遗传病的诊断、治疗和预防-遗传病的诊断

遗传病的诊断

前言遗传病的常规诊断

分子诊断

遗传病的常规诊断

一、遗传疾病诊断的主要内容病史采集症状与体症家系分析染色体检查生化检查二、对已出现症状的患者的诊断明确的临床诊断确定其遗传规律三、携带者的检出携带者携带有隐性致病基因，本人表现正常的个体；携带有显性致病基因，但没有外显的正常个体；携带有致病基因，迟发个体；染色体平衡易位或倒位的个体。携带者的检出临床水平细胞水平酶与蛋白质水平基因水平四、产前诊断遗传学检查

细胞培养、染色体检查、分子诊断等；生化检查

特殊蛋白质、酶、代谢底物、中间产物和终产物等；物理诊断

B超、X线、胎儿镜、电子监护等。需产前诊断的对象：夫妇之一有染色体畸变，特别是平衡易位携带者，或者夫妇染色体正常，但出生过染色体异常的患儿的夫妇；35岁以上的高龄孕妇；夫妇之一有开放性神经管畸形，或出生过这种畸形患儿的夫妇；夫妇之一有先天性代谢缺陷，或出生过这种患儿的夫妇；X连锁遗传病基因携带者孕妇；原因不明的习惯性流产的孕妇；羊水过多的孕妇；夫妇之一有致畸因素接触史的孕妇；具有遗传病家族史，又系近亲婚配的孕妇。

虽然具备了上述条件，但如果出现先兆流产、妊娠时间过长、有出血倾向者，则不宜做产前诊断，另外应拒绝仅要求仅做胎儿性别的检查。取胎儿细胞和羊水方法有：羊膜穿刺法绒毛取样法脐带穿刺胎儿镜检查孕妇外周血胎儿细胞富集分子诊断一、分子诊断学的发展从第一代遗传标志（RFLP）第二代遗传标志（STR）第三代遗传标志（SNP）二、分子诊断的策略和常用技术基因诊断的策略基因突变的检测mRNA检测基因连锁检测基因诊断的基本技术核酸杂交聚合酶链反应DNA测序基因芯片技术其它常用的技术

PCR-RFLPPCR利用一对或数对特异性引物，将目标DNA扩增；酶切利用某些限制性内切酶消化PCR产物，如PCR产物中含有相应的酶切位点序列，DNA链则被切开；电泳利用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶分离酶切后的PCR产物，根据电泳图谱判断结果。PCR-ASO：使用只有几十个核苷酸的探针，检测被检DNA中的同源序列。由于探针比较短，当被检DNA序列与探针不完全互补，甚至只要有一个碱基的差异，杂交分子就不能稳定形成，因此该方法的灵敏度非常高，特异性也非常好。PCR-ASOPCR-SSCP

当双链DNA变性为两条单链后，各自会在中性条件下形成各自特定的空间构象，因而在电泳时将在不同的位置上出现各自电泳条带。如果DNA序列发生变化，甚至只有一个碱基变化，空间构象也有可能发生变化，电泳条带也随之变化。PCR-SSCP三、分子诊断技术的应用基因诊断在遗传病中的应用例如：镰状细胞贫血的基因诊断酶解正常人DNA和患者DNA，用标记的珠蛋白基因为探针作Southern杂交

镰状细胞贫血的基因诊断限制性内切酶MstⅡ切割的序列是CCTNAGG（其中N是任何一种核苷酸），切割正常DNA产生1.1kb珠蛋白的DNA片段；若切割患者DNA时，由于AT破坏了MstⅡ的位点，便形成1.3kb珠蛋白的DNA片段。例如：血友病A的基因诊断PCR技术与RFLP相结合的方法。首先用PCR技术将包含突变DNA的片段扩增出来，然后用识别该位点的限制酶来酶解，电泳后直接检测多态性位点的状态。基因诊断在肿瘤中的应用ras基因突变的检测

ras基因突变的检测可采用PCR-ASO方法进行，已知ras基因突变的热点在12、13及61密码子。

p53基因的检测目前常用PCR法进行检测p53突变的热点是外显子5-8，一般可先选用外显子5-8的引物进行扩增，其后再进行突变位点的详尽分析，甚至测序。另一初步检测p53基因突变的方法为PCR-SSCP，然后测序。DNA分型

DNA分型也分子诊断的重要内容，特别是在研究检测HLA类型、T细胞受体类型等方面具有重要意义，而分型的结果对研究疾病关联的基因类型和疾病易感性基因等方面具有较大的价值。帕金森病基因诊断的研究进展家系研究连锁基因的研究4号染色体相连锁的呈常染色体显性遗传的PD（PARKI）6号染色体相连锁的呈常染色体隐性遗传的少年型PD（PARK2）2号染色体相连锁的呈常染色体显性遗传的PD（PARK3）散发性PD遗传易感性的研究四、疾病分子诊断的展望

未来的分子诊断主要发展方向胚胎着床前诊断—在囊胚8个细胞期，通过对其中一个细胞的染色体核型分折和原位杂交，从而将人类的遗传缺陷控制在最早期阶段；母体外周血中胎儿细胞分析技术；对常见病、多发病如心血管系统疾病、糖尿病、精神疾病、神经系统疾病、恶性肿瘤、哮喘、近视眼等进行分子诊断。五、疾病分子诊断所带来的问题

准确性稳定性复杂性基因歧视遗传咨询

前言遗传咨询的临床基础遗传病的再发风险率的估计遗传病的群体筛查遗传与优生前言

遗传咨询（geneticcounselling）也为“遗传商谈”，它应用遗传学和临床医学的基本原理和技术，与遗传病患者及其亲属以及有关社会服务人员讨论遗传病的发病原因、遗传方式、诊断、治疗和预后等问题，解答来访者所提出的有关遗传学方面的问题，并在权衡对个人、家庭、社会的利弊的基础上，给予婚姻、生育、防治、预防等方面的医学指导。遗传咨询的临床基础一、一些常见的遗传咨询问题遗传咨询的种类及内容

婚前咨询本人或对方家属中的某种遗传病对婚姻的影响及后代健康估测；男、女双方有一定的亲属关系，能否结婚，如果结婚对后代的影响有多大；双方中有一方患某种疾病，能否结婚，若结婚后是否传给后代。

产前咨询双方中一方或家属为遗传病患者，生育子女是否会得病，得病机会大小；曾生育过遗传病患儿，再妊娠是否会生育同样患儿；双方之一有致畸因素接触史，会不会影响胎儿健康。

一般咨询本人有遗传病家族史，这种病是否会累及本人或子女；习惯性流产是否有遗传方面原因，多年不孕的原因及生育指导；有致畸因素接触史，是否会影响后代；某些畸形是否与遗传有关；已诊断的遗传病能否治疗等等。

遗传咨询门诊和咨询医师有一定条件的实验室和辅助检查手段有各种辅助性工作基础二、遗传咨询的主要步骤准确诊断确定遗传方式对再发风险的估计提出对策和措施随访和扩大咨询遗传病的再发风险率的估计一、遗传病再发风险率的一般估计染色体病再发风险的估计染色体病一般均为散发性，因此再发风险率实际上就是群体发生率。双亲之一为平衡易位携带者或嵌合体，子代就有较高的再发风险率。常染色体显性遗传

AD患者多为杂合子，AD遗传子女的再发风险率为50％。但再发风险率估计时注意：外显率新的突变常染色体隐性遗传只有当父母双方均为携带者时，子女才有25％的概率患病，如已生育一个或几个患儿，再发风险仍为25％。一般在小家系中，呈散发性，大家系中可见到同时患病的同胞，患者的子女一般不发病，在少数情况下可能发病，取决于患者的配偶。X连锁隐性遗传女性杂合子是患者致病基因的主要来源，因此检出杂合子，对于预防遗传病的发生具有重要意义。X连锁显性遗传

X连锁显性遗传病较少见，发病率女性大于男性，但女性患者症状轻。二、Bayes定理在遗传病再发风险率评估中的应用Bayes定理是条件概率中的基本定理之一，又称逆概率定律，即后概率等于前概率乘条件概率除以前概率乘条件概率的总和。将前概率与条件概率相乘，即可得出各自的联合概率。遗传病的群体筛查新生儿筛查（neonatalscreening）是对已出生的新生儿进行某些遗传病的症状前的诊断，是出生后预防和治疗某些遗传病的有效方法。一、新生儿筛查新生儿筛查一般是用静脉血或尿作为材料用细菌抑制法筛查苯丙酮尿症嗜菌体抗性检测法筛查半乳糖血症用血斑滤纸的提取液筛查家族性甲状腺肿二、杂合子筛查带有隐性致病基因的个体（杂合子）带有平衡易位染色体的个体带有显性致病基因而暂时表现正常的顿挫型或迟发外显者三、产前诊断产前诊断又称宫内诊断（intrauterinediagnosis）是对胚胎或胎