权威细胞免疫治疗开展情况

权威细胞免疫治疗开展情况第1页，课件共54页，创作于2023年2月细胞免疫治疗在辽宁省人民医院的临床应用情况

辽宁省人民医院肿瘤科：赫丽杰

第2页，课件共54页，创作于2023年2月我院生物治疗发展史1999年：开始LAK细胞和肿瘤疫苗的工作2002年：开始利用CIK应用到恶性肿瘤的临床工作中，至今累计病例千余例。2010年底：在原有实验室基础上，建成了符合GMP标准的细胞治疗实验室。2011年始：开展DC细胞治疗肿瘤的工作，并更新CIK细胞的培养方法，使细胞更加丰富，治疗效果更佳。第3页，课件共54页，创作于2023年2月肿瘤生物治疗中心建立2011年1月27日新建的实验室通过了辽宁省疾控中心认证，成为国际先进的整体万级、局部百级洁净，符合GMP标准的细胞治疗实验室！临床制定了规范化的诊疗流程2011年3月10日辽宁省人民医院肿瘤生物治疗中心正式成立！2011年3月15日GMP标准实验室正式启动运行！第4页，课件共54页，创作于2023年2月肿瘤生物治疗中心概况肿瘤生物治疗门诊室细胞单采室：血细胞单采分离机1台GMP细胞实验室：有生物安全柜，CO2培养箱，-80度低温冰箱，离心机等一批先进的细胞培养的实验设备，在国内外同类实验室中处于领先地位。细胞质检室第5页，课件共54页，创作于2023年2月细胞免疫治疗的项目及方案项目：自体细胞因子诱导杀伤（CIK）细胞抗原致敏树突状细胞（DC）方案：单纯CIK+DC治疗

CIK+DC联合化疗第6页，课件共54页，创作于2023年2月细胞免疫治疗的适应症手术后的患者手术及放疗后的患者手术及化疗后的患者手术及放、化疗以后的患者放化疗后的患者对于很多放、化疗无效或不接受放、化疗的患者，单独使用DC/CIK免疫治疗，仍然有效且无毒副作用。癌性胸、腹腔积液患者。第7页，课件共54页，创作于2023年2月细胞免疫治疗的禁忌症细胞因子过敏T细胞淋巴瘤第8页，课件共54页，创作于2023年2月细胞免疫治疗临床规范化实施流程病例选择治疗过程：单采→体外诱导→回输临床观察指标第9页，课件共54页，创作于2023年2月细胞免疫治疗病例选择入选标准：①年龄大于18岁；②病理组织学或细胞学确诊为肿瘤患者；③卡氏体力状况评分标准60分以上；④预计生存期至少大于3个月；⑤签署知情同意书；如若可以接受手术治疗或其它方式能够获得一定数量的肿瘤组织件或细胞的患者最佳。第10页，课件共54页，创作于2023年2月细胞免疫治疗的病例选择排除标准：①脏器移植者；②长期使用免疫抑制药物或正在使用的自身免疫性疾病者；③身体状况较差，伴严重心肺肝及肾功能不良者（心功能不全IV级以上；呼吸衰竭；国内肝功能分级C级以上；肾功能衰竭及尿毒症期）；④脑转移并伴意识障碍者；⑤精神疾病者；⑥急性肝炎或其他急性感染病活动期、HIV感染者；⑦怀孕或哺乳期妇女；⑧对本治疗中所有生物试剂过敏者；⑨T细胞淋巴瘤；第11页，课件共54页，创作于2023年2月细胞免疫治疗过程

每位患者在接受免疫治疗前1-2天内，需完善的检查包括：血常规、血型、感染筛查、肝肾功、血离子、凝血功能、T细胞亚群、肿瘤标志物、心电图、心功能。对于有可观测靶病灶的病例，治疗前需进行基线评估，即有至少1个月内的影像检查，如CT、MRI等签署知情同意书第12页，课件共54页，创作于2023年2月细胞免疫治疗过程自体外周血单个核细胞采集：血细胞分离机（PBMC液50-60ml，即≥1×109及血浆80ml）免疫活性细胞的制备：DC培养、CIK培养

7-8天开始收获DC细胞;12-16天开始收获CIK细胞细胞回输：静脉输注

CIK、DC各分4次回输，交错进行。每次回输细胞数为CIK﹥1×109、DC﹥1×107一疗程：4DC+4CIK大约1个月。第13页，课件共54页，创作于2023年2月DC的制备流程负载肿瘤抗原的成熟DC细胞细胞回输诱导DC细胞肿瘤抗原临床疗效监测

DC细胞成熟抗原负载细胞分选14第14页，课件共54页，创作于2023年2月15INF-γ、CD3McAb、IL-2第15页，课件共54页，创作于2023年2月细胞免疫治疗的临床观察指标生活质量改善免疫功能检测客观疗效评估不良反应第16页，课件共54页，创作于2023年2月观察指标：生活质量的改善主要应用EORTCQLQ-C30生命质量测定表及KPS评分标准评价患者生活质量改善卡式评分增加：KPS评分增加≥20分疼痛程度减轻：疼痛减轻≥50％食欲及睡眠的改善胸腹水减少第17页，课件共54页，创作于2023年2月第18页，课件共54页，创作于2023年2月观察指标：免疫功能改善治疗前及治疗后1周，采集患者外周血，采用流式细胞仪检测T细胞亚群（CD3、CD4、CD8、CD3/CD56等含量及比例），评估患者治疗前后免疫功能的改善。第19页，课件共54页，创作于2023年2月观察指标：客观疗效评估近期疗效：

1.靶病灶大小的变化：按照RECIST1.1版评定肿瘤近期疗效，即以治疗前后影像学检查为依据进行评价，分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、病灶稳定(SD)和进展(PD)2.疾病控制率（DCR）：CR+PR+SD

反应率（RR）：CR+PR远期疗效：无病生存时间（DFS）无进展生存时间（PFS）总生存（OS）

第20页，课件共54页，创作于2023年2月观察指标：不良反应

每次输注CIK或CIK细胞时均观察有无寒战、发热及过敏等症状，不良反应按照美国国立癌症研究所制定的通用药物毒性反应标准（NCI-CTC），分为0～IV度。第21页，课件共54页，创作于2023年2月治疗基本流程疗效观察单个核细胞采集细胞分离、扩增细胞鉴定及无菌检测细胞回输第22页，课件共54页，创作于2023年2月新实验室建成后开展概况单采例次：6（2011.3.15～）肺癌1例直肠癌1例胃癌1例非霍奇金淋巴瘤1例甲状腺癌1例恶性黑色素瘤1例回输例次：临床疗效及不良反应有待于进一步观察

第23页，课件共54页，创作于2023年2月道路曲折前景光明第24页，课件共54页，创作于2023年2月

辽宁省人民医院肿瘤科

联系电话/p>

11clinicaltrials.867patients,.426

patientsweretreated.

MosttrialsincludedpatientswithHCC,gastriccancer,

andHodgkin,non-Hodgkindisease.

In10of11studies,autologousCIK

cellswereused.第27页，课件共54页，创作于2023年2月The1-,3-and5-yearDFSinpatientsreceivingCIKcellswhencomparedtonoCIKcelltreatment(127patients)Conclusion:Adjuvantimmunotherapywithcytokineinduced

killercellsmaypreventrecurrenceandimprove

qualityoflifeandprogression-freesurvivalrates

in

patients

withcancer.第28页，课件共54页，创作于2023年2月生物中心概况医生10人、博士2人，硕士5人、护士7人；技术人员7人主任医师3人，副主任医师3人，主治医师1人，医师3人。病床30张；单采室：血细胞单采分离机1台肿瘤生物治疗门诊第29页，课件共54页，创作于2023年2月概念：是机体内最有效、功能最强的专职抗原提呈细胞（APC）它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原未成熟DC具有较强的捕获抗原及迁移能力成熟DC能有效激活初始型T细胞处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节

DC，树突状细胞免疫疗法第30页，课件共54页，创作于2023年2月肿瘤患者的抗原提呈缺陷做为抗原递呈细胞的DC细胞数量不足。肿瘤细胞分泌大量的抑制因子如转化生长因子（TGF-β）等抑制免疫反应。缺乏危险信号，DC细胞不能完全成熟。肿瘤细胞形成生理屏障阻碍DC摄取抗原。肿瘤患者体内存在过量的调节性T淋巴细胞(Treg)产生免疫抑制效应。要避开这些因素的影响，体外诱导激活树突状细胞是最高效的一种方法！第31页，课件共54页，创作于2023年2月DC杀瘤机制在机体的抗肿瘤免疫反应中，细胞免疫是主要形式。而产生的CD8+的细胞毒性T细胞(CTL)是有效的抗肿瘤细胞免疫的核心。在体外以肿瘤抗原专一地冲击致敏、激活DC，将摄取了肿瘤抗原的DC回输至体内，携带肿瘤抗原的DC再将抗原信息提呈给T细胞时，活化了T细胞，从而诱导机体产生了具有特异性杀伤肿瘤细胞的CTL，因而对肿瘤产生一定的治疗作用。第32页，课件共54页，创作于2023年2月DC应用目前，DC疗法，在我国已被批准用于肿瘤患者的临床治疗，已上全国及辽宁省医疗服务价格项目规范，也是目前国内唯一被批准应用于临床的肿瘤疫苗类治疗方法，已经大量应用于肿瘤的临床免疫治疗。（FDA批准Provenge的治疗晚期前列腺癌疫苗)对肿瘤切除术后的癌症患者在术后进行CIK过继免疫治疗，杀灭残存的肿瘤细胞同时，结合DC疗法，可激发机体特异性抗肿瘤免疫，达到长期对肿瘤细胞的控制杀伤效果。第33页，课件共54页，创作于2023年2月DC的制备流程负载肿瘤抗原的成熟DC细胞细胞回输诱导DC细胞肿瘤抗原临床疗效监测

DC细胞成熟抗原负载细胞分选34第34页，课件共54页，创作于2023年2月DC细胞疫苗的优势整个治疗过程病人简单易行，非常轻松，无痛苦和不适。培养所需的淋巴细胞数量少，不需要采集大量的外周血。诱导并激活病人自身的特异性抗肿瘤免疫反应。诱导产生免疫记忆，使机体获得持久的抗肿瘤免疫力。可治疗的肿瘤种类广，对国内发病率较高的肿瘤如消化道肿瘤（胃癌、直肠癌）、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、肾癌、白血病等都有一定的疗效。与CIK细胞治疗可以协同进行，达到互补的效果。35第35页，课件共54页，创作于2023年2月CIK，细胞因子诱导的杀伤细胞免疫疗法CIK细胞是一种用外周血单个核细胞（PBMC），在体外经过多种细胞因子培养激活后，获得的对肿瘤细胞具有高效溶解毒性的一群异质细胞。又称为NK细胞样T淋巴细胞：主要组成包括CD3+CD8+双阳性细胞、CD3+CD4+双阳性细胞以及CD3+CD56+双阳性细胞（主要效应细胞）。特点：兼具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性、NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点。应用CIK细胞被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。第36页，课件共54页，创作于2023年2月CIK细胞的作用机制CIK细胞第37页，课件共54页，创作于2023年2月CIK细胞的特点增殖速度快杀瘤活性高，兼具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性杀瘤谱广，兼具有NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点细胞来源丰富：正常或患者的骨髓或外周血单个核细胞均可诱导获得CIK细胞对多重耐药肿瘤细胞同样敏感杀瘤活性不受CsA、FK506等免疫抑制剂的影响对正常骨髓造血前体细胞无毒性能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞Fas-FasL凋亡第38页，课件共54页，创作于2023年2月CIK治疗的适应证1、肿瘤根治性治疗结束后的巩固、维持治疗，在接受细胞免疫治疗前应尽量降低肿瘤负荷。2、肿瘤综合治疗的组成部分，如在化疗治疗的间隙期或在肿瘤局部放疗过程中同时联合自体免疫细胞治疗。3、晚期肿瘤患者的辅助治疗。第39页，课件共54页，创作于2023年2月CIK治疗的禁忌症1、细胞因子过敏。2、T细胞淋巴瘤病人应禁用。第40页，课件共54页，创作于2023年2月41INF-γ、CD3McAb、IL-2第41页，课件共54页，创作于2023年2月CIK细胞治疗的优势整个治疗过程简单易行，病人非常轻松，无痛苦和不适。培养所需的淋巴细胞数量少，不需要采集大量的外周血。消灭微小残留病灶对多重耐药肿瘤细胞敏感，故可用于治疗某些化疗不敏感的肿瘤；不宜手术且对化疗和放疗禁忌的肿瘤患者。显效时间短，病人可以马上感到食欲和精神状态的好转以及疼痛减轻，使病人对继续接受治疗充满信心。与DC细胞治疗可以协同进行，达到互补的效果。421012109106第42页，课件共54页，创作于2023年2月细胞回输方案治疗途径：全身治疗是通过静脉输注进行；

局部治疗是通过介入方法或直接注入病灶部位。治疗过程：第0天采集外周血单个核细胞分离培养；第7-8天开始收获DC细胞，分4次回输，每次间隔3-4天；第10天开始收获CIK细胞，分4次回输,与DC回输交错进行。总疗程：4DC+4CIK总疗程约为20天。第43页，课件共54页，创作于2023年2月观察指标一般状态的改善免疫功能检测疗效评估不良反应第44页，课件共54页，创作于2023年2月一般状态的改善卡式评分增加：KPS评分增加≥20分疼痛程度减轻：疼痛减轻≥50％食欲及睡眠的改善胸腹水减少第45页，课件共54页，创作于2023年2月第46页，课件共54页，创作于2023年2月免疫功能改善治疗前及治疗后，采集患者外周血，采用流式细胞仪检测CD3、CD4、CD8、CD3/CD56，评估患者治疗前后免疫功能的改善。T辅助细胞（%）T抑制细胞（%）NKT细胞（%）治疗前30.24±4.2128.94±5.386.53±0.46治疗后34.21±3.1224.55±4.7110.68±1.43第47页，课件共54页，创作于2023年2月疗效评估近期疗效：

1.WHO标准或RECIST，分为CR、PR