2019-2020年生物选修1 生物技术实践第一章 微生物培养技术中图版习题

2019-2020年生物选修1生物技术实践第一章微生物培养技术中图版习题精选

>第1题【单选题】

下列有关碳源的叙述不正确的是（）

A、碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物

B、某些碳源可以作为微生物的主要能源物质

C、蛋白质一定不能做碳源

D、不同种类的微生物的碳源可能不同

【答案】：

C

【解析】：

【分析】碳源主要用于合成微生物的细胞物质和一些代谢产物,有些碳源还是异养微生物的能源物质；不同种类的微生物的碳

源的可能不同，有的碳源种类广泛，有的碳源种类单一；蛋白质是含有C、凡0、N等元素的大分子有机化合物,可作为微生

物的碳源、血源和能源物质.故选C

【点评】本-在生的识记能力判断能力,属于容易题.

>第2题【单选题】

下列有关生物学实验原理和技术操作的叙述中，正确的是（）

A、从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养

B、在葡萄酒发酵过程中，每隔12h左右打开瓶盖一次，放出CO2

C、用显微镜观察细胞时，若细胞为无色透明，可调节通光孔使视野暗一些

D、若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想所得估计值更接近实际值，除应严格操作、

多次重复外，还应保证待测样品稀释的稀释度

【答案】：

D

【解析】：

【解答】A、有机废水中的微生物是分解者，不能进行光合作用，培养不需要光照，A错误;

B、葡萄酒发酵过程中，不能打开瓶盖,只能拧松,释放二氧化碳,且防止杂菌污染，B错误;

C、用显微镜观察细胞时,若细胞为无色透明，可调节光圈或反光镜使视野暗一些,而通光孔是不可改变的，C错误;

D、若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复避免偶然误

差，还应保证待测样品稀释的比例合适，使每个平板上的菌落数在30~300之间，D正确.

婕：D.

【分析】有机废水中的微生物是分解者,不能进行光合作用,培养不需要光照；在葡萄酒发酵过程中,为了防止杂菌污染，应

每隔12h左右拧松瓶盖一次；用显微镰观察细胞时,可以通过调节光圈或反光镜来调节视野的完暗.

A第3题【单选题】

可以作为硝化细菌碳源、氮源及能量来源的物质依次是（）

A、含碳有机物、氨、光

B、含碳无机物、氮、氮

C、含碳有机物、氨、氨

D、含碳无机物、氨、氨

【答案】：

D

【解析】：

【分析】石眦细菌是自养生物,所以碳源来自含碳无机物；硝化细菌能将氨氧化为亚硝酸盐或硝酸盐,并释放化学,所以硝化

细菌的氮源来自氨，能量也来自氨.故选D

＞第4题【单选题】

用稀释涂布平板法测定同一土壤样品的细菌数，在对应稀释倍数为10%的培养基中，得到以下几种统

计结果，正确的是（）

A、涂布了一个平板，统计的菌落数是230

B、涂布了两个平板，统计的菌落数分别是251和260,取平均值256

C、涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212、256,取平均值163

D、涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值233

【答案】：

D

【解析】：

【解答】用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内,至少要涂布3个平板，确定对照组无菌后，

选择菌落数在30~300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数.

5®^：D.

【分析】检测土塔中细菌总数,可以看出采用的计数方法是稀释涂布平板法进行计数.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中

的细菌数时，在每一1^度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30~300的进行记数，求起平均值，再通过计算得出土

壤中细菌总数.

＞第5题【单选题】

已知某种细菌以CO2为唯一碳源，下列相关叙述正确的是（）

A、可推测该细菌的代谢类型为自养需氧型

B、无机盐是该细菌不可缺少的营养物质

C、培养过程中碳源同时充当该细菌的能源物质

D、培养该细菌的培养基中无需添加氮源

【答案】：

B

【解析】：

【解答】某种细菌以CO2为唯一碳源，可推测该细菌的代谢类型为自养型，但不确定是否为需氧型,A不符合题意;无机盐参与

臭杂有机物的组成,是该细菌不可缺少的营养物质，B符合题意;C02不豳乍为能源，C不符合题意;氨元素参与核酸、蛋白质

的组成,培养该细菌的培养基中需要添加氮源，D不符合题意，

故答案为：B

【分析】理清培养基的相知识点:

（1）概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质.

（2）营养组成:一殷都含有水、碳源、血源和无机盐.此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求.

⑶械

①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基.

照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基.

③^照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等.

>第6题【单选题】

通常用来作为菌种鉴定的重要依据是（）

A、细菌形态

B、菌落

C、细菌大小

D、细菌结构

【答案】：

B

【解析】：

【解答】根据不同的菌落的形状、大，J40颜色、即凹凸情况不同，通常将菌落的形状、大小、颜色等特征作为鉴定菌种的依

据，综上所述,B符合题意.

故答案为：B

【分析】解答此题要理清群落的概念和特征,识记不同种类的细菌所形成的葡落，在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明

度等方面具有f的特征,因此菌落可以作为菌种鉴定的重要侬.

>第7题【单选题】

某大肠杆菌能在基本培养基上生长，其突变体M和N均不能在基本培养基上生长，但M可在添加了

氨基酸甲的基本培养基上生长，N可在添加了氨基酸乙的基本培养基上生长，将M和N在同时添加氨基酸

甲和乙的基本培养基中混合培养一段时间后；再将菌体接种在基本培养基平板上，发现长出了大肠杆菌（X）

的菌落。据此判断，下列说法不合理的是（）

A、突变体M催化合成氨基酸甲所需酶的活性丧失

B、突变体M和N都是由于基因发生突变而得来的

C、突变体M的RNA与突变体N混合培养能得到X

D、突变体M和N在混合培养期间发生了DNA转移

【答案】：

C

【解析】：

【解答】A,依题意，突变体M和N分别在添加了氨基酸甲和氨基酸乙的基本培养基上生长，说明催化合成相应氨基酸的酶的活

性丧失,A不符合题意;B、原核生物的细胞内可遗传的变异只有基因突变,不可能发生基因重组和染色体变异,B不符合题

意；

C、突变体M和N在同时添加氨基酸甲和乙的基本培养基中混合培养，产生了大肠杆菌X,这可能是两种大肠杆菌之间发生了重

组，但不能确定突变体M的RNA与突变体N混合培养能否得到X,C符合题意；

D、当突变体M和N放到同一个培养基时发生了细胞间的DNA$§移,从而产生大肠杆菌X,D不符合题意.

故答宴为：C.

【分析】本题考查了细菌的可遗传变异类型,当基因发生突变以后,会改变酶的活性,使代谢途径发生了变化,进而引起性状

的改变.当不同种类的细菌混合培养时，会发生基因的重新组合，产生新的变异类型.

第8题【单选题】

下列可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（）

A、以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂

B、以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂

C、以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹III试剂

D、以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩版试剂

【答案】：

A

【解析】：

【解答】A,酚红指示剂只能用来检测尿素分解瞥,A正确；

B,二掌胺试剂常用来进行DNA的鉴定,B错误；

C.苏丹IH试剂可以用来检测脂肪，C错误;

D、双缩眼试剂可以用来检测蛋白质，D错误.

蝇：A.

【分析】在以尿素为唯一氮源的培养基中，不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长，而分解尿素的细菌能利用尿素作氮源，将

尿素分解为氨，使pH升高.若培养基中加入酚红指示剂，指示剂将变红.此培养基既属于选择培养基，又属于鉴别培养基.

第9题【单选题】

下列关于植物组织培养中灭菌操作的叙述中，错误的是（

A、外植体用酒精消毒

B、镜子等器械需用酒精灭菌

C、操作者双手用酒精消毒

D、培养基需高压蒸汽灭菌

【答案】:

B

【解析】：

【解答】解：A,外植体不能进行灭菌处理,只能用酒精进行消毒,A正确；

B、酒精用于消毒,而德子等器械需进行灼烧灭菌，B错误;

C、操作者双手需用酒精进行消毒，C正确；

D、培养基需要进行高压蒸汽灭菌，D正确.

B.

消毒和灭菌：

消毒

使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生

舱

分微生物（不包芽抱和抱子）物（包括芽抱和抱子）

常用煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒

灼烧灭菌、干型灭菌、高压蒸汽灭菌

方法法

适用

操作空间、某些液体'双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

腾

第10题【单选题】

下图表示利用划线分离法分离和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（）

A、步骤①倒平板操作时，只需要在超净台中不需要在酒精灯火焰旁进行

B、步骤②③使用的工具是接种环，接种前需在明火上烧红后冷却

C、步骤④恒温培养箱培养后的结果说明整个过程中蘸取菌液4次

D、该方法使单菌落更容易分开，但操作复杂些

【答案】：

B

【解析】：

【解答】步莪①倒平板操作时，为了防止杂菌污染，在超净台中进行的同时，也需要在酒精灯火焰旁进行，符合题意；步骤

②®使用的工具是接种环，接种前需在明火上灼烧灭菌，冷却后再进行划稣作，B符合题意;步骤④恒温培养箱培养后的结果

说明整个过程进行4次划的1作，C不符合题意;该方法不易分离出单个菌落，D不符合题意.

故答案为：B

【分析】据图分析可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液,③是进行平板划线，④是划线后培养.

＞第11题【单选题】

下列培养基不是选择培养基的是（）

A、牛肉膏蛋白陈培养基

B、分解尿素的微生物培养基

C、筛选纤维素分解菌的培养基

D、无氮培养基

【答案】：

A

【解析】：

【解答】解：A,牛肉膏蛋白陈培养基含有微生物生长的碳源、氮源、水和无机盐,不是选择培养基，A正确；B、以尿素为氮

源的培养基±«有尿表分解菌可处存，属于选六养基,B螃；C、表曲菌的培养基超演表为所破

源的选择培养基，C错误;D、无痛培养基只有能够固甄的微生物能够生存,属于选择培养基，D错误.故选：A.

【分析】选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的微生物在这种培养基上是不

能生存的.据此分析作答.

＞第12题【单选题】

将接种了红色细菌的培养皿置于紫外线下几天，结果培养皿中除长了一个白色菌落外，其余菌落都是

红色的，据此，实验者应该（）

A、暂不作结论

B、断定是紫外线产生了白色菌落的变异

C、如果不继续用紫外线照射，预期那个白色菌落将转变为红色

D、断定白色菌落是一种可遗传的变异

【答案】：

A

【解析】：

【分析】出现白色菌落可能是变异的结果，也可能是杂菌污染的结果，故氏D错；因为变异后遗传物质发生了改变,所以变异

可遗传的，不用紫外爱照射f不"回原来颜色，故C错；正确的做法是暂不作结论经实验研究后再下结论.故选A

＞第13题【单选题】

下列有关微生物实验的叙述错误的是

A、在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过酒精灯火焰

B、土壤取样时，应铲去表层土3cm左右再取样

C、两种刚果红染色法的结果均会出现透明圈

D、采用平板计数法获得的菌落数往往多于实际的活菌数

【答案】：

【解析】：

【分析】为防止其他菌的污染，曲瞰菌种前和接种完毕后均要将试管口通过酒精灯火焰,A1E确；表层土容易受外界污染，使

实验不准确，B正确；两种刚果红染色法的结果均会出现透明圈,C正确；有些活菌在培养过程中死亡，另外有些菌落是有多个

活前共同形成的，所以按形成的菌落数目来计算活菌数目的话,结果往往会少于活菌实际数目，D错误.

第14题【单选题】

下列说法错误的是（）

A、通过植物组织培养得到的试管苗，是植物细胞具有全能性的有力证据

B、在探究果胶酶最适用量实验中，虽然实验的变量发生了变化，但通过设置梯度来确定最适值的思

想方法是不变的

C、应用选择培养基的主要原理是显现某微生物的特征，以区别于其他微生物

D、含伊红一美蓝试剂的培养基可以用来鉴别牛奶中的大肠杆菌

【答案】：

【解析】：

【曲】

A.植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性；正确.

B.在探究果胶酶最适用量实验中，通过设置梯度来确定最适值；正确.

C.应用选择培养基的主要原理是允许特定种类微生物的生长，同时抑制或者阻止其他种类微生物的生长；错误.

D.含伊红试剂的培养基可以用来鉴别牛奶中的大肠杆菌，菌落呈深紫色，并带有金属光泽；正确..

【点评】本题考查相对综合，需要学生深度理解，是学生能力提升的较好选择.

第15题【单选题】

下列操作与消毒灭菌无关的是（）

A、培养基在50℃左右时倒平板

B、接种前用火焰灼烧接种针（环）

C、接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦试双手

D、在酒精灯的火焰旁完成倒平板的操作

【答案】：

A

【解析】：

【解答】解：A,培养基在50℃时搁置斜面属于接种后的培养，与灭菌和消毒无关，A正确；

B,接种前用火雌感接种环属于灭菌，B镯吴;

C、接种前用月畦洗双手，再用酒精擦拭双手属于消毒，C错误;

D、在酒精灯的火焰旁完成倒平板的操作属于灭菌，防止杂菌污染，D错误.

Slizfc：A.

【分析】灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内夕b-切微生物的细胞、芽抱和抱子的过程,常用的方法有灼烧灭菌、干热灭

菌和高压蒸汽灭菌.；邮是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程.常用的方法有煮沸

消毒法、巴氏消毒法、紫外浅或化学药物消毒法等.

>第16题【单选题】

下列有关微生物培养的叙述，不正确的是（）

A、测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法进行菌落计数

B、在对微生物进行培养前，需要对微生物和培养基进行灭菌

C、酵母菌发酵过程产生的酒精，对其他微生物生长有一定的抑制作用

D、分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源

【答案】：

B

【解析】：

【解答】解：A,分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度以便能从中选择出菌落数在30~300间的平板进行计数，AIE

确；

B、对微生物进行培养前，需要对培养基进行灭菌，B错误；

&酵母菌发酵过程产生的酒精,对其他微生物生长有T的抑制作用，C正确；

D、分离能分解尿素的细菌，要以尿葡乍为培养基中唯一的血源，D正确.

B.

【分析】微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线

的操作，将聚集的菌种,逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别

涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养.

>第17题【单选题】

某生物科技小组的同学用刚果红染色法从土壤中分离得到了能够分解纤维素的微生物，下列有关此实

验历程的阐述中，正确的是（）

A、本实验既可以起到选择培养的作用乂可以起到鉴别培养的作用

B、纤维素的分解产物纤维二糖和葡萄糖能与刚果红作用形成红色的复合物

C、涂布平板时，应用涂布器沾少量菌液并转动培养皿以使菌液涂布均匀

D、应只选择平板中有较大透明圈的菌落进行计数

【答案】：

A

【解析】：

【解答】解：A,培养基中加入纤维素起到了选择培养的作用,培养基中力叭的刚果红染液又对纤维表分解菌进行鉴SU,A1E

确；

B、刚果红可以与纤维素形成红色复管物,当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，B错误;

C、涂布平板时，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引趣待酒精燃尽后，冷却8~10谣用，不能沾少量蕾液，C错误;

D、应只选择平板中有较大透明圈的菌落进行纯化培养，D错误.

婕：A.

【分析】纤维素的单体是葡萄糖,纤维素酶能够将纤维素范围葡萄糖.纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖百

酶.纤维表分解菌可以用刚果红染液进行鉴,能够产生透明圈的菌落就是纤维表分解菌.

>第18题【单选题】

制备牛肉膏蛋白陈固体培养基的过程中，关于倒平板的叙述不正确的是（）

A、等培养基冷却后在酒精灯火焰附近倒平板

B、右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰

C、将锥形瓶中的培养基倒入培养皿后，立即盖上皿盖

D、待平板冷却后将平板倒置，使皿盖在上、皿底在下

【答案】：

D

【解析】：

【解答】等培养基;令却至50℃左右时，在酒精灯火熔附近倒平板，防止杂菌污染，2F符合题意;右手拿锥形瓶，使瓶口迅速

通过火焰,高温防止杂蓟污染，B不符合题意；右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖,并通过酒精灯火焰,C

不符合题意；等待平板冷却5~10»钟,将平板倒过来放置,使皿盖在下，皿底在上,D符合题意.

故答室为：D

［分析］解答D选项,要注意待平板冷却后将平板倒置,在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位,因为空

气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生.

>第19题【实验探究题】

大豆中含有大豆异黄酮，中药姜黄根茎中含有姜黄素。研究人员利用胰腺癌细胞悬液为材料进行了相

应的实验探究。

备选材料和用具：姜黄素（用2%乙醇配制）、大豆异黄酮（用2%乙醇配制）、2%乙醇、0.9%NaCI溶

液、胰腺癌细胞悬液、动物细胞培养液、卡氏瓶、CO2培养箱、血细胞计数板、显微镜、流式细胞仪等。

实验目的：

【第1空】探究大豆异黄酮和姜黄素对胰腺癌细胞增殖率和凋亡率的影响

完善实验思路：

①取卡氏瓶若干个，均分为4组，编号为A、B、C、D,每组设置多个重复样本；

②向上述各组加入适量且等量的胰腺癌细胞悬液和动物细胞培养液；

③；

④在C02培养箱中控制适宜条件培养一段时间后，用血细胞计数板测定各组总细胞数，用流式细胞仪

测定凋亡的细胞数，计算胰腺癌细胞增殖率和凋亡率；

⑤。

【第1空】A组加A2ml2%乙醇；B组加入1ml姜黄素溶液+lml2%乙醇；C组加入1ml的大豆异黄酮溶液+lml2%乙醇;D组加

入1ml姜黄素溶液+lml的大豆异黄酮溶液.

或者：顺加入2m12%乙醇；B组加入2m嗟黄素溶液;C组加入2ml的大豆异黄酮溶液；D组加入1ml姜黄森溶液+lml的大豆

异黄酮溶液；

【第2空】对实验所得数据进行统计分析处理.

实验结果：姜黄素和异黄酮都能抑制癌细胞的增殖，二者作用效果差异不大；姜黄素和异黄酮都能促

进癌细胞凋亡，且姜黄素效果明显好于异黄酮；姜黄素和异黄酮合用时效果好于单独使用。请设计一个坐

标系，并以柱形图的形式表示相应结果。（对照组的增殖率为100%,凋亡率为5%。）

如

胞

增

殖

率

(

次

)

分析和讨论：

①姜黄素和异黄酮合用时对胰腺癌细胞增殖的抑制作用明显好于单独使用，最可能的原因是

②人体内癌细胞的凋亡是免疫的结果。

【第1空】①姜黄素和异黄酮通过不同途径发挥作用（姜黄素和异黄醐乍用于细胞周期的不同时期/阶段）

【第2空】②绷®

【答案】：无

【解析】：

【解答】(1)备选材料和用具里面有姜黄森大豆异黄酮可知二者是实验变量,提到胰腺瘤细胞悬液，动物细胞培养液，可知

胰腺癌细胞悬液是实险材料,综合可得出实验目的是探究大豆异黄酮和姜黄春对胰腺癌细胞增殖率和凋亡率的影响.

(2)③遵循试睑设tt的单一变量原则A®加入2m12%乙醇；B组加入1ml姜黄素溶液+lml2%乙醇；C组加入1ml的大豆异黄

酮溶液+lml2%乙醇；D组加入1ml姜黄素溶液+lml的大豆异黄酮溶液.

⑤对实睑所得数据进行统计分析处理.

(4)"黄森和异黄酮合用时对胰腺癌细胞增殖的抑制作用明显好于单独使用，最可能的原因姜黄森和异黄酮通过不同途径

②人体内癌细胞的凋亡是细胞免疫的结果.

【分析】设计实验要道循单一变量原则.根据第(3)小题的实验结果应该分别设置姜黄森组、异黄酮组、姜黄素+异黄酮组,

此外还应设侬白对照组，所以应设置四个实验组.

＞第20题【综合题】

为获取可降解高盐度工业废水中有机物的耐盐菌，研究人员进行了如下实验：

①制备含3%NaCI的固体培养基，以及含3%、5%和7%NaCI以高盐度工业废水中有机物为碳源的液体

培养基；

②将高盐度废水采用平板划线法接种于含3%Nacl的固体培养基，如图一.然后置于适宜条件下培养

一段时间，观察形成的菌落特征；

③将分离纯化后的菌株接种到试管固体斜面培养基上，适宜条件下培养适当时间，将该试管短期保藏

待用；

④取固体斜面上的菌株制成菌液，取等量菌液，分别加入到步骤①中制备的3组液体培养基中摇床培

养35小时，定时取样统计活菌数目.测定结果如图二所示.

03%NaCl@5%NaCI■7%NaQ

回答下列问题：

配制培养基时，灭菌、添加NaCI溶液和调节pH的先后顺序是.

A\u6dfb\u52a0NaCI\u6eb6\u6db2\u3001\u8c03\u8282pH\u3001\u706d\u83cc

【第1空】添加NaQ溶液、调节pH、灭菌

步骤②平板划线操作过程中，第一次划线前灼烧接种环的目的是防止杂菌污染，第二次及之后的几次

划线前灼烧接种环的目的是,完成图一所示操作，至少需要灼烧接种环次.

A\u6740\u6b7b\u4e0a\u6b21\u5212\u7ebf\u540e\u63a5\u79cd\u73af\u4e0a\u6b8b\u7559\u7684\u83cc\

u79cd\uff08\u4f7f\u4e0b\u4e00\u6b21\u5212\u7ebf\u65f6\uff0c\u63a5\u79cd\u73af\u4e0a\u7684\u83cc\u79

cd\u76f4\u63a5\u6765\u6e90\u4e8e\u4e0a\u6b21\u5212\u7ebf\u7684\u672b\u7aef\uff09

B、6

【第1空】杀死上次划线后接种环上残留的菌种（使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端）

【第2空】6

步骤④中统计活菌数目用法，该方法统计的活菌数（填"大于"、"等于"或"小于"）实际数

值.直接从静置的培养液中取样计数的做法是错误的，正确的操作是.若每种浓度设3个重复实验，

每次统计活菌数目时需要从个培养瓶中取样.

A\u7a00\u91ca\u6d82\u5e03\u5e73\u677f

B\u5c0f\u4e8e

C\u5c06\u57f9\u517b\u6db2\u6447\u5300\u540e\u53d6\u6837\u8bal\u6570

D、9

【第1空】稀释涂布平板

【第2空】小于

【第3空】将培养液摇匀后取样计数

【第4空】9

由图二可知，该耐盐菌最适合处理含（浓度）NaCI的废水.

A、3%

【第1空】3%

【答案】：

【解析】：

【解答】】解：（1）配制培养基时，需待各种营养成分配制完成后再调节pH,最后进行灭菌.（2）平板划线操作的第一步灼

烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；划线操作结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，

避免细菌污染环境和感畸作者.由于图1中有5次划线，每次划线完需灼烧，再加上第f灼烧,故完成图一所示操作，至少

需要灼烧接种环6次.（3）据实验操作可知，步骤④中常采用稀释涂布平板法统计活菌数目.用稀释涂布平板法统计菌落数目

时，由于培养过程中两个或多个细胞可能生长在一起形成一个菌落,导致统计的菌落数往往比活菌的实际数目低.取样时不能

直接从静置的培养液中取样计数,需将培养液摇匀后取样计数.由于每种浓度设3个重复实验，共有3种不同浓度，故每次统计

活菌数目时，需要从9个培养瓶中取样.（4）由图二可知，该耐盐菌在3%NaCI最多，故最适合处理含3%NaCI的废水.故

答案为：（1）添加NaQ溶液、调节pH、灭菌（2）杀死上次划线后接种环上残留的菌种（使下一次划线时,接种环上的菌种

直接来源于上次划线的末端）6（3）稀释涂布平板法将培养液摇匀后取样计数9（4）3%适当延长处理时间（增大接

种量）

【分析】1、微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经焙化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养.在线的开始部分，微生物往往连在

长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落.

例释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落.2、制备牛肉膏蛋白

际固体培养基的方法：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板.

＞第21题【综合题】

胡萝卜素是一种常见的食物色素，可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如

下：

筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用或平板划线法接种.采用平板划线法接种时需先灼烧接

种环，其目的是.

【第1空】解涂布平板法

【第2空】灭前（防止杂菌污染）

培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供和.

【第1空】领

【第2空】百

从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采

用方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是.

【第1空】时间

【第2空】水浴

【第3空】滤去不溶物

从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和,以提高萃取效率.石油酸

(填〃适合〃或"不适合")胡萝卜素的提取，原因是;鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用

法，并以样品作为对照.

【第1空】刊

【第2空】适合

【第3空】胡萝卜素易溶于脂溶性溶剂，石油舐是6够性溶剂

［第4空］纸层析法

【第5空】阮腼萝卜素

【答案】：无

【解析】：

【解答】解：(1)酵母菌有两种接种方法：稀释涂布平板法和平板划绣雄种.接种时要严格灭前，避免混入杂菌，故接种时

需要先灼烧接种环，

(2)蔗糖含碳作为碳源，硝酸盐含氮作为限源.

(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和时间，防止胡萝卜素分解.水浴加热可以较好控制温度，防止加热

温度过高.萃取液浓缩前需进行过滤目的是滤去不溶物.

(4)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，需要将胡萝卜粉碎和干燥,胡萝卜素易溶于脂溶性溶剂，石油醛是I够性溶剂，可以用于萃

取胡萝卜素.纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素，需要用胡萝卜素标准SS为对照，看看样品是否也出现对应层析带，与标

准样品有何区,分析产生原因.

故答案为：

(1)稀释涂布平板法灭菌(防止杂菌污染)

(2)碳源题源

(3)时间水浴滤去不溶物

(4)干燥适合胡萝卜素易溶于脂溶性溶剂，石油酶是脂溶性溶剂纸层析法标准胡萝卜素

【分析】接种微生物常用的方法有稀释涂布平板法和平板划关法.微生物培养的关键是无菌操作.微生物的营养物质主要有碳

源、氮源、水和无机盐等.胡萝卜素的提取流程为胡萝卜•粉碎・干燥・萃取-过滤-浓缩•胡萝卜春•鉴定.

>第22题【综合题】

［生物一一选修1：生物技术实践］某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌.分离纯化所用固体

培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙.回答下列问题：

分离纯化乳酸菌时，首先需要用对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是.

【第1空】无菌水

【第2空】在稀释度足够高的菌液里，聚集在T的乳酸菌将被分散成单个细胞f从而能在培养基表面形成单个的菌落

推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有和.分离纯化时应挑选出的

菌落作为候选菌.

【第1空】中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸

【第2空】利于乳酸菌的识别和分离

【第3空】在平板上有溶钙圈或透明圈

乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的（填“蒸储水"、"甘油"或"碳酸钙"）.

【第1空】甘油

【答案】：

【解析】:

【解答】解：（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜注液进行梯度稀释;进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的

前液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的前落.（2）在分离纯化所用的培养基中加

入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离；分离纯化时应挑^出在平板上有溶钙圈的前

落作为候选菌.（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入TS的甘油.

故答案为：（1）无菌水在解凝够高的菌液里,您在T的孚魔菌将被分®个细胞,从而能在培养岸面形码他

菌落（2）中和乳酸菌代谢过程中产生的孚鹿利于乳酸菌的识别和分离在平板上有溶钙圈（3）甘油

【分析】（1）泡菜的制作原理:泡菜的制作离不开乳酸菌.在无筝浮件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳^.（2）测定亚硝酸盐

含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基率磺酸发生重氮化反应后,与N1素基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染

料.将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝稣盐的含量.（3）泡菜的制作

|测亚硝酸,盐含田

原料加r1微豳滑决］篇］

--H紫髅卜函一

加盐H盐水冷却H泡菜盐未~口

2）亚硝酸盐含量的测定操作过程

|配制溶浦卜|制备标准显色液|f|制备样品处理制|f厘

本题主要以泡菜的制作为前提，考生微生物应用的相关知识,意在考查考生把握知识间内在联系的能力.

＞第23题【综合题】

炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病.炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状.对炭疽病疑似患

者，可根据噬菌体的寄主专一性，通过实验进行确诊.

细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落.

细菌鉴定：实验流程图如图所示.

对照组加入（）

制片、检查

35七.6小时

挑选可/接种135七,24小时R1

疑曲落一一、实验组加入生理处水配制

液体培养基液体培养基、艮M的耀渣消旃噬菌从体液*帮'

（澄清）（洋浊）35T,6/W

对配制的液体培养基要采用方法灭菌.培养基配制和灭菌时，灭菌与凋节pH的先后顺序是

A\u9ad9\u538b\u84b8\u6c7d

B\u5148\u8c03\u8282pH\uff0c\u540e\u706d\u83cc

【第1空】高压蒸汽

【第2空】先商5PH,后灭菌

挑选可疑菌后进行接种时，放在35℃条件下培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是.图中的

对照组试管中应加入.

A\u7ec6\u83cc\u5927\u91cf\u7e41\u6b96

B\u7b49\u91cf\u751f\u7406\u76d0\u6c34

【第1空】细菌大量繁殖

【第2空】等量生理盐水

图中两组试管同时培养6小时后，进行比较，若实验组液体培养基的浑浊度（填"提高"、"降低"、

"不变"），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染.此实验依据的原理是.

A\u964d\u4f4e

B\u5b9e\u9a8c\u7ec4\u4e2d\u7684\u566c\u83cc\u4f53\u80fd\u7279\u5f02\u6027\u5730\u4fb5\u67d3\u

70ad\u75bd\u6746\u83cc\uff0c\u4f7f\u7ec6\u83cc\u6b7b\u4eal\uff0c\u6eb6\u6db2\u53d8\u6f84\u6df8

【第1空】幽氐

【第2空】实验组中的噬菌体能特异性地侵斑发疸杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清

在对微生物进行扩大培养过程中需要对微生物进行计数.取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最

后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220.则样品中微生物的数量为个/mL.该统计结果

（填"低于"、"高于"）实际值.

A、1000

B\u4f4e\u4e8e

【第1空】1000

【第2空】肝

【答案】：

【解析】:

【解答】解：（1）对培养基灭菌常用高压蒸汽灭菌法；培养基的制备步骤为：计算、称量、溶化、调pH、灭菌和倒平板.

（2）（3）接种可疑菌后，35℃培养2句例,细菌大量繁殖，液体培养基变浑浊.对照组试管中应加入等量生理盐水.与实验

组同时培养6d国后，由于实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疸杆菌,使细菌死亡,溶液变澄清,因此若实验组液体培养基的

浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疸杆菌感染；反之则排除.（4）在对微生物进行扩大培养过程中需要对微生物进行

计数.取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180.220.则样品中微生物的数量为

200H沪2四xJ_=10004-/mL.由于两个或多个细胞连在TW,在培养基上只能观察到f菌落,因此该统计结果低

于实际值.故答宴为：（1）高压蒸汽先调节pH,后灭菌（2）细菌大量繁殖等量生理盐水（3）降低实验组中的

噬菌体能^异性地侵染炭疸杆菌，使细苗死亡，溶液变澄清（4）1000低于

【分析】1、培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及海生长因子；2、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式,消毒的

方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌；3、微生物的接种:微生物接

种的方法很然,最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法.4、微生物实验

室分离中配制培养基的操作步骤:计算一称量一溶解一调pH一灭菌步骤.

>第24题【综合题】

大肠杆菌的同化类型为，从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于.

【第1空】新型

【第2空】分解者

翡Y%®q”[2ql3©aiE）a能蚂髀谓卸售团》3-%能团（%-^芍回前0％回》9回©?0团前3g，，®3612r协幽回史一泥雷寸呜回

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【第1空】防止谏杂菌的入侵

【第2空】灭菌

【第3空】消毒

【第4空】蛋白质变性

根据用途划分，该培养基属于（填"选择"或"鉴别"）培养基，若要分离能分解尿素的细菌需将培

养基中换成,若要鉴定分解尿素的细菌还需将伊红?美蓝