医学检验碱性磷酸酶标准操作规程（ALP）

PAGE6-XX生物技术有限公司技术部标准操作程序StandardOperatingProcedures版本：V1：A0执行日期：20XX-05-02共6页标准操作程序项目：碱性磷酸酶方法：连速监测法文件编号XXK-SH-SOP-07-022编写者日期审核者日期批准者日期颁发部门或个人接收部门或个人院长办公司保管者院档案室保管者医务科保管者检验科主任临床化学检验室发布日期：20XX年4月2日实施日期：20XX年4月3日前言为使临床检验操作规范化，指导检验人员严格按规程进行正确的常规操作，保证检验质量，特制定本操作规程。本规程的编写遵循了ISO15189《医学实验室——关于质量和能力的特殊要求》及WS/T227-2002《

临床检验操作规程编写要求》的有关规定并结合产品实际情况制订，作为本产品的标准操作程序。XXXX生物技术有限公司技术部20XX年4月2日目

录1检验申请…………………32标本采集与处理…………………………33试剂及成份…………………………44方法原理……….…………45仪器……….……………….…………46校准液及校准模式………………………47质控品与室内质控规则…………………48标本检测步骤………….…………………59结果计算…………………510操作性能………………511试剂使用的注意事项……………...……512参考范围及医学决定水平………………………..……513检验结果的报告及范围………………………..………514临床意义……….….……615结果审核分析以及相关项目的联系..……………………..……..……616威胁生命的“紧急值”及报告规定.…………………..…617有关引用程序与文件………………..….618参考文献附录AXXX型生化分析仪参数碱性磷酸酶测定标准操作规程1.检验申请单独检验项目申请：血清碱性磷酸酶（Alkalinephosphomonoesterase,缩写ALP或AKP）测定；组合项目申请：肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。2.标本采集与处理2.1受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后。体检对象抽血前应有两周的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2标本采集2.2.1除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的黄色盖子SST真空采血管，如为急诊标本，使用浅绿色盖子PST试管。2.2.2检验申请单和血标本试管上统一且唯一的标识符。2.2.3标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间，如为急诊标本，加上急查标识。2.2.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.2.5下列标本为不合格标本2.2.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.2.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、黄疸和浑浊的标本。2.2.5.3对无法确认标本与申请单对应关系的。2.2.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.3标本处理2.3.1接收标本在30min内将标本离心分离出血清。2.3.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定48h，普通冰箱中（2～8℃）稳定7d。-15～-25℃可以稳定60d。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1d的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.3.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7d。2.4标本的注意事项2.4.1采血前使受检者保持平静、松弛，避免剧烈活动，12h以上禁食空腹状态。2.4.2一般用血清或肝素抗凝血浆测定ALP活性，抗凝剂如草酸盐、EDTA、枸橼酸盐能抑制ALP活，不能使用这类抗凝剂的血浆做ALP活性测定。2.4.3血清标本出现溶血、脂血、黄疸或抗坏血酸的干扰情况参见抗干扰能力。3.试剂及成份3.1试剂本科使用的碱性磷酸酶检测试剂盒，由XXXX生物技术有限公司生产,产品货号为:XXX,试剂为液体试剂，其组份如下：R1试剂成份浓度R2试剂成份浓度AMP缓冲液:350mmol/LAMP缓冲液:350mmol/L醋酸镁3mmol/L磷酸对硝基酚76mmol/LHEDTA2mmol/LHEDTA1.5mmol/L防腐剂适量3.2试剂盒保存及效期未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定14d。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。3.3试剂盒准备液体试剂型，即开即用，无特殊准备。4.方法原理4.1测定方法：连续监测法。4.2原理：无色的磷酸对硝基酚在碱性磷酸酶的作用下，生成在405nm处有特异吸收的淡黄色对硝基苯酚。通过测定在405nm处吸光度的变化速率来计算ALP的活性。碱性磷酸酶对硝基苯磷酸二钠+H2O对硝基苯酚+H3PO45.仪器XXXX型号仪器。6.校准品与校准模式6.1校准品：使用XXX公司提供的复合校准液或采用因数法。采用因数法时按照XXXX生物技术有限公司提供的参数中样本和试剂比例，理论因数=2712。实际因数可根据自行进行校准。6.2标准类型和校准点数目：线性模式，X个校准点。6.3校准周期：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后；均须需要全点定标。6.4校准液重建方法：复合校准液用XXXml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。7.质控品与室内质控规则7.1质控品采用由XX公司提供的两个不同水平定值质控血清，产品号为XXXXX和XXXXX。7.2质控液重建方法：用XXXml蒸馏水溶解，轻轻混匀，20min后即可使用。7.3质控品测定：在每一批标本中测定至少两个水平质控血清各一次。7.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。7.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。8.标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。9.结果计算ΔA/min×Vt×1000 样品中ALP活性(U/L)==ΔA/min×Fe×Vs×d式中：ΔA/min——每分钟吸光度变化率；e——摩尔吸光系数18.8；Vt——反应液总体积（ml）；d——比色杯光径1cm；1000——变化因数；Vs——标本体积（ml）；仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果。10.操作性能10.1精密度：批内CV≤0.7％，批间相对极差CV≤1.0％。10.2准确度：测量结果在质控血清靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。10.3线性范围：0～500/L（血清与试剂用量之比为1:50时）10.4方法的有限性及干扰因素：胆红素1197μmol/L，血红蛋白浓度5g/L，甘油三酯45.2mmol/L，没有明显干扰。11.试剂使用的注意事项11.1本试剂仅应用于体外诊断。11.2扔弃废物应符合当地的法规要求。12.参考范围及医学决定水平参考范围：血清ALP参考范围（酶测定温度37℃）：45～132U/L13.检验结果的报告及范围13.1结果的报告13.1.1结果经审核确认准确无误后发出报告。13.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。13.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。13.2报告范围：血清与试剂用量之比为1:50时，测定上限为500U/L。超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，并经上级主管技师审核后报告。14.临床意义14.1ALP在碱性条件下水解各种磷酸酯键，又具有磷酸转移酶的作用。广泛分布于各组织细胞膜上和体液中，以骨骼、肝、肾、肠和胎盘含量较多。ALP有4种同工酶。14.2血清ALP活性测定是鉴别肝胆疾病和骨质增生不可缺少的检查项目。肝胆疾病如胆结石、肿瘤或炎症造成的胆汁淤积等ALP升高，骨疾病如Paget病、骨软化症（佝偻病）、骨转移瘤和甲状旁腺功能亢进等也有ALP升高。14.3霍奇金病、充血性心衰、溃疡性结肠炎等疾病时ALP可有中度升高。14.4妊娠3个月时可有非病理性升高。15.结果审核分析以及相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与肝功能组合中其他项目的关系。如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16.威胁生命的“紧急值”及报告规定（此项不作规定）17.有关引用程序与文件17.1XXX型自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.2生化检验室内质控标准操作程