常增高达1a以上；典型病例CSF蛋达1～5g于2.22mmF片可在中细革性。3人CF或急性期血离到N见录A录)。4从病人急性或CSF中检测到Nm群特异性多糖抗原，见附录C(附录)。5检测病呈4或4倍以上升高录B标准附录。3.6以PCR检测到或CSF中Nm的DNA特录D的附录)。4类1：1加1或3.22或3..3。2临床加3.2.4或3.2.5或3.6或3..7项。.3加3..3或3..4或3.3.5或3.3.6之一项。4理则1录E(录)。1。2。3。4血)。5。2对易录录。1。2定A前到9。3除了完成上的A群脑膜炎双球菌糖，制发。4在未现A群Nm引起时对15岁以下儿童，还应酌情密应苗。5非A群Nm连邻实。附录A标的附录)病诊法A1体(菌Nesia从疑集CSF期离N。A1.1标本的集A1..1CS出CSF到管心(003in3i)，过吸接到0上(F清液分检测Nm特异抗原，亦可将其置于0℃待测5境37养2h，查的离定。A1.1.2血液：采取病人急性期静脉血液无操作盛有30L增菌的葡萄肉汤三角瓶入4mL血液(余下的L血液离后血供测Nm特异抗原和抗体，一20测)养24～h。A1.2定A1.2.1细菌：Nm应，08μ×6μm大小。常成对。A1.2.2菌落：Nm接种于巧，碳37养24h，直约、、带透血培养增并周。A1.2.3生数Nm菌蔗氧。Nm新分菌有主抗血特性多主外白－M(血的2/3类P的1类P及4与5类OMP)糖(OS)H8Nm可分为13个血清群ABEH、W13Y中0病例是由AB和C群Nm引起的据2/3类OMP可将B与C群Nm分成20，不株不分以52和42P1.1P1.1、P1.15及P1.16于A群Nm有4与1两个以P1.7与P1.9亚。Nm还以分成13个S免疫中A以0和1型多B以3，7，9复合型Nm的P及S等脑行的值。附录B标的附录)血诊法B1玻凝验1目的应用对Nm株株学。2材料B1.21待的Nm。B12.2Nm血清多价含AD群含1889(Y)180(189229)，多价Ⅲ［含3191、1916X)18I、)及单清计4。B1.23洁净。B1.24生。3试方法B1.31先将诊。B1.32用。B1.33在。B1.34检查从似Nm时，先试A群血清，若不与其发生凝集，则试用B或C病人分离似Nm皆位。B1.35在。B2酶附验()B2.1用A间接法测病人急清用。2材料B2.21酶联免疫。B2.22聚板0或6孔)。B2.23加器或4或8为00μ。B2.24羊人G酶。B2.25清(清。B2.26原AB和C群Nm标准菌株或A群Nm。B2.27包液0oL缓液)：碳酸钠(O(始终)) 2g碳酸钠(Na始)2终)CO(始)3终)).g叠钠((始(终))2g加蒸至1000m，pH9.6，置4℃可备用两。B2.28洗液oL化钠)：化钠() g吐温－20(Tween－20).L至10m，前制。B2.29：钠(a)g磷酸二氢钾(下标始)2(下标终)(下标始)4(下标终)0g磷酸氢二钠(Na(下标始)2(下标终)HPO(下标始(下标终)·12H(下标始)(下标终)O)2g氯钾()g吐温－20(Tween－20).L加蒸至1000m，pH7.4，置4℃。B2.2.0底液：(10.mo1L酸氢二钠磷酸氢二钠(始)2标终)HPO始)4终)1H(始)2(终))358g蒸馏水L().mo/L柠檬酸柠檬酸〔C(下标始)3(下标终)H(下标始)4(下标终)(OH)(COOH)(下标始)3(下标终)·H(下标始)2(终O］10.g蒸馏水L(1)和(2)置℃备用。下液，H为0：(1液2L(2液2L苯胺g水5L30H(始)2终)(始)(终) μL1填充：释液 L白明胶或牛血清白蛋白(BovineSeriumAlbumin，BSA)0gB2.2.2：oL硫酸(H(下标始)2)SO(下标始)4终)。23试步骤B2.3.1包备将Nm纯培刮盐心n，30mi洗涤菌体3生理盐水中置5℃3n成1上标始)6(终菌L作为包被抗原于A群N将A群Nm到10μgmL行包。B2.32抗被置7℃原0μ置C孔3次n或板。B2.33充用1mL以0.2置温30n干孔内液体；酶标板置塑于C，可备。B2.34检测清B2.3.4.1病人急性此12开第7第8孔以稀释液代替血清置3育1h洗。B2.3.4.2物液孔加0μ置C应h上酶。B2.3.4.3B2.3.4.4

每孔加B2.0中配制液10μ置37应1n。止应每孔加2molL硫酸((下始)2(终)O始终))0μ。B2.3.4.5值在49nm每。B2.3.4.6：照(组照和检组)。B2.3.4.7结果定若被检孔的照值)≥阳。B3杀菌验1的微菌验C法)测定对Nm方人。2材料B3.21的A群2909，B和C群。B3.22稀释液：Dulbeccos盐盐水A液：氯化钠(NaCl)8.0g，氯化钾(KCl)0.2g，磷酸氢二钠(Na下标始)2(下标终)HPO(下标始)4(下标终))1.15g，磷酸二氢钾((下标始)2(下标终)PO(下标始)4(下标终))0.g，蒸馏水800m；B液：氯化钙()2标终))0.1，水100m；C液：氯化镁l始)2(终)6H始(终)O)0.g水100m。上述三液分菌121，n置4℃备按A液8份B液和C液各1的比混合H为1。用每1L稀释液灭小血清1素50μg多菌素B2500硫素50单位置4℃备用2。B3.23U的6盖板。将它们在80℃的烤2h后约8板h靶7℃后同上于8℃烤。用杂用死冲在较稀重液泡h。B3.2.4兔体B3.2.4.1的龄较。B3.2.4.2将所选置后，合到L放L—2下冻，进冻冻再时度在130以上则保存在—20℃以下冰箱用36，可将所选定的兔血清混合后进行冷冻干燥，再作质量检定，合格者则保—20。B3.25氯唑lme，TTC基(C脂)1C：牛肉膏0.5钠0.5胨30粉02调pH7.4～7.6，琼脂05。2C作每1L或20mL分装于大试管1菌15n却置℃每1L加5液0.m1％TC水溶液(存)在4℃水溶液。B3.2.5.3阳考清用Nm免疫兔制备的诊断血清，未加防高(1∶0以上)。B3.2.5.4头采用临床上输液用的玻璃输液接头作滴管，滴头采用12斜是0滴/±2滴/m它们可滴、C琼用μL稀。3菌骤B3.31靶菌备B3.3.1.1开启AB或C群Nm7烛缸培养1～2h，挑取5养0～h。B3.3.1.2B3.3.1.3

用Nm理核。菌于L菌液装若干支小试管，每管约0—20℃以Nm可存活36。B3.3.1.4需用在冰内存，供每日分菌用2每菌代数保一致。B3.3.1.5从所分取～5个典型菌落，涂抹转种1/4巧，37℃烛缸培养～6有3.5mL液壁白其研磨，制成轻度混浊的均匀菌悬液，其光密度值相当于0.1。B3.3.1.6取出上述菌悬液L到m为分光度计测密。B3.3.1.7稀释液用量按式)：XD001………()：，m；OD——光密度。按照式(B1入0.1L为01的了10倍稀释作0倍至(始)－5(终)稀释度，以菌液的含4000个换个液头。B3.3.1.8稀释好的靶菌悬液在h迅死。B3.32杀定B3.3.2.1B3.3.2.2

先在加1于μL稀液。加μL经灭活的待检血清吸5～0次后吸出2μL。B3.3.2.3从低温冰箱内取出补体，于37℃温水中摇动将其速溶，每孔加一滴。若补体已冷瓿积使。B3.3.2.4每加一稀成合浓的靶菌，微板微型荡上中振荡在养B3.3.2.5每孔加2滴已至45℃的TC微置3内养1～h。B3.3.2.6：4补体照性4孔细生对照各1滴)每5块微滴板中应。B3.3.2.7往一，着好条倾下，于3烛同培，日每靶的数及纯。B3.3.2.8判果上的和孔出定各红点目体现时判杀如所试目一为。B3.3.2.9对各的正生时出众色状落记“＋当试孔与少0少0少0左为于0个落为及杀体高。附录C提的附录)凝验C1目的应用胶乳凝集试验测定病人CS急清和尿中Nm。C2材料C2.110％胶乳颗粒(LatexPartic1es，Lx)悬液，颗粒直径为0.81μ。22从兔免疫血抗AB和C群Nm的Ig。C2.3为m。C2.4pH8.，0.mo/L酸盐缓冲液。C.5B。C.6白胶。27戊醛。28叠钠。29怀疑流脑病的CSF或急性期血清或尿。C3试验法31兔抗不同群Nm的IG致敏Lx。C3.11将10％Lx释0。C3.12取稀释的Lx液1积群Nm的IgG置L角。C3.13在37℃水浴中旋转(120r/min)振荡瓶中的反应物，致敏Lx2h。必要时可在每毫升x加5醛10～μL，这将有助于Lx附IG。C3.14离心致敏过的Lx(3000r/min，30min)，用1mL吸小吸上，量弃；加有01A的硼酸盐缓冲液(Borate－BufferedSolutionnigBSABBSB混悬Lx，同上离心，弃上清，除去游离的IgG；照此重复洗涤Lx3。C3.15用BBSB液再将Lx到为01置4用～6。C3.16用兔G同上步骤致敏Ix。2以胶乳内Nm异抗。C3.21病人标本的处理CSF离心(0n3mn)急性期液分血，置6活n；急性期尿液L加20mL无水乙醇，置41～h心(n15mi弃上清加LB将，，待中。C3.22用BB液从12起连续倍比。C3.23用9号针头分别吸取本2滴滴到玻璃板上的红圈内，其中1滴滴到上列一排的红圈内，作为试验组；另1滴。C3.24往试验加1兔IG致敏过的Lx加1正兔G所致敏的Lx悬液。C3.25轻轻地旋摇玻板，使标本与Lx充分混匀。C3.26在1～2n内即，n。C3.27若只在试验组的红圈内出现明显凝集但x本与BBB液红圈内皆不出现凝集则判断为阳性反应。此时与阴性对照组比较x悬液变得较清亮Lx明聚的。C3.28在群Nm的IG所致敏的Lx凝集反应，则说明所检标本中含有Nm相应群特异的抗原，即可辅助临床诊断为流脑。附录D提的附录)以PCR检测病人急性期血清或CSF中Nm的A特片段D1目的应用PCR检查或CSF中Nm的A。D2材料D2.1的CF或急性期血清。D22Nm板A。D2.34P。D2.4。D2.5溴化乙。6q酶(oe。D2.7物1：—G3；物2：5—CG3。D2.8液体石。D2.9。D2.10紫外光检测。1R。D2.120×PR反应缓冲液［LKl，Ls－HCl，(室温，pH8.3)，15mg始)2下标终，0.％()。D2.13载样缓冲液20％蔗糖。D2.14×TE：mL－H(始)3终)O始)3下标终)LAD2.15。D2.16分：λDAEoRIid。D3扩程序在0Lf：物0×冲液4×dP物

样序体积μ)1 02 0

度1×冲液0μL种引物1 3 5引物2 4 5

NP1μmL1μmL板A本5 0 .gNμL(需5热5n预理)去水 6 5(95浴1n心30)A聚酶751u体蜡 8 0D3.1于2℃反应2n：94℃变性反应30s；56℃退火反应30s；72℃延伸反应60s。D3.230再72伸4n。D3.3反置4℃供检测。D4测D4.1取2μL反应产物与1μL样冲液合。D4.2啶(0.μg的2％琼脂。D37×48mm微型胶，以6Vm电泳h为×E。D4.4电泳结束后，将凝胶置紫外光检测器上观察结果、照相。D4.5为6。附录E提的附录)则1型1一般疗2对症疗3病原疗

。高热、头痛、。选D霉。E1..1磺啶(D人68g/儿0.15～0g过g量碳酸分34D成人46g/d儿01～0.1g(g·d，分～3注度于。另可用SMZ(含SgTMP80mg)每h服2儿Mgg·d)，Pg·)分2。E1..2青霉素人0～20万u/d，小儿(20～40)万u/(kg·d)，分～4次静脉滴注程～7。E1..3氯霉素：对磺胺、青霉素过敏者或耐药者可选用。成人2～4gd，小儿50～100mgkg·d)分3～4次静脉滴注，程～7骨制。E1..4氨苄人～6g/儿10～300mg/g)，分23次静脉程57。E1..5头孢氨噻肟(Cefotaxime)肌注(静脉滴注)，成人2～8g/，儿童50g·d)，分24次给药，或孢噻肟嗪(Ceftriaxone一人2～g到5％葡萄糖溶液～L滴儿肌注5～2均46mg)g能素症。2休克型1病因治疗：选霉剂量(2～40)万u/(kg·d)，多与氯霉素联合用药，病情好转普。2抗休克疗E2..1量容低旋成人L静脉内滴注，24h不过1000m根静尿补。E2..2纠正酸给钠200m据检而。E2..3血管活性药：扩充血容量和纠正酸中毒后，若休克仍未纠正，可应用血管活性药山量每0静脉推注1红，重胺10g入L～0％葡萄糖溶液中静脉滴以5～10μ滴紫、、指。E2..4现DIC量5～1mg/(kg次)入0％葡萄糖溶液0～1L脉注必时每～6h重复药23次，在可先应用次为1mg/g溶入20mL10萄或水推继以1g溶入10％葡萄糖溶液或水0～10L在h慢素～4过2h。用酸6童用量～次)于10液100mL静滴，必要时～6h。E2..5肾上腺皮质激素素)的成用量300mg/d，小儿0～1mg/g)分23为0d儿为05/g·d分3。3型1抗菌药物的应用同前，治疗重点为减轻脑水肿，防止脑疝和。2脱水应：以20％甘露醇为主量1～2g/(kg·次每6或8h静脉内注完)给需23尿0～4g入0％甘露醇或5％醇脉。3肾上腺。4保插。4混合型情及疗。附录F提的附录)脑防原则流脑由Nm引峰，在高发地区还具有例由A、B和C群Nm引起的然在由B群Nm致病有所增多，但仍以A群Nm引起的病例最Nm炎有染脑A群Nm可以范脑而B群和C群Nm主要地或被Nm染免尽管Nm外活应施。1平时的预防措施1开展群众性的卫生运动，预防此病传播。搞好居民居住地方、托儿机构、中小学校、厂矿因在此期次室换。2加强体育锻强抵。3宣传防治流脑的科普知识，增强广大群众预防流脑的意识，使病人能得到早发现、早报告、早诊使。4坚流监。11疫情测：F.11。F.12F.13F.14

全报的质与过去做比水。百。与毗。12和：F.21收集疑似流脑病人CSF或急性期血分离培养N