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文档简介
局部,甚至整个生物体用作诊断和治疗疾病的医药品,生物制品用基因工程、细胞工程、发酵工程等生物学技术制成的免疫制剂或有生物活性的制剂。可用于疾病的预防、诊断和治疗。生物技术制药:承受现代生物技术人为地制造一些条件,借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医药品。生物技术药物:承受DNA重组技术、单克隆抗体技术或其它生物技术研制的蛋白质〔包括治疗性抗体等〕或核酸类药物。生物技术:以生命科学为根底,利用生物体〔或生物组织、细胞及其组分〕的特性和功〔品系〕进展加工生产,为社会供给商品和效劳的一个综合性技术体系。血液:是一种流淌性结缔组织,循环于心血管系统内,它将身体必需的养分物质和氧气输送到各个器官、组织和细胞;同时将机体不需要的代谢产物运送到排泄器官。血液还对入侵的微生物、病毒、寄生虫等,以及其它有害物质发生反响,保护机体免遭损害;血液是体液的一个重要组成局部,在维持机体内环境相对稳定方面起着重要的作用体液:人体内含有大量液体,包括水分和其中溶解的物质,成人,约占体重的60%,总称为体液。体液三分之二在细胞内,三分之一在细胞外,存在于血管内的血浆、淋巴管内的淋巴液、细胞间隙的和组织7自然药物化学:是运用现代科学理论和方法争论自然药物中的化学成分及其生理功能的一门科学。内容包括各类自然药物的化学成分、构造特征、性质、提取和分别方法、构造鉴定及生理活性等的争论。主要争论内容是植物中的自然有机化合物的分别提纯、构造鉴定、构效关系基因工程技术:是将重组对象的目的基因插入载体,拼接后转入的宿主细胞,构建成工程菌,实现遗传物质的重组合,并使目的基因在工程菌内进展复制和表达的技术下游阶段:将试验室成果产业化、商品化,为获得高质量、高产量的表达产物,需对影响表达及分别纯化的因素进展分析〔如型生物反响器、高效分别介质及装置、分别纯化的优化把握、高纯度产品的制备技术等〕上游阶段:在试验室完成,获得目的基因后,用限制性内切酶和连接酶将目的基因插入载体,并转入宿主菌mRNDNDNA的克隆表达。从产生该蛋白质的真核细胞中提取mRNA,以其为模板,在逆转录酶的mRNADNADNA为模板,在逆转录酶或DNA聚合酶作用下,最终合成编码该蛋白质的双链DNA序列,该序列不含内含子表达型载体:在cDNA插入位置的上游具有启动子序列,重组后插入的cDNA能够表达,并经转录和翻译合成相应蛋白质的载体非表达型载体:在cDNA插入位置的上游无启动子序列,重组后插入的cDNA不能表达,不能经转录和翻译合成相应蛋白质的载体火成为两端形成粘末端的DNADNA片段,再用连接酶连接成完整的基因基因表达:是指构造基因在生物体中的转录、翻译以及全部加工过程,用基因工程制备药物,必需使目的基因进展高效表达酵母:是争论基因表达调控最有效的单细胞真核微生物3000个严紧型载体:伴随宿主染色体的复制而复制,在宿主细胞中拷贝少〔1-3〕载体:依据真核基因在原核细胞中表达的特点关,应将外源基因克隆到高拷贝的质粒载体上,这对于提高外源基因的总体表达水平格外有利融合蛋白:是由一条短的原核多肽和真核蛋白结合在一起所形成的蛋白质;其氨基端是原核序列,羧基端是真核序列.酵母载体:是可以携带外源基因在酵母细胞内保存和复制,并随酵母分DNARNA单位一般表达载体:只能便利地引入外源基因并进展表达,对表达产物N-末端氨基酸是否有增减并无严格要求准确表达载体——要求在启动子或前导肽编码序列的适当部位有内切酶位点,以利于接入外源基因,并使它在表达和加工后N-末端氨基酸序列与自然产物一样,既无多余的氨基酸,也无缺失的氨基酸两阶段培育法:第一阶段先使菌体生长至确定密度,其次阶段诱导外源基因的表达选择性压力〔如抗生素等菌体的生长。把握菌体生长对提高质粒的稳定性、削减代谢副产物的积存、提高外源蛋白产率都有重要严紧反响:在高拷贝质粒工程菌中,由于质粒复制和外源基因的转录、翻译消耗了大量-tRNA的缺乏使核糖体在密码子上停留,并合成“魔点”ppGpp现象补料分批培育:将种子〔基因工程菌〕接种至发酵反响器,经过一段时间培育后,间歇或连续地补加颖培育基,使菌体进一步生长的方法连续培育:将种子〔基因工程菌〕接种至发酵反响器中,搅拌培育至确定菌体浓度后,环境,把握其比生长速率透析培育:利用膜的半透性原理,使代谢物和培育基分别,去除培育液中代谢物对工程菌的不利影响有机氮源:酪蛋白水解物作为氮源有利于产物的合成与分泌接种量:指移入的种子液体积和培育液体积的比例双水相安排法:水溶性高聚物-无机盐组成双水相系统〔如PEG-无机盐〕将混合物与双水相混合,离心分相,则PEG、目的物和杂蛋白富集在上相,而细胞碎片、核酸、多糖等分布于下相反相色谱:利用pro分子中非极性基团〔氨基酸R侧链〕与非极性固定相之间的作用力大小、pro分子中极性基团〔-COOH、-NH2、-OH等〕与流淌相之间的作用力大小的差异进展分别pro浓度的无机盐溶液洗脱〔浓稀〕干扰素interferonIF:是人体细胞分泌的一种活性蛋白质,具有广泛的抗病毒、抗αβγ、ω4个类型。α干扰素又依其构造分为α1b、α2a、α2b等亚型,其区分在于个别氨基酸的差异上,早期干扰素是用病毒诱导人白血球产生的,产量低、价格昂贵,不能满足需要,现在可利用基因工程技术并在大肠杆菌中发酵、表达来进展生产抗体:由淋巴细胞产生,能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白免疫球蛋白:是化学构造上的概念,抗体:是生物学功能上的概念,全部抗体都是免疫球蛋白,但并非全部免疫球蛋白都具有抗体活性单克隆抗体McA:将抗体产生细胞〔淋巴细胞〕B称为单克隆抗体有限稀释法:把杂交瘤细胞悬液稀释后,参与到96孔板中,使每孔理论上只含有一个HTHTRPMI1640培育液〔也需参与饲养细胞〕软琼脂法:在培育液中参与0.5%左右的琼脂糖凝胶,细胞分裂后形成小球样团块,由96孔板连续培育1-2周,先给小鼠〔BALB小鼠〕腹腔注射0.5ml的降植烷〔或液体石蜡,然后接种106淀,取上清夜冻存〔7~12d便可抽取腹水〕人-鼠嵌合抗体制备原理:由于抗体与抗原特异结合的功能取决于抗体分子的V区,而CMcAb的V区基因和编码人Ig的C区基因连接起来,再共转染骨髓瘤细胞,就可表达出完整的人-鼠嵌合抗体[〔VH+VL〕鼠—〔CH+CL〕人]改形抗体〔又称CDR移植抗体〕制备原理:用鼠源性单克隆抗体的CDR区序列替换Ig中的互补打算区序列,使人的Ig具有鼠源性单克隆抗体的抗原结合特异性抗体特性:具有鼠源性单克隆抗体与抗原结合的特异性;但抗体分子中鼠源局部只占很小比例,可根本消退免疫原性模板替换:使用与鼠对应局部有较大同源性的人框架区替换鼠框架区的方法补偿变换:在人的框架区选择与CDR有相互作用,与抗体的亲合力有亲热关系或对框架区空间构造折叠起关键作用的残基进展转变,以补偿完全的CDR移植的方法残基〔CDR和框架区中的一些关键残基〕的方法双功能抗体〔研制阶段:又称为双特异性抗体BsA与两种抗原特异结合的双臂抗体化学交联法:将两个抗体交联在一起,此法快速、简便、高效,纯化 简洁;但此法构建的双功能抗体,可能由于化学交联过程会影响抗体的功能,不太简洁到达靶部位,体内稳定性较差,且无连续性等生物学方法〔杂交瘤法:将一般抗体产生细胞〔脾细胞〕与产生McAb的杂交瘤细胞融合而成;此法连续性好,但构建过程简洁、周期长、纯化技术简洁,基因组过大且不稳定,又不能对双功能抗体进展改造。故不常用VHVL,以融合蛋白的形式表达53.HBsAg的反向被动血凝诊断试剂检测原理:红细胞经甲醛处理后,在酸性条件下能吸附蛋白质,当纯化的抗乙肝病毒血清吸附其上时便具有抗体活性,假设待测样品中有乙型肝炎病毒外表抗原时,则发生特异性结合反响而使血细胞发生凝集养,使之生存和生长。已有近百年历史了。随着细胞生物学、分子生物学、生物化学和基因工程等一系列学科和技术的进展,渐渐形成了细胞工程学细胞工程:以细胞为单位,按人们的意志,应用生物学、分子生物学等理论和技术,有量培育、增殖,并提取出对人类有用的产品病毒载体:如牛痘病毒、腺病毒、逆转录病毒和杆状病毒等牛痘病毒已广泛用于构建多价疫苗;逆转录病毒正被试验用于基因治疗;杆状病毒载体-昆虫细胞体系也已成功用于几百种外源基因的高效表达DNANaH2PO4CaCl2溶液,当NaH2PO4和CaCl2形成Ca3PO4沉淀时,DNA被包裹在当中,形成DNA-Ca3PO4共沉淀。当沉淀物与细胞外表接触时,通过细胞吞噬作用将DNA导入其中。优点是方DNADNA放在一起进展形成混合的共沉淀物,一起导入细胞。DNANaH2PO4CaCl2溶液,当NaH2PO4和CaCl2形成Ca3PO4沉淀时,DNA被包裹在当中,形成DNA-Ca3PO4共沉淀。当沉淀物与细胞外表接触时,通过细胞吞噬作用将DNA导入其中。优点是方DNADNA放在一起进展形成混合的共沉淀物,一起导入细胞。〔培育基〔〕下,争论植物的细胞、组织和器官的生长以及把握其生长发育的技术悬浮培育:在液体培育基中,能够保持良好分散性的细胞和小的细胞聚拢体〔细胞团〕的培育〔在此培育条件下,组织化水平较低〕.细胞培育:利用单个细胞进展液体或固体培育,诱导其增殖及分化〔目的是为了得到单细胞无性生殖系〕分生组织培育:又称生长锥培育,在人工培育基上培育茎端分生组织细胞外植体:用于植物组织〔细胞〕〔的切段叶、花、果、穗、胚珠、胚乳、花药和花粉等均可作为外植体进展组织培育.器官形成:是指在组织培育或悬浮培育物中芽、根或花等器官的分化与形成或者在先后,再形成锥管组织而将二者连成一个轴,最终形成小植株无性生殖:又叫克隆,指使用母体培育物反复进展继代培育时,通过同种外植体而获得越来越多的无性生殖后代突变体:细胞本身发生遗传变异或应用诱变处理发生的遗传变异所得的细胞继代培育:由最初的外植体上切下的增殖的组织,培育一代称为“第一代培育”,连续多代的培育就称为继代培育67.培育基:是植物离体器官、组织或细胞的无菌土壤,养分成分可调控植物细胞或组织培育基常含有无机盐、碳源、有机氮源、植物生长激素、维生素等成分〔表6-6列出了几种常用培育基的化学组成〕68.植物激素:是植物代谢过程中形成的生长调整物质,在极低浓度〔小于1微摩尔〕时即能调整植物的生育过程,并能从合成部位转运到作用部位而发挥作用69.成批培育法:将培育基一次性地参与反响器,接种、培育确定时间后收获细胞的方式70.半连续培育法:在反响器中投料和接种培育一段时间后,将局部培育液和颖培育液进展交换的培育方法71,连续培育法利用连续培育反响器,在投料和接种一段时间后,以确定的速度连续采集细胞和培育液,并以同样速度供给颖培育基以使细胞生长环境维持恒定的培育方法固定化培育法:利用固定化反响器进展培育,将细胞固定于网状多孔板、尼龙网套和中空纤维膜等反响器的膜外表,放入培育液中进展培育及连续收集培育物的方法诱导子:能触发形成植物抗生素信号的物质细胞内或细胞外生物诱导子: 植物体在防范过程中为对抗微生物感染而产生的物质非生物诱导子:不是植物细胞中自然成分但又能触发植物细胞形成抗毒素信号的物质前体饲养:是增加次级代谢产物产率的重要方法,次级代谢产物的合成依靠于3中主要原材料的供给发酵工程又称为微生物工程:是利用微生物制造工业原料与工业产品并供给效劳的技术微生物发酵工程::如基因工程、细胞工程、酶工程都与发酵工程相关自然选育: :即不经人工处理,利用微生物的自然突变进展菌种选育的过程称为~诱变育种:即用人工方法诱发突变;突变发生部位一般是在遗传物质DNA上,并可稳定遗传原生质体融合: 是将两个亲株分别通过去除细胞壁,使菌体细胞在高渗环境中释放出由原生质体包被着的球状体在高渗条件下混合两个亲株的原生质体由PEG作促融剂使它们相互凝集发生细胞融合,接着两细胞基因组由接触到交换,从而实现遗传物质重组,在再生细胞中就有可能选择出较抱负的重组子氨基酸:利用生物技术得到基因克隆的生产菌,或承受融合技术提高氨基酸产量抗生素:可从产生菌中分别诞生物合成酶基因,进展克隆,提高生产菌的生物量,或得到的杂合抗生素维生素:构建基因工程菌,简化维生素的生产工艺〔如VitC〕疫苗:利用基因工程技术将抗原克隆到E.coli或酵母中,用工程菌生产疫苗,产量高、工艺简洁、操作安全(如)或酶化学方法(如限制性内切核酸酶)DNA切割成为基因水平的很多片段,继而将这些片段与适当的载体结合,将重组DNA转入受体菌扩增杂合抗生素:应用遗传重组技术改造菌种,产生的工程菌,制备的型抗菌活性化合物诱导法:是利用反响过渡态类似物为半抗原制作单克隆抗体,筛选出具高催化活性的单抗即抗体酶。拷贝法:主要依据抗体生成过程中抗原-抗体互补性来设计的。引入法:则借助基因工程和蛋白质工程将催化基因引入到特异抗体的抗原结合位点上,使其获得催化功能。化学修饰法:对抗体进展化学修饰,使抗体与催化基团相连。抗体酶: 由抗原诱导产生的,在构造上与抗原高度互补并与抗原具有特异结合功能的免疫球蛋白。酶是一类具有催化功能的生物
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