2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试历年真题集锦附带答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试历年真题集锦加答案（图片大小可自由调整）题型一二三四五六七总分得分第1卷一.参考题库(共30题)1.重组DNA技术中常用的限制性内切酶为A、I类限制性内切酶B、II类限制性内切酶C、III类限制性内切酶D、IV类限制性内切酶2.除了常规PCR外，还有一些特殊的PCR，常见的有反向PCR、反转录PCR、______________、多重PCR、巢式PCR。3.DNA经限制性内切酶切割后可产生两种末端：___________和平头末端。4.大肠杆菌表达系统是目前使用最为广泛的原核表达系统。5.II型限制性核酸内切酶在发挥作用时需要ATP和Mg2+。6._________成为国际国内人体健康战略的重中之重。7.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。8.诱导型启动子9.就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：复制区；________；克隆位点。10.连接反应中，下列哪项物质是T4DNA连接酶所必须的辅助因子A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP11.基因工程中使用的II类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。12.分离既定组织或者细胞的_____________是构建cDNA文库的首要步骤。13.Nick和Gap的含义是不同的，前者指DNA的单链中有较小的缺失，后者仅是断开了一个磷酸二酯键。14.双链DNA中一段自我互补的序列被称为回文序列，这种序列一般具有哪些特征。A、有对称轴B、两条链的5’→3’方向的序列相同C、是Ⅱ类酶的识别序列D、可增强基因的表达E、是I类酶的识别序列15.双酶切或多酶切时，一般先用低盐浓度的酶切，再用高盐浓度的酶切。16.在众多的植物转基因方法中，下列哪种方法应用最多、最广泛A、农杆菌介导法B、植物病毒DNA介导法C、基因枪法D、原生质体法17.T4DNA连接酶和E．coli连接酶都能催化双链DNA和单链DNA的连接。18.你在做Southern印迹分析，并且刚完成了凝胶电泳这一步。根据方案，下面一步骤是用NaOH溶液浸泡凝胶，使DNA变性为单链。为了节省时间，你略过了这一步，直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上。然后用标记探针杂交，最后发现放射自显影片是空白。错在哪里？19.下列哪一种结构形态的外源蛋白表达量高A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白20.Cre-loxP系统中两个loxP位点位于同一条DNA链上且方向相反，Cre重组酶诱导loxP间的序列翻转21.大肠杆菌作为外源基因表达系统的优点是A、繁殖迅速B、操作方便C、基因克隆机表达系统成熟完善D、全基因组测序完成E、被美FDA批准为安全的基因工程受体生物22.怎样制备目的基因？23.试述分子杂交技术的原理？24.利用反义RNA、核酶等反义技术及RNA干扰技术等能特异地封闭基因表达的特性，抑制一些有害基因的表达，以达到治疗疾病的目的。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因修正B、基因增补C、基因激活D、基因失活25.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性:5-3合成酶的活性和3-5________。26.限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是A、修复自身的遗传缺陷B、促进自身的基因重组C、强化自身的核酸代谢D、提高自身的防御能力27._________是由磷脂组成的膜状结构，用它包装外源DNA分子，然后与植物原生质体共保温。28.在微生物遗传学和分子遗传学研究领域中的技术上的三大发明对基因工程的诞生起到了决定性的作用，这三大发明是下列哪些A、利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶体外切割和连接DNA片段B、遗传密码子的破译C、质粒改造成载体以携带DNA片段克隆D、逆转录酶的使用E、明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制29.试述理想质粒载体的构建原理？30.转录水平的鉴定是指_________。第1卷参考答案一.参考题库1.正确答案:B2.正确答案:实时荧光定量PCR3.正确答案:黏性末端4.正确答案:正确5.正确答案:错误6.正确答案:转化医学7.正确答案:20世纪70年代8.正确答案:在一定的诱导剂作用下，才能启动基因的转录与表达。9.正确答案:选择性遗传标记10.正确答案:D11.正确答案:错误12.正确答案:mRNA13.正确答案:错误14.正确答案:A,B,C15.正确答案:正确16.正确答案:A17.正确答案:错误18.正确答案:如果你的杂交探针是双链的，可能因为在加入杂交混合物之前忘记将探针变性而得到空白的放射自显影结果。19.正确答案:C20.正确答案:正确21.正确答案:A,B,C,D,E22.正确答案:直接分离法、构建基因文库分离法、PCR扩增法、人工合成法等。23.正确答案:将标记的核酸探针以碱基互补配对原则与组织细胞中的待测核酸进行特异性的杂交组合，形成探针标记与待测核酸的杂交体，然后利用各种标记物的显色技术，在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下探察待测目标核酸的存在及位置。24.正确答案:D25.正确答案:外切核酸酶的活性26.正确答案:D27.正确答案:脂质体28.正确答案:A,C,D29.正确答案:选择合适的原始质粒；减少限制性内切酶切点；适当增加筛选标记；选择或用强复制起始子代替，提高拷贝数；灭活或去除nic/born基因及毒性蛋白编码区域，提高质粒的安全；进行性状表达的改造。30.正确答案:mRNA检测第2卷一.参考题库(共30题)1.________主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计一组混合引物来合成相应的基因。2.基因操作的两大关键技术是A、工具酶与载体B、转化细胞和供体细胞C、基因克隆和基因重组D、克隆载体和表达载体3.用同一种酶切割载体和目的基因后进行连接，连接产物会含大量自身环化载体，采用下列哪种酶处理，可防止自身环化A、核酸外切酶B、核苷酸激酶C、末端转移酶D、碱性磷酸酶4.如果PCR的每一次循环都把上一次循环中合成的DNA增加了1倍，那么10个循环就扩增了1000 倍，20个循环就扩增了100万倍，30个循环就扩增了10亿倍。5.具平末端的DNA片段的连接可以采用________________、同聚物加尾法、衔接物连接法。6.根据结构和功能特性，可将DNA限制性内切酶分为几类A、I型酶B、II型酶C、III型酶D、IV型酶E、V型酶7.核酸杂交探针可分为两大类：DNA探针和_______。8.真核生物基因组上有些DNA序列能将基因及基因簇隔开，阻止邻近基因之间的相互作用，这些功能序列被称为_________。9.主要用来提高扩增特异性的特殊PCR是A、反转录PCRB、Real-TimePCRC、巢式PCRD、反向PCR10.X-gal显色反应的基本原理是使载体上与受体互补的α肽失活。11.由于DNA是由四种碱基组成的，所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值应该是_________。12.应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因探针是指A、人工合成的苯丙氨酸羟化酶的DNA分子B、用放射性同位素或荧光分子等标记的蛋白质分子C、用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子D、人工合成的免疫球蛋白的DNA分子13.基因工程上常用的限制性内切酶是III型酶。14.下列对建立cDNA文库的描述不正确的是A、从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB、用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC、以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD、新合成的双链DNA甲基化15.最早建立成功的转基因哺乳动物是A、转基因猴B、转基因小鼠C、转基因绵羊D、转基因猪16.YAC的最大容载能力是_______。17.PCR是利用___________的原则，经过高温变性、低温复性、子链延伸的不断循环，选择性的特异扩增目的基因和目的DNA的一种方法。18.连接反应中，为了维持还原环境，稳定酶活性，需在连接缓冲液中添加A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP19.蓝白斑筛选重组子时，白色菌落不一定就是阳性克隆。20.蓝白斑筛选是A、表型检测法B、核酸杂交检测法C、序列鉴定法D、物理特性检测法21.为了防止DNA的自身环化，可用_________去双链DNA_5’端的磷酸基团。22.为什么大肠杆菌表达系统是目前使用最为广泛的原核表达系统？23.Northern印迹和Southern印迹的基本原理是一样的，都是用于检测结构基因的表达。24.质粒作为载体使用时必须具备如下条件A、拷贝数较高B、分子量较小C、具有选择标记D、具有较多的限制性酶切位点E、具有复制起始点25.HIV为逆转录病毒。26.Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是A、用RNA探针检测RNA片段B、用DNA探针检测RNA片段C、用DNA探针检测蛋白质片段D、用RNA探针检测DNA片段27.酵母人工染色体要在酵母细胞中稳定存在，必须有哪些基本的结构？28.逆转录合成第一条链时一般采用下列哪一种酶A、鼠源反转录酶B、鸡源反转录酶C、兔源反转录酶D、禽源反转录酶29.作为载体需要具备哪些功能？30.迄今发现的质粒DNA都是环状的。第2卷参考答案一.参考题库1.正确答案:简并引物PCR2.正确答案:A3.正确答案:D4.正确答案:正确5.正确答案:直接链接法6.正确答案:A,B,C7.正确答案:RNA探针8.正确答案:绝缘子9.正确答案:C10.正确答案:正确11.正确答案:4n12.正确答案:C13.正确答案:错误14.正确答案:A15.正确答案:B16.正确答案:1000kb17.正确答案:碱基互补配对18.正确答案:A19.正确答案:正确20.正确答案:A21.正确答案:碱性磷酸酶22.正确答案:大肠杆菌基因组较小；表达系统成熟、完善，菌体繁殖迅速，培养简单，操作方便，遗传稳定，已被FDA批准为安全的基因工程受体生物。23.正确答案:错误24.正确答案:A,B,C,D,E25.正确答案:正确26.正确答案:B27.正确答案:(1)着丝粒；(2)端粒；(3)ARS序列。28.正确答案:A29.正确答案:为外源基因提供在受体细胞中的复制和整合能力；为外源基因提供进入受体细胞的转移能力；为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力，外源基因的扩增依赖于载体分子在受体细胞中高拷贝自主复制的能力。30.正确答案:错误第3卷一.参考题库(共30题)1.在cDNA的合成中要用到_________，其作用是切除在第二链合成时形成的发夹环。2._________质粒是目前使用较为广泛的载体。3.为了保证引物有较高的退火温度，要求引物的G+C含量尽量控制在40%-60%之间。4._________是指编码产物能够被快速测定，常用来判断外源基因是否已经成功导入寄主细胞并检测其表达活性的一类特殊用途的基因。5.利用限制性核酸内切酶降解基因组DNA，通常选择几个碱基识别序列的限制性核酸内切酶A、4B、5C、6D、76.能通过分泌或运输方式定位于细胞周质甚至穿过外膜进入培养基中的外源蛋白是A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白7.进行体外重组时，外源片段和载体分子之间的物质的量比值一般为A、（1-5）:1B、（3-10）:1C、1：（3-10）D、1：（1-5）8.常规PCR反应程序中，高温变性一般设置多高的温度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃9.______________也叫做依赖于RNA的DNA聚合酶或RNA指导的DNA聚合酶。10.把那些没有可检测表型的质粒称为_________。11.目前，严重危害人类健康和生命，其死亡率居各类疾病之首的是A、艾滋病B、心血管疾病C、恶性肿瘤D、血友病12.连接酶通常使用的连接反应温度是A、37℃B、20℃C、16℃D、50℃13.通常可在三种温度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以_________最好。14.AIDS是由哪种病毒引起的全身性传染疾病A、AVB、AAVC、HIVD、HSV15.pGEM质粒有几个启动子A、0个B、2个C、3个D、4个16.免疫共沉淀技术是检测（)的技术A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用17.具有EcoRII末端的外源片段只能以一个方向插入到EcoRII末端的载体中。18.1970年，第一次重组DNA分子转化成功的基因克隆实验，标志着基因工程诞生了。19.下列是构建基因组文库的常用载体，哪一种载体需要用的受体细胞和其余三种不一样A、柯斯质粒B、YACC、BACD、噬菌体20.高血压属于（）类型的疾病A、心血管疾病B、艾滋病C、恶性肿瘤D、血友病21.采用原核细胞表达系统的优点之一是可以与下面什么过程直接相连A、发酵工程B、转基因动物C、转基因植物D、基因治疗22.基因工程药物的特点是高技术，短周期，高投入，高风险，高收益。23.下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是A、Cosmid;YAC;PlasmidB、YAC;Cosmid;PlasmidC、Plasmi