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文档简介

蛋白质工程的崛起1.举例说出蛋白质工程崛起的缘由。2.简述蛋白质工程的原理。3.尝试运用逆向思维分析和解决问题。首先通过“胰岛素的改造”课题来创造情景,从而引出蛋白质工程的概念及缘由,是基因工程只能对自然界已经存在的基因进行操作,而蛋白质工程可以定向改造基因。然后介绍蛋白质工程的基本原理和具体操作步骤,最后蛋白质工程的进展和前景。

本节课的重难点为蛋白质工程的基本原理,在此部分教学中要利用好逆向思维,可以通过举例的方法来体现蛋白质工程的过程,即:预期蛋白质功能——预期蛋白质结构——找出氨基酸序列—找出DNA碱基序列。让学生理解,改变蛋白质功能是目的,改变基因结构是手段,手段是为目的服务的。利用好教材图1-29蛋白质工程流程图,让学生理解中心法则在蛋白质工程中的体现。胰岛素改造天然胰岛素在储存过程中易形成二聚体和六聚体,延缓胰岛素从进入部位到达血液,从而延缓了其降血糖的功效。这是胰岛素B23-B28氨基酸残基结构所致。利用蛋白质工程改变这些残基,则可降低其聚合作用,使得胰岛素快速起作用,该速效胰岛素已通过临床试验,这种制剂的形成只是利用了蛋白质工程技术。蛋白质工程就是为了生产出符合人类生产和生活需要的蛋白质,甚至是自然界不存在的蛋白质。基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质,这些天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的,它们的结构和功能符合特定物种生存的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。一、蛋白质工程崛起的缘由二、蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质,以满足人类对生产和生活的需求。前提:原理:目的:了解蛋白质的结构和功能改造基因(基因修饰或基因合成)定向改造或制造蛋白质三、蛋白质工程的基本原理基因DNA氨基酸序列多肽链蛋白质三维结构预期功能生物功能mRNA转录翻译折叠DNA合成分子设计讨论:1.怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。

某多肽链的一段氨基酸序列是:……-丙氨酸-色氨酸-赖氨酸-甲硫氨酸-苯丙氨酸-……丙氨酸:GCU、GCC、GCA、GCG色氨酸:UGG赖氨酸:AAA、AAG甲硫氨酸:AUG苯丙氨酸:UUU、UUC

每种氨基酸都有对应的三联密码子,只要查一下遗传密码子表,就可以将上述氨基酸序列的编码序列查出来。但是由于上述氨基酸序列中有几个氨基酸是由多个三联密码子编码,因此其碱基排列组合起来就比较复杂,至少可以排列出16种。同学们可以根据学过的排列组合知识自己排列一下。首先应该根据三联密码子推出mRNA序列为GCU(或C或A或G)UGGAAA(或G)AUGUUU(或C),再根据碱基互补配对规律推出脱氧核苷酸序列:CGA(或G或T或C)ACCTTT(或C)TACAAA(或G)。基因定点诱变技术的常用方法是PCR法。突变点:人工合成的引物上手段:PCR技术(定点突变试剂盒)目的:获得定点突变的基因2、确定目的基因的碱基序列后,怎样才能合成或改造目的基因(DNA)?可以通过人工合成的方法获取或基因的定点诱变技术来改变。基因会发生突变,突变可以自发,也可以诱发,这是每个稍有生物学知识的人都知道的常识。但在加拿大生物化学家M·史密斯(1932-2000)发明定点突变法之前,突变株的产生必须经由自然界或用化学等方法诱使基因体突变。这类方法属于随机突变,突变株必须在生物性状上有所改变,才能确定有突变发生,但除非用分子生物方法或遗传方法找到此突变处,否则无法确定突变位置。也就是说,这种突变是盲目的。而史密斯发明的定点突变法却是有目的的,该法可经由设计好的寡核苷酸,在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变,也就是说,这种突变是预先设定好的,所以也有人将该法称为“反遗传法”。有意思的是这一给生命科学研究及应用领域带来革命性突破的方法竟然是史密斯和其同事在喝咖啡时闲聊出来的。现在,几乎每个生物实验室都会用定点突变法来研究基因或蛋白质的功能。蛋白质工程的主要步骤通常包括:(1)从生物体中分离纯化目的蛋白;(2)测定其氨基酸序列;(3)借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段,尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构;(4)设计

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