血液学血细胞化学染色公开课一等奖课件省赛课获奖课件

第三章

细胞化学染色技术

1精选ppt第1页

学习目标1.掌握：细胞化学染色基本步骤；铁染色、过氧化物酶染色、酯酶染色、过碘酸-希夫染色、碱性磷酸酶染色、酸性磷酸酶染色正常血细胞染色反应和临床意义。2.熟悉：细胞化学染色概念和临床应用。3.理解：细胞化学染色原理和影响原因。2精选ppt第2页第一节概述

一、概念细胞化学染色是细胞学和化学相结合而形成一门科学。它以细胞形态学为基础，结合利用化学反应原理对血细胞内多种化学成份(酶类/脂类/糖类/铁/蛋白质/核酸等)作定性、定位、半定量分析办法。3精选ppt第3页要求：血细胞化学染色基本要求是在原位显示细胞成份和构造，反应产物应是有色沉淀物，具有一定稳定性。血细胞化学染色可显示糖原、脂类、酶、蛋白质等。4精选ppt第4页二、必要性从形态学观测，存在较多主观性；有些原始细胞形态较相同，难以鉴别；结合细胞化学染色，提升疾病诊断率。5精选ppt第5页三、临床应用1.辅助判断急性白血病细胞类型2.辅助血液系统疾病诊断和鉴别诊断3.观测疾病疗效和预后4.疾病发病机制探讨6精选ppt第6页白血病诊断：MICM分型

M：morphologyI：immunology

C：cytogeniticsM：molecularbiology形态学分型：进行初步诊断免疫学分型：明确细胞种类细胞遗传学分型：与疾病预后有关分子生物学分型：提升到分子水平7精选ppt第7页四、基本步骤1.固定（1）物理法：干燥、火焰（2）化学法：A、蒸气固定：甲醛B、液体固定：甲醛、乙醇、甲醇、丙酮。8精选ppt第8页2.显示：有色沉淀反应（1）偶氮偶联法：酯酶染色（2）联苯胺法：POX（3）普鲁士蓝反应：Fe（4）希夫反应：PAS（5）金属沉淀法：NAP（6）物理显色法：SBB9精选ppt第9页3.复染：使多种细胞能显示出来铁染色----中性红、伊红PAS-------甲基绿核：中性红、甲基绿、沙黄等。浆：伊红、刚果红、光绿等。10精选ppt第10页五、研究对象

外周血和骨髓新鲜涂片单个细胞中化学物质：

酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核酸等

11精选ppt第11页

第二节常用细胞化学染色技术

铁染色过氧化物酶染色苏丹黑B染色酯酶染色过碘酸-希夫反应中性粒细胞碱性磷酸酶染色酸性磷酸酶染色

12精选ppt第12页一、铁染色

（ferricstain）13精选ppt第13页亚铁氰化钾亚铁氰化铁(蓝色沉淀在含Fe部位)铁＋酸性环境普鲁士蓝反应骨髓小粒中含Fe血黄素（细胞外铁）骨髓中贮存铁幼红细胞内Fe（细胞内铁）原理14精选ppt第14页

二、成果判断

1.细胞外铁(骨髓小粒－含铁血黄素)铁颗粒、铁小珠、铁团块15精选ppt第15页细胞外铁(低倍镜观测)（－）：无颗粒（＋）：有少许铁颗粒或偶见铁小珠（＋＋）：有较多铁颗粒或铁小珠（＋＋＋）：有很多铁颗粒、铁小珠和少数铁小块（＋＋＋＋）：有极多铁颗粒、小珠和很多铁小块，密集成堆。16精选ppt第16页2.细胞内铁(中晚幼红细胞，油镜观测)（1）分级(按铁颗粒数量多少及大小)

细小颗粒：细沙样铁小粒，不易看清。粗大颗粒：很容易看清颗粒。（2）阳性率

观测100个中晚幼红细胞，计算出铁粒幼红细胞百分比。17精选ppt第17页【成果判断】

幼红细胞核染色为鲜红色,铁粒呈蓝绿色。

18精选ppt第18页细胞内铁(油镜观测幼红细胞)

Ⅰ型：1～2个小铁颗粒；

Ⅱ型：3～5个小铁颗粒；

Ⅲ型：6～10个小铁颗粒或1～4个大颗粒；

Ⅳ型：

10个以上小铁颗粒或5个以上大颗粒。19精选ppt第19页

环形铁粒幼红细胞(ringedsideroblast)

幼红细胞胞质内铁颗粒>6个，围绕核周2/3以上者。铁粒幼红细胞(sideroblast)：

胞质中出现蓝色铁颗粒幼红细胞。铁粒红细胞(siderocyte)：

胞质中出现蓝色铁颗粒成熟红细胞。20精选ppt第20页绿色箭头示：环形铁粒幼红细胞；蓝色箭头示：铁粒红细胞21精选ppt第21页1.细胞外铁：

（+）~（++）2.细胞内铁：铁粒幼红细胞阳性率大约12~44%，I~II型（I型为主），无Ⅲ型、Ⅳ型、环形铁粒幼红细胞及铁粒红细胞。三、参照范围22精选ppt第22页四、临床意义

铁染色是评定铁缺乏最实用办法，是反应储存铁金标准，是临床应用最广泛细胞化学染色之一。23精选ppt第23页

1.缺铁性贫血：外铁（－），内铁<10%；治疗有效后，内外铁

。

2.铁粒幼细胞性贫血：外铁

；内铁阳性率

，环形铁粒幼红细胞增多，可见粗颗粒Ⅲ、Ⅳ型铁粒幼红细胞。24精选ppt第24页

3.MDS-RAS：内外铁增多，环形铁粒幼红细胞>15%。

4.非缺铁性贫血：溶贫、巨幼贫、再障、白血病等，内外铁正常或增多。

5.感染、肝硬化、慢性肾炎、血色病等：外铁增多。25精选ppt第25页五、应用评价铁染色是临床常用一种细胞化学染色，虽不如血浆铁蛋白敏感，不过反映机体储存铁金标准。

外铁：反应骨髓中铁储存量；

内铁：反应骨髓中可利用铁量。

26精选ppt第26页二、过氧化物酶染色

（peroxidase,POX）

27精选ppt第27页一、原理

粒细胞和部分单核细胞溶酶体颗粒中含有过氧化物酶(POX)，它可分解H2O2释放出新生态氧，后者氧化二氨基联苯胺，形成金黄色不溶性沉淀，定位于胞质内酶所在活性部位。

二甲基联苯胺法（DAB）原理28精选ppt第28页POX

新生态氧[O]↑过氧化氢（基质中）四甲基联苯胺（无色）联苯胺蓝（蓝色）亚硝基铁氰化钠蓝色颗粒（浆内酶部位）粒、单核细胞胞浆【原理】29精选ppt第29页二、ICSH推荐三种办法

二氨基联苯胺法（DBA）二盐酸联苯胺法过氧化物酶氨基-甲基卡巴唑染色法

30精选ppt第30页三、成果判断

在细胞质内出钞票黄色颗粒为阳性反应。（二氨基联苯胺法）31精选ppt第31页二氨基联苯胺法32精选ppt第32页二盐酸联苯胺法33精选ppt第33页二盐酸联苯胺法34精选ppt第34页【成果判断】

-、±、+、++、+++、++++弱阳性颗粒小，分布稀疏阳性颗粒稍粗，分布较密集强阳性颗粒粗大，密布于整个胞浆35精选ppt第35页POX成果判断细胞质内有蓝黑色颗粒者为阳性。（－）无颗粒沉着；（a）（±）颗粒细小，分布稀疏；（b）（+）颗粒较粗，局灶分布；（c）（++）颗粒粗大，分布较密，占胞质1/2~2/3；（d）（+++）颗粒粗大，呈团块分布；（e）（++++）所有胞质均部满颗粒，可覆盖胞核（f）。36精选ppt第36页【正常血细胞染色反应】1.粒细胞系统

POX主要存在于粒系细胞中。

分化差原粒细胞阴性;

分化好原粒细胞至中性成熟粒细胞各阶段均呈阳性，阳性反应程度随细胞成熟逐渐增强。

中性分叶核粒细胞：强阳性嗜酸粒细胞：阳性最强嗜碱粒细胞：（－）37精选ppt第37页

2.单核细胞系统阴性或弱阳性

3.淋巴细胞系统红细胞系统巨核细胞系统阴性浆细胞组织细胞

38精选ppt第38页39精选ppt第39页40精选ppt第40页41精选ppt第41页42精选ppt第42页四、临床意义鉴别急性白血病类型首选（1）急淋和急性髓细胞系鉴别：急淋：（－），阳性率<3%；急单：弱阳性；急粒：阳性（+～+++）。

43精选ppt第43页

2.单核细胞系统：（－）或弱（+），阳性颗粒少而细小。

3.其他系统细胞：淋巴细胞系统、红细胞系统、巨核细胞系统、浆细胞、组织细胞（－）。

44精选ppt第44页【临床评价】

急性髓细胞白血病急性淋巴细胞白血病

鉴别45精选ppt第45页

1.急性髓细胞白血病

（1）急性粒细胞白血病

阳性反应

（2）急性单核细胞白血病

弱阳性反应46精选ppt第46页

2.急性淋巴细胞白血病

阴性反应或阳性率<3%(残留原粒细胞)47精选ppt第47页ALL48精选ppt第48页ALL49精选ppt第49页原粒阴性50精选ppt第50页原粒弱阳性51精选ppt第51页原粒阳性52精选ppt第52页早幼粒强阳性53精选ppt第53页

一、原理

苏丹黑B是一种脂溶性重氮染料，可溶解细胞内含脂构造(中性脂肪、磷脂、糖脂和类固醇)，而使脂类物质显示出来，呈棕黑色或深黑色(粒细胞：丰富；单核细胞：少许)。三、苏丹黑B染色（SudanblackB，SBB）54精选ppt第54页正常血细胞染色反应与POX染色基本一致临床意义与POX染色相同55精选ppt第55页二、SBB与POX区分：

1.POX特异性高于SBB，而敏感性低于SBB；2.POX染色要求涂片新鲜，保持酶活性，SBB染色可用陈旧涂片。56精选ppt第56页57精选ppt第57页58精选ppt第58页

1.特异性酯酶（specificesterase）

主要存在于粒细胞，又称“粒细胞酯酶”

－氯乙酸AS-D萘酚酯酶（NAS-DCE）。

一、分类四、酯酶染色59精选ppt第59页

2.非特异性酯酶(nonspecificesterase)单核、组织细胞中含量较多，粒细胞、淋巴细胞中含量少，且氟化钠抑制单核细胞中非特异性酯酶，而不抑制粒细胞、淋巴细胞及其他细胞。60精选ppt第60页

醋酸AS-D奈酚酯酶：NAS-DAE

α-醋酸奈酚酯酶：α-NAE

α-丁酸奈酚酯酶：α-NBE酸性α-醋酸奈酚酯酶：ANAE

(α-NBE敏感性不如NAS-DAE但特异性较之强)

61精选ppt第61页（

一）特异性脂酶染色1.氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色

NaphtholAS-Dchloroacetateesterase62精选ppt第62页

1.原理氯乙酸AS-D萘酚AS-D萘酚

不溶性有色(红)沉淀。NAS-DCE几乎仅出目前粒细胞，其特异性高，因此又称为“粒细胞酯酶”NAS-DCE

重氮盐(坚牢蓝紫酱)63精选ppt第63页氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色64精选ppt第64页

2.正常血细胞染色反应

①粒系(酶活性不随细胞成熟而增强)原粒（－）或（+）早幼粒~成熟中性粒细胞（+）嗜酸性粒细胞（－）或弱（+）嗜碱性粒细胞（+）65精选ppt第65页

②单核细胞系统：（－）③肥大细胞：（+）

④淋巴细胞、浆细胞、幼红细胞、

巨核细胞、血小板：（－）66精选ppt第66页

3.临床意义

主要用于辅助鉴别急性白血病细胞类型：

①急性粒细胞白血病：（+）

②急性早幼粒细胞白血病：强（+）

③急性单核细胞白血病：（－）

④急粒-单：粒细胞（+）单核细胞（－）

⑤急性巨核细胞性白血病：（－）

⑥急性淋巴细胞白血病：（－）67精选ppt第67页

原理

：

非特异性脂酶在对应pH环境中，

将基质液中对应底物水解，产生含萘酚

物质，后者与重氮盐发生偶联反应，

形成不溶性有色沉淀，定位于细胞质

内酶所在部位。（二）非特异性脂酶染色68精选ppt第68页根据pH值不一样分为：酸性：酸性α-醋酸萘酚酯酶染色(ANAE)中性：α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)

醋酸AS-D萘酚酯酶染色(NAS-DAE)碱性：α-丁酸萘酚酯酶染色(α-NBE)69精选ppt第69页

名称pH底物生成物重氮盐(产物颜色)α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)中α-醋酸萘酚α-萘酚坚牢蓝B棕黑,灰黑醋酸AS-D萘酚酯酶(AS-DNAE)中醋酸AS-D萘酚AS-D萘酚坚牢蓝BB蓝α-丁酸萘酚酯酶(α-NBE)碱α-丁酸萘酚α-萘酚坚牢紫酱GBC红酸性α-醋酸萘酚酯酶(ANAE)酸α-醋酸萘酚α-萘酚六偶氮付品红红70精选ppt第70页

1.α-醋酸萘酚酯酶染色

（α-naphtholacetateesterase，α-NAE）71精选ppt第71页α-醋酸萘酚酯酶（细胞内）α-醋酸萘酚（基质液中）α-萘酚

重氮盐（坚牢蓝B）胞浆不溶性灰黑色或棕黑色沉淀水解【原理】72精选ppt第72页【成果判断】

胞浆内有灰黑色或棕黑色弥散性颗粒状沉淀为阳性。73精选ppt第73页α-醋酸萘酚酯酶染色(灰黑色、棕黑色)74精选ppt第74页α-醋酸萘酚酯酶染色a:单核b:BPCc:巨核d:LC(+)e:幼红(-)75精选ppt第75页

氟化钠抑制试验

在基质液中加入适量NaF,其他染色办法同上。两种办法染色后用油镜计数100或200个被检细胞，分别计算出抑制前和抑制后阳性率或阳性积分。76精选ppt第76页

氟化钠抑制率=抑制前阳性率或阳性积分-抑制后阳性率或阳性积分抑制前阳性率或阳性积分100%77精选ppt第77页78精选ppt第78页

A图：急性单核细胞白血病α-NAE染色

原始、幼稚单核细胞多呈强阳性

B图：急性单核细胞白血病

α-NAE氟化钠抑制染色原始、幼稚单核细胞阳性反应被氟化钠抑制（与A图为同一标本）

A

B79精选ppt第79页【临床评价】急单急粒急性早幼粒急粒单急淋α-NAE+++或-或++阳性-++++弱+NaF被抑制不被不被抑制部分被抑制抑制部分未被抑制主要用于鉴别急性白血病类型80精选ppt第80页

2.临床意义

辅助鉴别急性白血病细胞类型

急单：单核细胞阳性，能被NaF抑制。

急粒：粒细胞弱阳性，不被NaF抑制。81精选ppt第81页

M3：强阳性，不能被NaF抑制。

M4：部分阳性细胞能被NaF抑制，

部分阳性细胞不能被NaF抑制。

ALL：原幼淋阴性或阳性，不能被NaF抑制。82精选ppt第82页【正常血细胞染色反应】1.单核细胞系统

原始单核细胞分化差阴性分化好阳性

幼稚及成熟单核细胞阳性被氟化钠抑制83精选ppt第83页

2.粒细胞系统

原粒细胞阴性或弱阳性下列阶段为弱阳性

3.淋巴细胞系统

多数阴性，少数弱阳性

不被氟化钠抑制84精选ppt第84页2.α-丁酸奈酚酯酶染色α-NBE

原理：

血细胞中α-NBE在碱性条件下，基质液中α-丁酸奈酚水解，产生α-奈酚，后者与坚牢酱紫GBC偶联，形成不溶性红色沉淀，定位于胞质内。85精选ppt第85页α-NBE染色反应1.粒系：各期（-）2.单核系：分化差原单（-）；分化好原单（+）幼单~成熟单核（+），可被NaF抑制3.淋巴系：TC、非T非B（+）BC（+）

4.其他细胞：巨核、有核红细胞、浆细胞（-）或弱（+）

组织细胞(+),不被NaF抑制86精选ppt第86页3.酸性α-醋酸奈酚酯酶染色ANAE

原理：

血细胞中酸性α-醋酸奈酚酯酶（ANAE）在pH弱酸性（pH5.8）条件下，可水解基质液中α-醋酸奈酚，产生α-奈酚，进而与重氮盐六偶氮付品红形成不溶性红色沉淀，定位于细胞质内酶所在部位。87精选ppt第87页酸性α-醋酸萘酚酯酶染色（弥漫性棕红色）---M588精选ppt第88页ANAE染色反应1.单核系：强（+）可被NaF抑制2.淋巴系：TC（+）BC（-）3.其他细胞：粒系（-）或弱（+）不被NaF抑制

红系、巨核系（-）

89精选ppt第89页

4.酯酶双染色

在同一张涂片上进行两种酯酶染色特异性酯酶+非特异性酯酶对诊断急性粒-单细胞白血病有独特价值

α-NAE与NAS-DCE红色(单)

α-NBE与NAS-DCE兰色(粒)

90精选ppt第90页骨髓涂片特异性酯酶（CE）和非特异性酯酶（NAE）双酯酶染色显示，原始粒细胞胞浆呈蓝色CE阳性反应；而原始单核细胞胞浆呈棕色NAE阳性反应。91精选ppt第91页

NAS-DCE：

M1弱(+)/M2(+)/M3强(+)，M5/ALL(－)；

α-NBE：

M5(+)NaF抑制，M1/M2/M3/ALL(－)；

α-NAE/NAS-DAE：

M5强(+)NaF抑制

M3强(+)/M1M2a/ALL(+)NaF不抑制。

92精选ppt第92页五、过碘酸-希夫反应

(糖原染色)

（periodicacid-Schiffreaction，PAS）93精选ppt第93页双醛基过碘酸希夫试剂中无色品红

紫红色化合物(附于含多糖类胞浆内)乙二醇基(多糖类物质具有)氧化【原理】94精选ppt第94页

过碘酸是氧化剂，使具有乙二醇基多糖类物质(糖原、糖蛋白、糖脂、粘多糖等)氧化，形成双醛基。醛基与Schiff’s液中无色品红结合，使无色品红变成紫红色化合物，定位于含多糖类细胞内。

一、原理95精选ppt第95页【成果判断】阳性胞浆内红色阳性物呈弥散状、颗粒状或块状。阴性胞浆内无色或无颗粒,核淡绿。

96精选ppt第96页97精选ppt第97页98精选ppt第98页

1.粒细胞系统：（阳性逐渐增强）

原始粒C（－）或（+）早幼粒C~成熟中性粒C（+）：

细颗粒均匀红色嗜酸粒C：颗粒不着色，胞质呈红色。嗜碱粒C：颗粒阳性，胞质不着色。

二、正常血细胞染色反应99精选ppt第99页

2.单核细胞系统：分化差（－）其他（+），

粗颗粒状。3.淋巴细胞系统：多数（－）少数（+），粗颗粒或块状。

4.红细胞系统：（－），病理情况可（+）。

5.巨核细胞系统：（+），颗粒状或块状。

6.其他细胞：浆细胞（－），巨噬细胞（+）100精选ppt第100页a粒细胞、b巨核细胞、c单核细胞、d幼红细胞101精选ppt第101页三、成果判断

1.粒细胞系统：

红色、弥散状。多种细胞阳性反应强弱不一样

2.淋巴细胞系统：

粗颗粒状、小块状、大块状红色。102精选ppt第102页1、+2、++3、+++4、++++5、－103精选ppt第103页

3.红细胞系统：

均匀红色或块状

4.单核细胞系统：

粗颗粒状

5.巨核细胞和血小板：

颗粒状、块状。104精选ppt第104页1.巨核细胞和血小板阳性105精选ppt第105页

1.帮助鉴别巨幼细胞性贫血和骨

髓增生异常综合征、红白血病:

前者（－），后二者（+）。四、临床意义106精选ppt第106页107精选ppt第107页急性淋巴细胞白血病PAS染色原始、幼稚淋巴细胞均阳性，呈粗颗粒状阳性108精选ppt第108页109急淋PAS阳性细胞109精选ppt第109页110PAS阳性幼红细胞110精选ppt第110页

2.帮助鉴别急性白血病细胞类型：

急淋：（+）呈粗颗粒状或块状。

急粒：（+）细颗粒状或均匀红色。

急单：（+）细颗粒状，均匀分布，有时胞质边缘颗粒较粗大。

111精选ppt第111页

3.其他细胞：

骨髓转移性腺癌细胞细胞呈强阳性

霍奇金淋巴瘤RS细胞多呈阴性或弱阳性

戈谢细胞呈强阳性尼曼-皮克细胞多呈阴性或弱阳性112精选ppt第112页CLLALL113精选ppt第113页

六、中性粒细胞碱性磷酸酶染色

（neutrophilicalkaline

phosphatase，NAP）114精选ppt第114页磷酸萘酚钠（基质中）中性粒细胞胞浆中NAP磷酸钠α-萘酚

重氮盐（坚牢蓝盐RR）＋紫黑色偶氮染料

（胞浆中）水解【原理】Kaplow偶氮偶联法115精选ppt第115页【成果判断】

胞浆中有紫黑色颗粒为阳性(+~++++）116精选ppt第116页【正常血细胞染色反应】中性成熟粒细胞阳性反应NAP主要存在于成熟中性粒细胞胞质中。严重化脓性感染时，晚幼阶段粒细胞也可见有阳性反应。2.其他细胞基本呈阴性反应

117精选ppt第117页118精选ppt第118页

NAP染色反应强度标准：

（－）：胞质中无颗粒；（＋）：胞质含少许颗粒，约占1/4；（＋＋）：胞质含中等量颗粒，约占1/2；（＋＋＋）

：胞质含较多颗粒，约占3/4；

（＋＋＋＋）：胞质充满颗粒，无空隙。119精选ppt第119页

2.NAP积分值计数100个成熟中性粒细胞（杆状和分叶）,分别统计其分级情况：

120精选ppt第120页(-)0分(+)1分(++)2分(+++)3分(++++)4分

阳性率所有阳性反应细胞之和

积分值多种阳性程度细胞分值之和121精选ppt第121页

NAP染色成果报告包括阳性率和积分值。阳性率：指计数100个中性成熟粒细胞，其阳性细胞数量即为阳性率；积分值：指计数100个中性成熟粒细胞，不一样阳性程度细胞数量乘以其阳性程度之和即为积分值，其计算公式为：积分值=(＋)数量×1+(＋＋)数量×2+(＋＋＋)数量×3+(＋＋＋＋)数量×4。

2.NAP染色成果报告：122精选ppt第122页例：4分占20%

4×20=80分3分占40%

3×40=120分2分占18%

2×18=36分1分占10%

1×10=10分0分占12%

0×12=0分阳性率88%积分=246分123精选ppt第123页124精选ppt第124页0级0胞浆呈原色，无颗粒。Ⅰ级+胞浆呈浅灰色，细小蓝黑色颗粒占胞浆面积25%～50%。

Ⅱ级++胞浆呈棕色片状沉淀，小到中等颗粒约占胞浆面积50%～75%。125精选ppt第125页Ⅲ级+++胞浆充满棕黑色沉淀，分布均匀，中到大颗粒占胞浆面积75%－100%。

Ⅳ级++++胞浆充满深黑色致密团块状沉淀，甚至遮盖胞核，中到大颗粒占胞浆面积l00%。

126精选ppt第126页127精选ppt第127页

3.参照范围：

中性粒细胞NAP阳性率：＜40%

NAP积分为：30~130分128精选ppt第128页【临床评价】（1）细菌性感染与病毒性感染

（尤其是化脓性感染）

显著增加无显著变化129精选ppt第129页

四、临床意义

1.生理性变化：应激状态、妊娠、新生儿等。

2.病理性变化：

(1)NAP

：细菌性感染、慢粒(加、急)、急

淋、慢淋、恶性淋巴瘤、转移癌、

骨纤、真红、再障、原发性血小

板增多症、使用糖皮质激素等。130精选ppt第130页

3.疾病鉴别：

(1)类白与慢粒:前者

后者

(2)慢粒慢性期与慢性中性粒细胞白血病：

前者

后者

(3)细菌性感染与病毒性感染/寄生虫感染：前者

后二者正常或

(2)NAP：慢粒(慢)、PNH、MDS、恶组等。131精选ppt第131页

(6)恶组与反应性组织细胞增多症：前者

后者常

(7)急性白血病类型：

急性髓细胞

急淋

(4)慢粒病情观测：

(5)再障与阵发性睡眠性血红蛋白尿：

前者

后者

132精选ppt第132页CML类白133精选ppt第133页(2）类白血病反应与慢性粒细胞白血病显著增加显著下降且常为零分，缓和时又上升到正常134精选ppt第134页五、应用评价NAP染色有多种检测办法，国际标准化委员会推荐Kaplow萘酚AS-BI磷酸钠法和Tomonaga萘酚AS-MX磷酸钠法。钙-钴法试剂成本低廉，操作繁琐，反应时间长，临床上逐渐被偶氮偶联法取代，阳性产物色泽鲜明、定位精确，尤其以萘酚AS-BI磷酸钠法最为广泛使用，利于评定NAP活性强度分级。常用重氮盐有坚牢蓝RR、坚牢蓝BB、坚牢紫酱等，不一样偶联有不一样敏捷度。

135精选ppt第135页七、酸性磷酸酶染色(acidphosphatase，ACP)一、原理1.Gomori硫化铅法136精选ppt第136页棕黑色pH5.0137精选ppt第137页

2.偶氮偶联法(常用)六偶氮付品红——棕红色沉淀磷酸萘酚AS-BI

萘酚AS-BI棕红色沉淀

ACPPh5.0重氮盐138精选ppt第138页139精选ppt第139页

3.抗酒石酸酸性磷酸酶染色（一组同工酶）两张相同标本涂片+两份基质液(加L-酒石酸，不加L-酒石酸)ACP染色耐L-酒石酸两份（+）不耐L-酒石酸不加L-酒石酸（+）加L-酒石酸（－）140精选ppt第140页

二、正常血细胞染色反应粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞、血小板、浆细胞、巨噬细胞均呈阳性反应。141精选ppt第141页

三、临床评价

1.诊断多毛细胞白血病多毛细胞白血病：（+），不被L-酒石酸抑制。慢淋和恶性淋巴瘤细胞:

（+），被L-酒石酸抑制。142精选ppt第142页多毛细胞白血病慢性淋巴细胞白血病143精选ppt第143页抗酒石酸酸性磷酸酶染色酸性磷酸酶染色多毛细胞白血病144精选ppt第144页多毛细胞白血病抗L-酒石酸ACP阳性145精选ppt第145页

2.鉴别戈谢(Gaucher)细胞和尼曼-匹

克(Niemann-Picks)细胞：

前者（+）后者（－）

3.鉴别T淋巴细胞和B淋巴细胞：

前者（+）后者（－）

146精选ppt第146页Gaucher’scell147精选ppt第147页八.细胞化学染色综合分析148精选ppt第148页四种常见急性白血病细胞化学染色成果项目M3M1/M2M5ALLPOX强阳性阳性/阴性弱阳性/阴性阴性