肝细胞性肝癌患者超声检测血流分级与血清hmgb1、sccag、p53蛋白表达的关系

肝细胞性肝癌患者超声检测血流分级与血清hmgb1、sccag、p53蛋白表达的关系

肝肿瘤（hc）是肝肿瘤的主要病理类型。hc具有易转、发病率低、死亡率高的特点。根据流行病学研究，hc每年的发病率约为45%。1数据和方法1.1年龄及体质量指数选择2017年2月至2019年2月在绵阳市中心医院住院的HCC患者120例，其中男性59例，女性61例；年龄42～65岁，平均年龄53.48岁（标准差12.59岁）；体质量指数（bodymassindex,BMI)20.30～27.82kg/m纳入标准：(1)符合肝癌诊断标准排除标准：(1)心、肝、肾功能严重不全者；(2)存在交流障碍的患者；(3)血常规异常患者；(4)不配合本次研究方案患者。1.2方法1.2.1病例检查的内容采用PHILIPHDI3000超声仪。超声探头频率为5～12MHz。嘱患者取平卧位，按照由内而外，自上而下的顺序对患者的肝脏进行扫描。分别对病灶部位的大小、边界、钙化和血流情况进行分析。超声检测分别由2名高年资住院医师共同检测。依据Adler半定量方法进行血流分级：病灶内未发现血流信号则为0级；病灶部位有1～2处点状出血点则为Ⅰ级；病灶部位发现1条主要血管，2～3条小血管，中量血流信号则为Ⅱ级1.2.2hgmb1、sccag水平测定患者空腹，抽取肘静脉血液4mL；在3500r/min、4℃条件下离心15min，取上清液进行下一步检测。采用酶联免疫吸附分析（enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA）进行HMGB1、SCCAg水平测定。采用HMGB1ELISA试剂盒（ab18256。Abcam，英国）和SCCAgELISA试剂盒（YSRIBIO-050318。上海研生生化试剂公司，中国），操作流程严格按照说明书进行。1.2.3免疫组织化学在超声引导下对肿瘤病灶部位进行穿刺活组织检查。对病灶组织使用甲醛溶液进行固定、常规脱水，石蜡进行包埋，连续切片，切片厚度为4μm。采用免疫组织化学方法进行P53蛋白水平检测（其中鼠抗P53抗体购自迈新生物技术公司）。通过吉木萨（Giemsa）染色，在光学显微镜下观察。判断标准：出现棕黄色颗粒则为阳性。1.2.4hgmb1、sccag、p33蛋白表达水平的比较分析病灶部位的大体类型和血流信号的分布情况。对小肝癌型、结节型和巨块型肿瘤的HMGB1、SCCAg、P53蛋白表达水平进行比较。对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级血流信号的HMGB1、SCCAg、P53蛋白表达水平进行比较。采用斯皮尔曼（Spearman）相关性分析，分析不同血流分级与HMGB1、SCCAg、P53蛋白表达水平的相关性。1.3统计学处理所有数据均使用统计软件SPSS16.0进行统计分析。数据符合正态分布时，计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用t检验；计数资料以百分率（%）表示，采用Pearsonχ2结果2.1小鼠结节型、巨块型，大小血流分级超声诊断结果显示，小肝癌型35例（Ⅰ级12例，Ⅱ级11例，Ⅲ级12例），小结节型39例（Ⅰ级10例，Ⅱ级14例，Ⅲ级15例），巨块型46例（Ⅰ级20例，Ⅱ级12例，Ⅲ级14例）。血流分级Ⅰ级42例，Ⅱ级37例，Ⅲ级41例。不同级血流信号与病灶大体类型比较，差异无统计学意义（χ2.2sccag的表达与结节型不同大体类型血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白表达水平比较，差异有显著统计学意义（P<0.01）。HMGB1在巨块型病灶中表达水平为（102.23±5.12)ng/mL，在结节型为（76.76±4.14)ng/mL，在小肝癌型为（52.23±4.03)ng/mL;SCCAg在巨块型病灶中表达水平为（1.99±0.25）μg/L，在结节型为（1.77±0.26）μg/L，在小肝癌型为（1.20±0.23）μg/L;P53蛋白在巨块型病灶中表达水平为26%，在结节型为20%，在小肝癌型为10%。见表1。2.3sccag表达不同血流分级的血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白表达水平比较，差异有显著统计学意义（P<0.01）。HMGB1在Ⅲ级中表达水平为（112.39±5.49)ng/mL，在Ⅱ级为（78.77±4.21)ng/mL，在Ⅰ级为（53.39±4.16)ng/mL;SCCAg在Ⅲ级中表达水平为（1.97±0.26）μg/L，在Ⅱ级为（1.69±0.34）μg/L，在Ⅰ级为（1.26±0.31）μg/L;P53蛋白在Ⅲ级中表达水平为29%，在Ⅱ级为22%，在Ⅰ级为12%。见表2。2.4相关分析病灶大体类型、血流分级与血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白表达水平呈现正相关，差异有显著统计学意义（P<0.01）。见表3。2.5血清hgmb1、sccag、p33蛋白的联合诊断效能通过对患者的受试者工作特性（receiveroperatingcharacteristic,ROC）曲线分析，血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白的联合诊断效能显著高于单独诊断。同时，Ⅰ级患者的血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白的临界值分别为53.41ng/mL、1.26μg/L、14%（图1A）；Ⅱ级患者的血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白的临界值分别为78.11ng/mL、1.71μg/L、23%（图1B）；Ⅲ级患者的血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白的临界值分别为113.09ng/mL、1.99μg/L、28%（图1C）。3ag、p33蛋白表达与病理分型的关系中国是肝癌高发病率的国家之一，流行病学调查显示笔者研究结果显示，利用超声技术检测，病灶大体类型、血流分级均与患者的HMGB1、SCCAg、P53蛋白表达水平呈现显著正相关。有研究报道，p53基因突变主要与肿瘤细胞的发生、发展和浸润相关笔者研究还存在一定的局限性，未能对患者