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实验一实验学时:2实验类型:验证实验要求:必修一、 实验目的本实验的目的是进行症状的观察,分两部分进行。一部分在田间,观察田间作物病害的病状和病征;一部分在室内,观察室内所提供的植物病害标本的病状和病征。通过实验,使同学们认识植物植物病害的症状类型、特点,初步掌握正确地描述病害症状的方法,加深对植物病害的感性认识,了解症状在病害诊断中的作用。二、 实验内容植物病害的症状表现十分复杂,按照症状在植物体显示部位的不同,可分为内部症状与外部症状两类。在外部症状中,按照有无病原物子实体显露可分为病状与病征两种。本实验主要进行植物病害症状的观察。(一)病状类型病状就是在植物病部所看到的不正常的状态。通常分为五种类型。1.变色植物受外界有害因素的影响后,常导致色泽的改变,如褪色、条点、白化、色泽变深或变浅等,统称为变色。主要表现有:(1)褪绿或黄化:褪绿和黄化是由于叶绿素的减少而叶片表现为浅绿色或黄色。如小麦黄矮病、植物的缺铁、缺氮等。(2)花叶与班驳:如烟草花叶病、菜豆花叶病、黄瓜花叶病等。(3)变红色或紫色:如玉米或谷子红叶病、植物缺铁等。2.坏死是由于感病植物组织和细胞的死亡而引起的。(1)斑点:根、茎、叶、花、果实的病部局部组织或细胞坏死,产生各种形状、大小和颜色不同的斑点,如玉米大、小斑病、烟草赤星病、白菜黑斑病等。(2)枯死:芽、叶、枝、花局部或大部分组织发生变色、焦枯、死亡。如马铃薯晚疫病、水稻白叶枯病。(3)穿孔、落叶和落果:在病斑外围的组织形成离层,是病斑从健康组织中脱落下来,形成穿孔,如桃细菌性穿孔病等;有些植物的花、叶、果等感病后,在叶柄或果梗附近产生离层而引起过早的落叶、落果等。(4)疮痂:果实、嫩茎、块茎等的受病组织局部木栓化,表面粗糙,病部较浅,如柑桔疮痂病、马铃薯疮痂病等。(5)溃疡:病部深入到皮层,组织坏死或腐烂,病部面积大,稍凹陷,周围的寄主细胞有时增生和木栓化,多见与木本植物的枝干上的溃疡症状。如杨树溃疡病、柑桔溃疡病、番茄溃疡病等。(6)猝倒和立枯:大多发生在各种植物的苗期,幼苗的茎基或根冠组织坏死,地上部萎蔫以致死亡,如番茄立枯病、瓜苗猝倒病等。3.萎蔫 植物整株或部分枝叶萎垂死亡,病株茎、根常见维管束组织变黑、变褐;如植株迅速萎蔫死亡,而叶片仍保持绿色的成为青枯。引起植物萎蔫的原因有生理性的和病理性的两种。如瓜类枯萎病、棉花黄萎病、茄科植物青枯病等。4.腐烂 是较大面积植物组织的分解和破坏的表现,根据症状及失水快慢有分为干腐和湿腐。如玉米干腐病、苹果腐烂病、甘薯茎线虫病都是干腐的症状;湿腐如大白菜软腐病、柑桔贮藏期青霉病、甘薯根霉软腐病。5.畸形由于病组织或细胞的生长受阻或过度增生而造成的形态异常。植物病害的畸形症状很多,常见的有:(1)徒长:如水稻恶苗病。(2)矮化、矮缩和丛生:矮化湿植株各个器官的长度成比例变短或缩小,病株比健株矮小得多,如玉米矮化病。矮缩则主要是节间缩短茎叶簇生在一起,如水稻矮缩病、小麦黄矮病等。丛生是枝条或根异常地增多,导致丛枝或丛根,如枣疯病、泡桐从枝病和小麦丛矮病。(3)瘤肿:病部的细胞或组织因受病原物的刺激而增生或增大,呈现出瘤肿,如桃树根癌病、烟草根结线虫病等。(4)卷叶:叶片卷曲与皱缩,有时病叶变厚、变硬,严重时呈卷筒状,如马铃薯卷叶病和蚕豆黄化卷叶病。(5) 蕨叶:叶片发育不良,叶片变成丝状、线状或蕨叶状,如番茄蕨叶病。双子叶植物受2,4-D的药害也常变成蕨叶状。(6) 花器叶片化:正常的花器变成叶片状结构,使植物不能正常开花结实,如玉米霜霉病。(二)病征类型病征是指在植物病部形成的、肉眼可见的病原物的结构。识别各种不同类型的病征,对诊断病害很有帮助。病征显著的病害有:1、绵腐病:受病部位长出放射状的白色丝状物的病征。病害有瓜类绵腐病、水稻绵腐病等。
2、霜霉病:多从叶背面长出白色或深色的霉状物。如十字花科蔬菜霜霉病、向日葵霜霉病、菠菜霜霉病等。3、白粉病:主要从叶片的表面长出白色粉状物。如小麦白粉病、瓜类白粉病、苹果白粉病等。4、黑粉病:在植物的穗部或其他部位现出黑色粉状物。病害有小麦腥黑粉病、玉米丝黑穗病、小麦散黑粉病。5、煤污病:植物的叶、茎、果实等器官上铺满煤烟状物。如茶煤病、柑桔煤污病、桑污叶病等。6、锈病:植物叶、茎上常自破裂的小疱中,散出鲜黄色或深褐色如铁锈状的粉状物。病害有玉米锈病、小麦锈病、菜豆锈病、蚕豆锈病、玫瑰锈病等。7、白锈病:叶片的正面或反面长出乳白色的孢子堆,破裂后散出白色的粉状物。如苋菜白锈病、油菜白锈病等。8、霉病:病部出现霉状物,如绿霉、黑霉、灰霉、赤霉等。病害有柑桔青霉病、甘薯软腐病、番茄灰霉病、小麦赤霉病等。9、菌核病:病部出现球形、角状或不规则形的菌核。如水稻纹枯病、稻曲病油菜菌核病等。10、小黑粒和小黑点:如小麦白粉病、梨轮纹病、辣椒炭疽病等。11、高等担子菌所致病害:病部常出现膜状、块状和伞状物。12、菌脓(细菌病害的病征):通常在病部出现液滴状或颗粒状菌脓。如水稻白叶枯病和水稻条斑病等。三、实验原理、方法和手段仔细观察植物病害标本,注意发病部位的病状特点,有无病征,认识各类型症状的基本特征。四、实验组织运行要求采用集中授课形式。五、实验条件1、供观察的标本:甘兰根肿病Plasmodiophorabassicae马铃薯癌肿病Synchytriumendobioticum甘兰根肿病Plasmodiophorabassicae马铃薯癌肿病Synchytriumendobioticum白菜白锈病Albuocandida白菜白锈病Albuocandida油菜菌核病Sclerotiniasclerotiorum
油菜菌核病Sclerotiniasclerotiorum玉米黑粉病Ustilagomaydis小麦腥黑穗病Tilletiafoetida(光腥)Tilletiacaries(网腥)小麦条锈病Pucciniastriiformis柑桔青霉病Penicilliumitalicum柑桔疮痂病Elsinoefawcetti玉米小斑病Bipolarismaydis番茄早疫病Alternariasolani菜豆炭疽病Colletotrichumlindmuthianum柑桔溃疡病Xanthomonascitri桃穿孔病Phyllostictapecsicae烟草根结线虫病Meloidogyneincognitavar.acrita枣疯病Jujbewitches'b,roPomhytoplasma番茄蕨叶病Cucumbermosaicvirus2、用具幻灯片、挂图、扩大镜、刀片等。六、思考题1、症状在病害诊断中的作用。2、植物病害病状、病征类型有哪些?七、实验报告1.实验预习实验前每位同学都要对本次实验进行认真的预习,并写好预习报告,在预习报告中要写出实验目的、内容和方法。2.实验记录选择不同症状类型的病害,将所观察的植物病害症状结果记录于实验报告中,至少描述10种病害3.实验报告格式见附录1。
八、其它说明将所观察的植物病害症状结果记录于下表中。标本编号病害名称标本编号病害名称发病部位病状类型病征症状特点实验时应该注意:1.操作时必须遵守实验室规则,服从任课老师指导。2.实验前每人取好指定编号的显微镜,并进行检查,实验时要爱护一切用具及实验材料,如有损坏应及时报告任课老师。实验完毕,显微镜擦干净后放回原处,实验材料及用具均需整理清洁,并放回原处。桌面和实验室均须打扫干净。大学实验报告学院:专业:班级:姓名学号实验组实验时间指导教师成绩实验项目名称
实验二菌物形态特征观察、目的要求通过本实验了解根肿菌门、卵菌门和子囊菌门、担子菌门、半知菌门菌物的主要形态特征,掌握与植物病害有关的重要属的基本形态特征、分类依据及其所致病害的症状特点。同时,学习使用检索表来鉴定病菌,为分类鉴定打下初步基础。二、材料与仪器1.材料根肿菌属(Plasmodiophora)腐霉属:瓜果腐霉菌(Pythiumaphanidermatum)疫霉属:致病疫霉(马铃薯晚疫病菌)(Phytophthorainfestans)或辣椒疫病菌(P.capsici)盘梗霉属:萬苣霜霉病菌(Bremialactucae)霜霉属:十字花科植物霜霉病菌(Peronosporaparasitica)白粉菌属:蓼白粉病菌(Erysiphepolygoni)单丝壳属:瓜类白粉病菌(Sphaerothecafuliginea)单孢锈属:豇豆锈病菌(Uromycesvignae)多孢锈菌属:玫瑰锈病菌(Phragmidiumrosaemaltifeorae)黑粉菌属:小麦散黑穗病菌(Ustilagotritici)交链孢属(Alteraria)镰孢属(Fusarium)灰霉(Botrytis)炭疽菌属(Colletotrichum)叶点霉属(Phyllosticta)病害标本、挂图、病原菌半永久性玻片,多媒体教学课件(包括幻灯片、录象带、光盘等影像资料)等。2.用具显微镜、幻灯机、投影仪、计算机及多媒体教学设备、解剖针、载玻片和盖玻片等。三、实验内容和方法根肿菌门特征观察根肿菌属(Plasmodiophora)观察在寄主细胞内堆积成鱼籽状颗粒,是病菌的休眠孢子。卵菌门特征观察腐霉属(Pythium)观察孢囊梗、孢子囊、泡囊及卵孢子的形态特征,观察腐霉菌引起的病害症状。疫霉属(Phytophthora)观察孢囊梗、孢子囊及卵孢子的形态特征和疫霉菌引起的病害症状。霜霉属(Peronospora)观察孢囊梗、孢子囊及卵孢子的形态特征和霜霉菌引起的病害症状。霜霉属孢囊梗呈双叉式锐角分枝2~10次,未端尖锐。孢子囊卵圆形,无色或有色,萌发产生芽管。藏卵器内卵周质明显,卵孢子圆球形,单个,表面光滑或有饰纹。盘梗霉属(Bremia)观察孢囊梗、孢子囊及卵孢子的形态特征和盘梗霉菌引起的病害症状。注意孢囊梗分枝特点及分枝末端的特征,分枝末端是否膨大呈盘状?边缘是否有小梗?子囊菌门特征观察(1)白粉属(Erysiphe)观察闭囊壳、附属丝的形态特征及闭囊壳内子囊的数目和引起的病害症状。(2)单丝壳属(Sphaerotheca)观察闭囊壳、附属丝的形态特征及闭囊壳内子囊的数目和引起的病害症状。注意与白粉属的区别。担子菌形态特征观察1.锈菌目(Uredinales)(1)单胞锈菌属(Uromyces)观察冬孢子的形态及引起的病害症状特征。(2)柄锈菌属(Puccinia)观察冬孢子的形态及引起的病害症状特征。(3)多胞锈菌属(Phragmidium)观察冬孢子的形态及引起的病害症状特征。注意冬孢子细胞的个数。2.黑粉菌目(Ustilaginales)(1)黑粉菌属(Ustilago)观察黑粉菌的冬孢子的形态、冬孢子的萌发特点,观察黑粉菌引起的病害症状特点。半知菌形态特征观察交链孢属(Alteraria)观察分生孢子梗、分生孢子的形态特征。分生孢子褐色,砖格状分隔镰孑包属(Fusarium)观察分生孢子梗、分生孢子的形态特征。注意镰刀菌有两型分生孢子:大型,镰刀状;小型圆形、卵圆形。(3)炭疽菌属(Colletotrichum)观察分生孢子盘、分生孢子梗、分生孢子的形态特征。分生孢子盘有黑褐色的刚毛,一般着生在分生孢子盘的周围,数目较少。分生孢子梗较短,无色。分生孢子长椭圆形,后成月牙形。(4)叶点霉属(Phyllostic)a观察分生孢子器、、分生孢子的形态特征。分生孢子器埋生,单腔,有孔口。分生孢子近卵圆形,单胞,无色。四作业1绘制四种菌物的形态特征图;2制作观察到的所有菌物属的分类检索表。实验三:原核生物病害植物线虫、植物病毒病害及寄生性种子植物的观察一、 实验目的通过实验,掌握原核生物病害的喷菌现象,植物寄生线虫的形态特征,了解植物病毒所致病害的外部症状特征,并掌握利用这些特征进行诊断的一般方法;认识不同类型寄生性种子植物及其所致病害的特点。二、 实验内容1、 原核生物的喷菌现象取水稻白叶枯病或烟草青枯病标本,用剪刀剪取病健交界处的小块组织,置于载玻片上,加一滴蒸馏水盖上盖玻片,用手轻压一下后,对光观察可见喷菌现象,如放到低倍镜下观察,可以很清楚地看到剪口处有大量细菌从组织中流出。2、 植物线虫的分离方法(1)贝曼漏斗法适合从植物组织中和土壤中分离线虫,适合分离能运动的线虫。分离时在漏斗内放大小适中的金属或塑料筛,筛上铺纱布,漏斗下面接一有止水夹的橡皮管,加样本于筛上,以水淹没后静置。由于线虫的趋水性和自身的重量,脱离样本,游到水中,最后集中沉降在橡皮管下端。该方法简便,不需复杂设备,易操作,缺点是漏斗内特别是橡皮管到缺氧,不利于活动线虫的存活,分离效率低。(2)浅盘法适合分离植物组织和土壤中能运动的线虫。原理与漏斗法相同。(3)过筛法适合分离土壤中运动和不运动的雌雄同形的线虫种类。漂浮器分离法分离土壤样品中胞囊线虫的胞囊。直接解剖分离法将洗净的病组织直接放入盛有适量水的培养皿内,置于解剖镜下,用解剖针或刀小心撕破或切开组织,剥取线虫或待寄生线虫离开组织进入水中后,用挑针挑取或用吸管吸取线虫。这种方法适合分离少量病组织中活动和不活动的虫体相对较大的线虫。3、植物线虫形态特征的观察(1)观察水稻潜根线虫的形态(雌雄同形)在显微镜下仔细观察,找出水稻潜根线虫雌虫的阴门和肛门所在位置;在显微镜下仔细观察,找出水稻潜根线虫雄虫的交合刺,抱片和肛门所在位置。(2)观察雌雄异形线虫的形态剪取严重感染根结线虫病的烟草根部的根结放于小培养皿内的水中,在双目解剖镜下,用挑针将根结内的雌虫4龄幼虫,三龄幼虫和二龄幼虫,从根结中解剖出来,并用习惯分别吸取放于凹型载玻片上用显微镜分别观察它们的形态特征。然后,将后,将雌虫刺破,观察线虫的卵及卵内一龄幼虫的形态。由于根结线虫的雄虫罕见(雌虫线状),故不观察雄虫的形态。4、植物病毒病害外部症状的观察症状的观察主要是区别症状的类型,这
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