免疫测定室内质控血清的应用

免疫测定室内(shìnèi)质控血清的应用张瑞卫生部临床(línchuánɡ)检验中心第一页，共二十一页。整理课件免疫测定用室内质控血清(xuèqīng)的调整随着(suízhe)临床实验室检验水平的不断提高和检测试剂质量的不断改进，原有的室内质控物已经不能满足室内质控工作的需要，因此部中心对免疫测定用室内质控血清的含量进行了调整，同时改进了包装。第二页，共二十一页。整理课件针对(zhēnduì)的检测项目

HBsAg抗HCV抗HIV梅毒(méidú)螺旋体抗体提供不同(bùtónɡ)含量的质控物是为了实验室根据不同(bùtónɡ)试剂的检测值选择合适的质控物，使质控物的检测值（S/CO值）在1.5～4之间。第三页，共二十一页。整理课件HBsAg质控血清(xuèqīng)定值的调整HBsAg定值单位改变：2004年，WHO研制(yánzhì)了第二代HBsAg标准物质，并将定值单位从ng/ml改为IU/ml。现1IU/ml≈0.5ng/ml定值（调整前）定值（调整后）调整原因0.2IU/ml用于一些灵敏度较高的试剂0.5IU/ml0.5ng/ml1IU/ml1ng/ml2IU/ml2ng/ml4IU/ml5ng/ml浓度较高≥1万ng/ml“钩状效应”第四页，共二十一页。整理课件HBsAg室内(shìnèi)质控品的选用定值适用试剂0.2IU/mlMurex，生物梅里埃试剂0.5IU/mlOrtho，Bio-Rad试剂，雅培i2000和Axsym检测系统和配套试剂1IU/ml国产试剂盒（万泰、新创、科华……），血站和医院用2IU/ml国产试剂盒（万泰、新创、科华……），医院用4IU/ml国产试剂盒（万泰、新创、科华……），医院用第五页，共二十一页。整理课件抗HCV质控血清(xuèqīng)定值的调整及选用定值（调整前）定值（调整后）适用试剂1NCU/ml国产试剂盒（万泰、新创、科华、丽珠……）和DiaSorin的试剂1NCU/ml2NCU/mlMurex、Ortho等试剂2NCU/ml4NCU/ml雅培i2000和Axsym检测系统和配套试剂现1NCU/ml≈0.5NCU/ml第六页，共二十一页。整理课件抗HIV质控血清(xuèqīng)定值的调整及选用定值（调整前）定值（调整后）适用试剂1NCU/ml国产试剂盒（万泰、新创、科华、丽珠……）1NCU/ml2NCU/mlBio-Rad等试剂2NCU/ml4NCU/ml进口试剂及配套仪器4NCU/ml8NCU/ml进口试剂及配套仪器现1NCU/ml≈0.5NCU/ml1NCU/ml的确定：参考国际单位(dānwèi)定值方法，采用5种或以上试剂盒，结果63％的试剂盒（按泊松分布计算）检测结果为阳性的值为1NCU/ml。第七页，共二十一页。整理课件梅毒螺旋体抗体定值的调整(tiáozhěng)及选用定值（调整前）定值（调整后）适用试剂1NCU/ml（特异）国产试剂盒2NCU/ml（特异）国产试剂盒2NCU/ml（特异）4NCU/ml（特异）进口试剂及/或配套仪器2NCU/ml（非特异）2NCU/ml（非特异）RPR、TRUST现1NCU/ml≈0.25NCU/ml第八页，共二十一页。整理课件注意事项室内质控物仅用于相应项目的室内质量控制，不能用于阴阳性结果的判断。定值质控物不适合评价试剂盒整体性能是否合格,但可用于试剂的批内、批间变异和测定下限的评价质检。如果需要对试剂进行比较评价和全面(quánmiàn)质检请选用相应项目的临床考核血清盘。第九页，共二十一页。整理课件临床考核(kǎohé)血清盘项目规格支数/套HBsAg0.5ml/支40抗HCV0.25ml/支40梅毒螺旋体抗体0.5ml/支40第十页，共二十一页。整理课件HBsAg血清(xuèqīng)盘灵敏度特异性HBsAg变异的检测能力：如G145R等Hook效应(xiàoyìng)导致的假阴性第十一页，共二十一页。整理课件样本编号含量(IU/ml)A（S/CO)B（S/CO)C（S/CO)D（S/CO)E（S/CO)16~80.20.40.49.57.328~101.00.70.49.814.910﹥200000040.837.636.227.124.116约160000040.043.941.047.135.08阴性20.91.50.40.70.719阴性9.47.719.20.40.427阴性16.60.30.80.50.6360.5-1.01.61.62.97.38.5370.5-1.01.11.33.03.86.838约0.20.60.81.82.43.9390.2-0.50.20.60.91.13.0HBsAg血清(xuèqīng)盘第十二页，共二十一页。整理课件抗HCV血清(xuèqīng)盘不同试剂厂家的ELISA试剂盒所用包被抗原的差异：目前抗HCV检测ELISA试剂盒均采用HCV的基因工程或合成多肽抗原(kàngyuán)（核心区、NS3、NS4和NS5等）包被固相，以间接法进行测定，上述HCV抗原的组合、来源及用量等方面的差异而造成检测结果不一致。

抗HCVELISA出现假阳性的主要原因有：

1.类风湿因子（RF）的干扰2.高免疫球蛋白血症3.标本中超氧化物歧化酶（SOD）的干扰4.用于固相包被的HCV基因工程抗原不纯第十三页，共二十一页。整理课件抗HCV血清(xuèqīng)盘样本编号ABCDEFG

RIBA

NS4NS3CNS5281.221.870.650.780.770.67<0.3–+±+337.8311.96.324.286.24.760.62±++––340.920.680.610.841.140.65<0.3++–±356.414.111.862.992.812.040.34–++–381.62.061.860.681.682.051.38±+±±152.420.820.550.650.50.50.5––––第十四页，共二十一页。整理课件检测方法1.检测非特异性抗体----使用类脂质抗原(kàngyuán)的血清学试验：RPR、TRUST2.检测特异性抗体----使用密螺旋体抗原的血清学试验：FTA-ABS、TPHA、TPPA、ELISA、WB梅毒螺旋体抗体(kàngtǐ)血清盘第十五页，共二十一页。整理课件梅毒(méidú)螺旋体抗体血清盘TP14TP17TP45TP47EUIgMEUIgGA(OD值)BC(OD值)D(OD值)RPR胶体金1++++++0.090.7363.19927.353.7763.604+++++4+++++++++++++++++

++0.3350.964.04127.612.1692.006+++++7+++++++++++++++++

++0.2561.120.65431.241.2150.978+++++23+++++/-+++++++++/-+++++0.2251.133.94830.241.8971.367++++33+++++0.1600.082

1.329

0.90

0.027

0.662

+–Hook效应(xiàoyìng)

第十六页，共二十一页。整理课件原倍1：101：201：401：801：16013.3572.9462.0991.4280.9360.49042.2772.2561.9701.6151.0600.60371.7033.0662.9383.0233.1252.289232.3603.0892.8842.9752.2581.481梅毒(méidú)螺旋体抗体血清盘1、4、7、23号血清(xuèqīng)稀释结果显示存在hook效应。第十七页，共二十一页。整理课件IgM抗体(kàngtǐ)漏检梅毒螺旋体抗体(kàngtǐ)血清盘TP14TP17TP45TP47EUIgMEUIgGA(OD值)BC(OD值)D(OD值)RPR胶体金1++++++0.090.7363.19927.353.7763.604+++++4+++++++++++++++++

++0.3350.964.04127.612.1692.006+++++7+++++++++++++++++

++0.2561.120.65431.241.2150.978+++++23+++++/-+++++++++/-+++++0.2251.133.94830.241.8971.367++++33+++++0.1600.082

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+–第十八页，共二十一页。整理课件使用(shǐyòng)方法质控血清(xuèqīng)都经过灭活处理，但仍应按照有潜在生物传染性样本对待。HBsAg，抗HCV，抗HIV，梅毒螺旋体抗体的质控血清加样时按待测病人原始样本对待，依照试剂盒说明书进行操作。实验室收到血清后应将血清保存在–18℃以下，保质期为1年。使用时将血清在室温复融，应注意待血清完全融化后平衡至室温并充分混匀。复融后的血清如果当日未使用完且无污染，可保存在2–8℃，限1周内用完，避免反复冻融和重新分装质控血清样本。第十九页，共二十一页。整理课件谢谢！第二十页，共二十一页。整理课件内容(nèiróng)总结免疫测定室内(sh