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三、肺泡上皮细胞的培养肺泡上皮细胞的获取大鼠肺泡上皮细胞人肺泡上皮上皮细胞无锡菩禾生物医药技术有限公司上海拜力生物科技有限公司上海酶研生物科技有限公司三、肺泡上皮细胞的培养肺泡上皮细胞的获取1肺泡壁是由单层扁平上皮构成，有三种细胞：肺泡：肺泡壁是由单层扁平上皮构成，有三种细胞：A.扁平上皮细胞（I型细胞），其基膜紧贴毛细血管。B.

分泌上皮（II型细胞），该细胞突向管腔或夹在扁平上皮细胞之间，可分泌表面活性物质。C.隔细胞：位于肺泡间隔中，当进入肺泡腔内就叫尘细胞。在尘细胞的细胞质内有大量尘埃颗粒，属于吞噬细胞。D.肺泡隔：是相邻肺泡壁之间的结构，由结缔组织和丰富的毛细血管组成。肺泡壁是由单层扁平上皮构成，有三种细胞：肺泡：肺泡壁是由单层2培养条件培养条件：DMEM培养基(GIBCO，添加NaHCO3

1.5g/L，丙酮酸钠

0.11g/L)；优质胎牛血清10%，细胞生长因子。气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度。培养条件培养条件：DMEM培养基(GIBCO，添加NaHC3培养方法1、取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态；

2、

待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养；

3、

细胞传代

1）

吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次；

2）

添加0.125%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；

3）用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5ml，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）

待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。培养方法1、取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜4需注意问题及措施需要注意的问题防止ATII细胞向ATI细胞分化防止ATII细胞向成纤维细胞分化措施添加有利于细胞分裂、繁殖、表型维持的细胞因子，如重组人表皮生长因子、转铁蛋白、肾上腺素等，再配以

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