免疫学技术-金免疫技术（临床免疫检验课件）

胶体金免疫渗滤试验POCT又称即时检验、床旁检验，具有快速、小型、便携等优点，随着iPOCT（智慧POCT）的问世，POCT新技术不断涌现，应用领域不断拓展胶体金免疫渗滤试验作为传统的POCT平台技术之一，具有广阔的应用前景前言免疫渗滤试验简称“滴金法”，始创于1985年该法不需要仪器设备，只需要试剂因其最大的特点是简便、快速，故又称为快速斑点免疫结合试验胶体金免疫渗滤试验检测原理将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上，制成抗原或抗体包被的微孔滤膜并贴置于吸水材料上在一特殊的渗滤装置上，依次滴加待测样本、免疫金及洗涤液，液体在流经微孔滤膜时，溶液中的抗原或抗体与膜上的抗体或抗原快速结合，形成大分子胶体金复合物，因胶体金本身呈红色，阳性反应即在膜中央显示红色斑点胶体金免疫渗滤试验方法类型12双抗体夹心法测抗原间接法测抗体双抗体夹心法AB金标抗体待测标本间接法间接法将抗原包被在硝酸纤维素薄膜中央滴加待检标本，标本中的待测抗体与微孔滤膜上的抗原特异性结合加洗涤液后，滴加金标二抗，加洗涤液洗涤后，阳性者即在膜中央呈红色斑点(胶体金聚集)关键技术操作要点①将反应板平放于实验台上，于小孔内滴加待测标本1~2滴，待完全渗入②于小孔内滴加胶体金标记物1~2滴，待完全渗入③于小孔内滴加洗涤液2~3滴，待完全渗入④结果判定：膜中央有清晰的淡红色或红色斑点者判定为阳性反应，反之则为阴性反应。斑点呈色的深浅相应地提示待测标本的阳性程度临床应用主要为性激素类，如人绒毛膜促性腺激素(HCG)促黄体激素(LH)、促卵泡激素(FSH)等如甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)等如乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、HCV抗体、人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体、梅毒抗体如心肌肌钙蛋白I(cTnI)心肌肌钙蛋白T(cTnT)肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)等如可卡因、吗啡等激素肿瘤标志物感染性疾病心血管病标志物毒品010203胶体金免疫渗滤试验的方法类型胶体金免疫渗滤试验的操作要点胶体金免疫渗滤试验的临床应用

小结胶体金免疫渗滤试验的检测原理04思考题胶体金免疫渗滤试验的原理是什么？有哪些技术类型？怎样判读结果？免疫层析技术目前临床中常用的新冠抗体血清学检测方法有3种：酶联免疫吸附试验法、化学发光免疫分析法和胶体金免疫层析法，在这3种检测方法中，免疫层析技术无需特殊处理标本，仅需一滴血即可在15min内通过肉眼观察获取检测结果，可用于大规模的快速检测和筛查

免疫层析的产业化之初，就奠定了其普及化之路，“早孕试纸”可以说是一个很典型也很成功的案例。试纸有一些得天独厚的优势，比如快速、简单、便携、样本多样化，这些是任何其它方法所不能媲美的前言免疫层析技术免疫层析技术简称“一步金法”以微孔滤膜为载体，将胶体金标记技术与蛋白质层析技术结合起来的快速固相膜免疫分析技术检测原理待测标本层析方法类型夹心法竞争法间接法123夹心法主要用于检测分子中至少含有两个抗原表位的多价抗原夹心法双抗体夹心法双抗原夹心法竞争法竞争法主要用于检测小分子抗原间接法间接法用于检测抗体关键技术操作要点①将试剂条标记线一端浸入待测标本中2-5秒或在标本加样处加一定量待检标本，平放于水平桌面上②5-20分钟内观察结果③仅出现一条红色质控条带为阴性，同时出现反应条带和质控条带两条红色条为阳性，无红色条带出现为试剂失效临床应用主要为性激素类，如人绒毛膜促性腺激素(HCG)促黄体激素(LH)、促卵泡激素(FSH)等如甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)等如乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、HCV抗体、人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体、梅毒抗体如心肌肌钙蛋白I(cTnI)心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)等如可卡因、吗啡等激素肿瘤标志物感染性疾病心血管病标志物毒品010203