基因工程载体

质粒载体载体噬菌体载体

动物病毒载体大肠杆菌质粒载体pBR322

单链DNAM13载体

SV40载体

乳头瘤病毒载体昆虫杆状病毒载体柯斯(COS)载体

λ噬菌体载体

枯草杆菌质粒载体pNC3酵母菌质粒载体2μ

农杆菌Ti质粒载体Ti一基因工程的基本元件

------载体四、E.coli质粒载体

1.pBR322

是基因工程中最重要的一个人工质粒,有万能质粒之美称.①pBR322的构建复制子:松弛型选择标记:Amp、Tet筛选形式:抗性插入失活单一切点:24个③物理图谱②pBR322的特性pBR322plasmidF.BolivarR.L.RodriguezBacterialResistancepBR322酶切图谱2恳.堂p润U姜C系接统美神国味加简利科福宇尼小亚乎大里学糠的庄科糖学麦家J秃.稻M什e旅s对s房诚i担n筝g和J蓝.呈V常i含e齿r孔i喂a于1鲁9门8单7年归首发先新构瞧建来漆自p乱B咐R芹3括2枕2质型粒起的孩复沸制鹊起强点氨锣苄举青陈霉悠素舅的故抗烧性渔基大因大攀肠科杆蚀菌β-半郑乳奴糖继酶批基山因看的废启碍动盖子绞及栗其耳编木码驳的α-肽坟链播基引因乌（l迈a问c倾Z’）位密于l麻a臣c背Z’基渣因朝内帜的虎一浆段M母C羡S区鸭段2源.由p听U常C系及统X颗-警g每a圾l溴示氯乖吲陆哚+β赖-半鲁乳芝糖狠苷-爷-怜-易-村-蓝酒白涨斑刻筛狂选插消入洪片燃段酒无捧酶棵活闯性严白定斑未授插籍入扑片闯段田有斧酶陈活保性简蓝抵斑β矛-半旬乳锹糖译苷海酶3早.驾T镰A载验体经T葡a膛q毛D辽N猜A聚无合柳酶原扩昆增舞后推的P蛋C肃R产陪物道末蹈端弹都跑带应有耀单弱个A酵含母懒菌齿质歉粒歌载且体食沉品吹级矛微改生册物适却合漆于丸真弓核势基剂因浅表傲达基询因给产旨物筛外掠分坦泌七政、圈酵键母驼菌至质烘粒朝载木体多鹊数辛酵摸母飘中南含队有包一触种摄能贴独劲立聪复碍制这的摧环狗状雄双木链D怀N寻A，泻称秩为2凶μ质似粒用，蠢长袄约6肢.灰3伶k晕b，织有血单疲一歉的卷复棵制雨起孩始琴点妄和首一愿个霜自著主遇复诉制辱功警能障区捆域走（A转R变S片告段途）盆。整烂合券型同、俘复何制野型税、左附心加浆型瞎和辛稳惕定蛋型等虏类斤型撕。①股含悼有E渔.若c驻o怎l压i质傍粒弯的因复滔制锹起捏始汇序腊列丙。②旅含腹有孔酵霸母丝式的葬筛畅选虑标鸡记煌（泰如L杀E举U届2）③丈具访有浪合渐适浪的刃供辰外寨源蒜基迎因沟插现入智的质限达制颗酶赴切奥割安位孔点稠。2皱.酵它母标菌滩质习粒鸭载纪体鹅的血特喷点1泛.酵孕母求菌圾质瓦粒盖载孔体馋的炉类茎型TypeNameDescriptionbacterialoriginColE1ColE1(pUC-type)originofreplicationpromoterGal1-10promoterGal1-10yeastpromoterselectablemarkerampRampicillinresistancegeneselectablemarkerchlRchloramphenicolresistancegeneLOSTinrecombined(withinsert)formselectablemarkerURA3URA3auxotrophyselectablemarker(yeast)yeastcentromereCEN4yeastcentromericsequenceyeastoriginARS1ARS1yeastoriginofreplication④酵役母窑菌稳寸定花型质偷粒款载务体着抚丝毕粒第象二身节盾噬箱菌惊体勾载墓体一勺、λ噬述菌绘体秒载葡体1沾.λ噬瓜菌伴体度结州构恶特旁点厉:①活线鲜性赏双嫁链D得N调A分申子②论可袭在E晚.丘c乏o柜l绢i中名大资量江繁缘瑞殖③勒具签非望必定需宋区域(财约哲1忠/抢3剥长度度库）④涌两辰端追具琴1撤2昌个熊核挎苷巨酸福单拾链筒互孤补将粘柜性艳末艇端λ噬围菌前体上线灶性D也N衬A分饰子弓的追粘斗性硬末狂端斑及辛其成环挎化们作帆用（a）很具虑有午互吃补穴单匹链阻末搅端较（仁粘敢性缴末页端桨）身的λD前N藏A分执子稠。（b）装当袋进比入利宿贪主着细救胞介后较，突通补过鞋粘召性唯末熊端爹之喝间倾的辅碱早基帽配项对恶作移用卷实和现隶的迈线墨性饿分哀子更的费环曾化今作针用仔，脑由砖此珍形丛成帝的搂双隶链茅区羞叫判做c条o吨s位蒜点GGGCGGCGACCTCCCGCCGCTGGATACGcos5’-P5’-P3’3’粘性末端环化作用（a）（b）2、λ噬屡菌骗体斑的民缺狠陷兄与债改寨造λ噬轿菌予体冰的汁缺宫陷用：⑴富酶犁切碑点蹄太折多5个B岩a巴m锹H刃1位径点燃，6个B香g浊l鼓Ⅰ位腐点翁，5个E校c塌o梁R优Ⅰ位朋点文。⑵堡野顽生识型抢只恶能饲接制纳黎一赖定四长妈度讽的D俊N咳A。λ噬冶菌饭体躁的7女5燃-亦1竹0败5唤%，您只躲能宅接容纳4旺9脂k演b屡×念5则%诞=记2勾.帝4心5唐k蜓b的D冤N才A。λ噬兔菌膛体麦的读改功造施：⑴凉切滔去烧非雨必评须社区哨段伤，详在欣切脊去惨的侵同正时弯，躬加换载贡目沸的砍基述因掩（1晶5社-灶2适3派K毯b）置；⑵望去鹊除道过水多疾的漏酶扯切棉位剥点餐，铺每毫种是酶坚只丧留1娱-膨2个惕切悄口先；⑶歇增书加锯选葱择幼标析记畅基胀因藏（s阶e桌l委e熔c表t胆a炸b桥l驰e喷m坡a跪r称k印e曲r）灯；⑷建倒立λD植N张A的森体堪外梦包菌装原。主捆要晌外绕壳男蛋把白效质峰是裤基见因E的遥产坊物头犁部享前矮体连诊环D菌N晶A基辰因A的扭产胸物疲在c采o毙s位潮点裙切漂割尖噬且菌执体D慨N首A包粱含何在段外困壳冶中俊的旋基星因D的陆产是物基崖因W和F台I叫I的含产赞物佛组肿装躺蛋膛白碍质爽加筒完挤整峰的军尾陵部噬半菌捡体却的借包瘦装车过野程s典u扔p-细蛛菌头如部箱基席因蹦（棋琥询珀滑突鹿变虎型朵）尾矮部钉基锅因祥（奶琥镰珀详突楼变政型任）转乐录凑复病制婆蛋垂白蛛质蛛合束成组树装鞭尾逝部悬所文需城要凝的像组艺分“无算头孕部”的痛提谦取兴物组杂装搞头呜部行所鼻需手要俘的停组赠分“无竿尾丘部”的屡提乳取酷物温颗育完剩整土的苍噬催菌惰体转明录高复海制厘蛋边白墙质借合公成T学4噬泡菌隔体荣的追体兽外磨包块装λD酷N盟A的身体疾外赌包来装体亏外鹊包愉装颈的兽重薪组D巴N并A比套裸值露得的D模N乖A导醋入铺受旅体堆细歪胞贸的鼻效归率椒高1莲0次0要-黄1膜0殊0轧0悔0倍4斥.凯税伦巧噬叙菌工体循载蠢体峡克唯隆泥过骑程5跌.引λ噬餐菌缝体洽载功体浅优项点恳:用咏途悄:主苏要见用俱于预建萄立若真凑核西生窜物刷的殖基锯因裕文河库①品感略染菌高宾效童:巧比禾质努粒猫高拔百天倍②需容虎量恋大舌:斜可瞒达卡1贩5K伟b织(不雨得忽超疏过说原舟来瞒长处度向的君1错0私5先%贺,起不方得集短也于棚原抬来枯长稼度控的婚75酷%腿)③易单操段作压,洪易其保俗藏二尤、班柯慕斯英(C线O监S采)载武体睡(c衡o斑s回m术i张d挠)1习.仙柯服斯柳载文体逐的岭组袭成带剂有使抗僚药翻性洒标吼记带言有标质贞粒唉的途复驻制炸起建始足点带邀有品多引个定限歌制抖酶塑的斥单卡一稳切沙点带野有λ噬好菌软体茧粘沉性应末授端抽片诉段由萄质设粒消和λ粘毛性钟末哭端春“仔尾练巴塘”姨两迈部莲分偿组施成业。2隆.柯括斯身载柜体饥的亭特麻点3斗.园c简o碌s葡m柜i靠d载恢体稳的搏优椅点能甚象λ狭D沃N趁A一吃样她体要外念包桃装赢，喝并节高患效贫导域入畏受筝体潮细困胞可讲以骄装巧载粉比婆质紧粒教或λ车D膜N炮A大祸得丑多等的墨外巴源D班N督A片电段c筹o垄s区1甜.悟7旋k隐b盾+质宏粒泽部园分3畅.肆3贞k讽b禾4淘6率.今5垂K大b外苏源D必N业A由晴于饶携店带海质删粒企的异选荡择私标铲记陈，毛便攀于臣筛偿选由扬于激质厦粒顾上幻玉的除多惑种威单西一宿酶择切皮位趟点梯，饱便们于谈克犬隆赢。利那用撕柯酿斯为载抖体犹载史体种进胁行咐基挥因仁克夺隆济的泡一昆般解程饭序三办、M俊1征3噬俗菌猪体扣克侧隆滚载娇体1冰.竟M疲1漆3的惩特肺性:吓环蜡状验,炮单奔链D春N花A攀,普6茶.跪4事0敢7昌K疏b2柿.唯M歇1狮3噬球菌滥体嫂作疗为缩慧载戒体优府越得性单馆链D映N猎A噬菠菌浑体景的麻复稠制天，往是拼以煎双箩链嘱环怜形脚的D赌N驱A为辉媒态介涝的凡，脉这通种液复鉴制弓形堵式封的D敏N馅A简班称R神F徒D赌N岩A；不巨论尘是R嘉F平D丘N中A还号是s师s惭D绿N深A都胞能望感笨染势大梦肠捞杆猎菌技；单膨链D乏N题A噬执菌挽体明颗日粒它的黄大因小介，宇是似受挠其D换