第二章-提取分离方法课件

第二章提取分离方法一、提取（一）溶剂提取法1、理想溶剂：有效成分溶解性大，无效成分溶解性小，与植物成分不起化学反应；安全、成本低；

2、溶剂分类：①水

②亲水性有机溶剂：如甲醇、乙醇、丙酮特点：提取范围广（除多糖，蛋白质类化合物不溶）；彻底，效率高；沸点低，热敏物不易破坏；不易霉变。

③亲脂性有机溶剂：石油醚、饱和烷烃特点:选择性强，杂质少；有毒；价格高，穿透力弱，用量大，提取时间长(相对于醇)3、溶剂选择原则：相似相溶4、常用溶剂极性顺序水>甲醇>乙醇>丙酮>正丁醇>乙酸乙酯>氯仿>乙醚>苯>石油醚5、提取方法①冷提法：浸渍法：药材+溶剂浸泡提取物渗漉法：药材粉碎后，加入渗漉桶中，溶剂连续从上部加入，渗漉液从下部流出。②热提法煎煮法回流提取法（二）水蒸气蒸馏法挥发油多用此法，要求能挥发、与水不混溶、遇水稳定。（三）升华法：固态→气态如樟木中樟脑的提取。二、分离方法（一）根据物质溶解度差别1、结晶与重结晶：利用溶剂对有效成分与杂质在冷热情况下溶解度显著差异以获得结晶的方法。2、改变混合溶剂极性水/醇法：水提液+醇（数倍）多糖、蛋白质除去。醇/水法：醇提液+水（数倍）叶绿素、油脂除去。3、改变pH值（对酸性、碱性或两性有机化合物，可通过加入酸或碱以调节溶液的pH值，改变分子的存在状态，从而改变溶解度而实现分离）。碱提酸沉酸提碱沉4、金属盐络合法：

pb2+、Ca2+等金属离子可与酸、碱性化合物生成不溶于水的沉淀。（二）根据化合物在两相溶剂间分配比差别：⑴液-液萃取法：1、分配系数：K=C上/C下2、分离因子：β=KA/KB（KA>KB），表示分离难易一般β>100，简单萃取

β<50，CCD法（后述）

β=1，无法分离3、pH与存在状态对于酸、碱及两性化合物，pH改变可使存在状态改变,即控制溶液的pH值，即可控制存在状态。一般pH<3，酸性物质多呈非离解状态（HA），碱性物质呈离解状态（BH+）存在；pH>12，酸性物质呈离解状态（A-），碱性物质呈非离解状态（B）存在。⑵CCD法（Countercurrentdistribution，逆流分溶法）：

是一种多次连续的液-液萃取分离过程。⑶DCCC(液滴逆流色谱)和HSCCC(高速逆流色谱法)是在逆流分溶法基础上创建的色谱装置，可使流动相呈液滴形式在固定相间交换，分离效果好。多用于分离皂苷、蛋白质、糖类等。⑷液-液分配柱色谱：将两相溶剂中的一相涂覆在硅胶等多孔载体上，作为固定相，填充于色谱柱中，用流动相洗柱。（三）根据物质吸附力差别物理吸附：无选择性，吸附与解吸可逆，如硅胶、氧化铝、活性炭吸附化学吸附：有选择性，吸附牢固半化学吸附：介于上述二者之间，如聚酰胺①物理吸附：相似者易于吸附溶质极性吸附力三要素溶剂极性吸附剂活性

硅胶、氧化铝为极性吸附剂，溶质极性大，吸附力强；溶剂极性大，洗脱力强。活性炭为非极性吸附剂，与此相反。②极性强弱比较a官能团极性：RCOOH>Ar-OH>H2O>R-OH>R-NH2>RCONH2>RCHO>RCOOR’>R-OR’>R-X>R-Hb化合物的极性由分子中所含官能团的种类、数目及排列方式等综合因素决定。。cε介电常数越大，极性越强。2、半化学吸附：聚酰胺（氢键缔合）影响因素：a、溶质的影响b、溶剂的影响洗脱能力：水<甲醇<丙酮<氢氧化钠水溶液<甲酰胺<二甲基酰胺<尿素水溶液③大孔吸附树脂：原理：吸附性（范德华力及氢键）与分子筛性（多孔结构）结合。影响因素：树脂型号、溶剂种类及化合物性质。应用：除杂与富集。一般水煎法收率30%，水醇法15%，大孔树脂法收率5%。如：人参提取液通过树脂柱水洗树脂70%乙醇洗脱乙醇洗脱液回收人参总皂苷粗品

（四）、根据分子量大小差别：凝胶色谱：分子筛，按分子由大到小顺序出柱。葡聚糖凝胶（Sephadex）：只适用于水中应用。

羟丙基葡聚糖凝胶（SephadexLH-20）：可在水及有机溶剂中使用。在由极性及非极性溶剂组成的混合溶剂中常起到反相色谱的作用。（五）根据物质解离程度不同进行分离：离子交换树脂法：天然有机化合物中，具有酸性、碱性及两性基团分子在水中多呈解离状态而与离子交换树脂上的交换基团发生交换被吸附。

三、结构研究方法（一）、纯度鉴定1、物理常数：mp，[α]D2、TLC（PC）：三种展开系统均为单一斑点。3、GC，HPLC（二）、化合物类型：1、文献调研：同种、同属及相近属植物的成分2、鉴别反应：3、色谱行为：酸碱性、溶解性等（三）、化合物结构：1、光谱方法：UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS2、化学沟通：化学降解、衍生物制备、人工合成3、立体结构：CD、ORD、2D-NMR、X-射线衍射（四）、光谱法简介：1、1H-NMR：提供信息：①化学位移；②积分曲线（氢个数）；③偶合常数J2、常见13C-NMR谱类型及特征：①噪音去偶谱：又叫全氢去偶谱（COM）或宽带去偶谱（BBD）：所有碳信号作为单峰出现②选择氢去偶谱（SPD）：选择性照射特定氢核，分别消除相关碳信号，使峰简化，增高。③无畸变极化转移技术（DEPT谱）不同类型13C信号在谱图上呈单峰形式分别朝上或朝下伸出，易识别。

④2D-NMR：COSY、HMQC、HMBC、NOESY。经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量StudyConstantly,AndYouWillKnowEverything.TheMoreYouKnow,