高中生物专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养

21一、课题目标学问目标了解有关培育基的根底学问。b.了解消毒和灭菌方法。力量目标进展无菌技术操作。b.进展微生物培育。3.情感目标形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。二、课题重点教学教师活动学生设计流程教学教师活动学生设计流程活动意图1：培育基包括哪些根本成分？水、碳源、氮源、无机盐问题2：从细胞的化学元素组成来看，培育基中为什么都含有这些养分成分？C、H、O、N、P、S97％以上。【小结】共同归纳培育基的根本成分和主要来源。〔2〕特别成分和条件提示学生培育基还需要满足不同微生物生长对PH、氧气、特别养分物质的要求：如乳酸杆pHpH〔二〕无菌技术讲解：无菌操作泛指在培育微生物的操作中，全部防止杂菌污染的方法。强调无菌操作是培育微生物成功的关键。主要方面讲解无菌技术主要方面：对试验操作空间、操作者的衣着和手进展清洁和消毒；将培育器皿、接种用具和培育基等器具进展灭菌；为避开四周微生物污染，试验操作应在酒精灯火焰四周旁进展；避开已灭菌处理的材料用具与四周物品相接触。消毒与灭菌的比较列表让学生进展比较。环 一、根底学问〔一〕培育基节概念：讲解培育基概念：由人工方法配制而成的，专供微生物生长生殖使用二：的混合养分基质。讲授2.种类课展现培育基相关图片，讲解依据物理性质划分的培育基种类、用途。

阅 了读、解培倾 养基听。相关知3.成分根本成分 分展现1000mL牛肉膏蛋白胨培育基的养分构成表格，让学生分析答复以下问题。 析、培育基成分牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5gH2O1000ml1：培育基包括哪些根本成分？水、碳源、氮源、无机盐

供给的主要养分物质 回碳源、磷酸盐和维生素 答。氮源和维生素无机盐氢元素、氮元素问题2：从细胞的化学元素组成来看，培育基中为什么都含有这些养分成分？C、H、O、N、P、S97％以上。【小结】共同归纳培育基的根本成分和主要来源。养分含义 主要来源 归物质纳、无机物：CO2、NaHCO3；有机物：糖碳源 能供给碳元素的物质

类、脂肪酸、石油、花生粉饼等 回氮源 能供给氮元素的物质细胞生命活动必不行少的物水质无机 供给除碳氮元素以外的各种盐 重要元素包括某些大量元素

无机物：N2、NH3、氨盐、硝酸盐；答。有机物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等培育基、大气、代谢产物培育基、大气特别成分和条件提示学生培育基还需要满足不同微生物生长对PH、氧气、特别养分物质的要求：如乳酸杆菌时需要添加维生素，霉菌需要将培育基pH调整为酸性，细菌时需要将pH〔二〕无菌技术调无菌操作是培育微生物成功的关键。主要方面讲解无菌技术主要方面：对试验操作空间、操作者的衣着和手进展清洁和消毒；将培育器皿、接种用具和培育基等器具进展灭菌；为避开四周微生物污染，试验操作应在酒精灯火焰四周旁进展；避开已灭菌处理的材料用具与四周物品相接触。消毒与灭菌的比较列表让学生进展比较。工程理化因素强度消灭微生物数量是否消灭芽孢和孢子

倾 了听、解消阅 毒和读、灭菌思 方考、法。回答。消毒温顺 局部 否灭菌猛烈 全部 是常用的消毒与灭菌的方法让学生阅读教材“试验室常用的消毒和灭菌方法材料，共同归纳常用的消毒 比与灭菌的方法，答复以下问题。较、消毒方法：回①日常生活常常用到的是煮沸消毒法；②对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法〔作简要介绍； 答。③对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增加消毒效果，然后使用紫外线进展物理消毒。④试验操作者的双手使用酒精进展消毒；⑤饮水水源用氯气进展消毒。灭菌方法：①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；阅②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；③培育基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。读、④外表灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。 归问题1.无菌技术除了用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外，还纳、有什么目的？ 回还能有效避开操作者自身被微生物感染。 答。问题2.请你推断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。假设需要，请选择适宜1〕培育细菌用的培育基与培育皿〕〔〕试验操作者的双手〔12〕〔〕需要消毒。【典型例题】些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌()A.接种环、手、培育基 B.高压锅、手、接种环C.培育基、手、接种环 D.接种环、手、高压锅【答案】C火焰灼烧可以快速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。二、试验操作 演〔一〕制备牛肉膏蛋白胨培育基练、让学生阅读教材，讲解制备步骤：回100mL培育基各成分用量。称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动作要快速，目的是防答。止牛肉膏吸取空气中水分。进溶化：①加水加热熔化牛肉膏；②参加蛋白胨和氯化钠连续加热；③加入琼脂；④用蒸馏水定容到100mL。整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼 行无脂糊底而导致烧杯裂开。菌技pH1mol/LNaOHpH灭菌将配制好的培育基转移到锥形瓶中加塞包扎后用高压蒸汽灭菌 术操锅灭菌；所用培育皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。 作。倒平板：待培育基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰四周操作进展。【方法点拨】倒平板的方法及留意事项图文讲解倒平板的方法及留意事项，让学生答复以下问题。①火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口快速通过火焰； 阅③左手将培育皿翻开一条缝隙，右手将培育基倒入培育皿，马上盖上皿盖。 读、④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。 倾问题1.培育基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板你用什么听、方法来估量培育基的温度？ 思培育基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么方法来考、估量培育基的温度？回问题2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培育基。 答。问题3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会分散水珠，凝固后的培育基外表的湿度也比较高将平 。入培育基，造成污染。问题4.在倒平板的过程中，假设不留神将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培育微生物吗？为什么？平板培育微生物。〔二〕纯化大肠杆菌表达：微生物接种方法很多，最常用的接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法定义和目的一个细胞生殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。于筛选菌株的最简便方法之一。操作步骤让学生阅读教材平板划线法操作图文资料，讲解操作步骤，让学生答复以下问题。 进①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。 行微②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并翻开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。 生物③将菌种试管口通过火焰到达消灭试管口杂菌的目的。培④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。 养。3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培育基。述过程，完成三、四、五区域内划线。留意不要将第五区的划线与第一区划线相连。⑧将平板倒置放在培育箱中培育。问题1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操 倾作完毕时，仍旧需要灼烧接种环吗？为什么？ 听、第一步灼烧接种环是为了避开接种环上可能存在的微生物污染培育物每次划思考。环，能准时杀死接种环上残留的菌种，避开细菌污染环境和感染操作者。阅问题2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进展划线？以免接种环温度太高，杀死菌种。 读、问题3.在作其次次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端倾开头划线？ 思考、生殖而来的菌落。回稀释涂布平板法答。定义和目的的标准菌落。操作步骤让学生阅读教材稀释涂布平板法的系列稀释操作和涂布平板操作图文材料解相关操作步骤，让学生答复以下问题。系列稀释操作9mL6101、102、103、104、105、106。1mL1013使之混匀。1011mL102102倍液。依此类推。留意：移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰1~2cm处。涂布平板操作倾听、阅读、思2步应如何进展无菌操作？应从操作的各个细节保证“无菌。例如，酒精灯与培育皿的距离要适宜、吸考、管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰四周等。 回【典型例题】 答。以下关于微生物接种的描述，正确的选项是()的接种C.利用平板划线法不能得到单菌落，而利用稀释涂布平板法能得到单菌落D.需要灭菌【答案】B落，接种器具都要进展严格灭菌处理。三、结果分析与评价让学生分析答复相关问题，加以讲解。1.未接种的培育基外表是否有菌落生长？假设有菌落生长，说明什么？培育未接种培育基作用是比照，有菌落形成，说明培育基灭菌不彻底。2.接种大肠杆菌培育基上，独立菌落颜色、外形、大小如何？大肠杆菌菌落呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。12h24h落大小不同；菌落分布位置一样。缘由是时间越长，菌落中细菌生殖越多，菌落体积越大；菌落的位置不动，但菌落数增多。假设你在培育基上观看到不同形态菌落，可能是哪些缘由引起的？培育基灭菌不彻底或杂菌感染等。演练、回答。能够对试验结果进展分分析。析、回答。环 共同回忆本节要点：节 一、培育基养分构成：都含有水、碳源、氮源和无机盐。三：种类：液体培育基和固体培育基。课堂二、无菌技术小结

呼 突应、出本回 节重答。点。三、大肠杆