吡虫啉等4种农药对克氏原螯虾和中华绒螯蟹的急性毒性试验

吡虫啉等4种农药对克氏原螯虾和中华绒螯蟹的急性毒性试验

近年来，稻田综合栽培已成为一种新兴的高效养殖技术模式。其特点是水稻、虾、蟹和鱼类等水生生物的共同生态特性和生活特征的综合利用，形成了一种三维繁殖模式。1材料和方法1.1试验农药基本信息试验用中华绒螯蟹[体质量(9.65±1.82)g]和克氏原螯虾[体质量(1.96±0.74)g],均自南京市高淳区养殖户获得,暂养于有生物过滤水再循环系统(配备有冷却和加热功能,流速5L/min,光照时间14h)的水族箱中(每箱放养中华绒螯蟹30～40尾或克氏原螯虾80～100尾,水族箱体积为0.18m2种试验农药基本信息见表2。1.2药物质量浓度的确定采用急性毒性试验方法,选取规格一致、附肢完全、健康状况良好的克氏原螯虾和中华绒螯蟹用于预试验。结果显示,克氏原螯虾对吡虫啉和辛硫磷24h的无死亡质量浓度和全致死质量浓度区间分别约为1～70mg/L、0.001～0.030mg/L;中华绒螯蟹对吡虫啉和辛硫磷24h的无死亡质量浓度和全致死质量浓度区间分别为10～700mg/L、0.1～5.0mg/L;准备70cm×48cm×30cm的水族箱若干,根据预试验结果,按等对数间距设置药物质量浓度梯度,并设置1个空白对照组,每组设3个平行。每个质量浓度的配制药液放置试验动物20尾,雌雄各半。试验期间不间断充氧,每24h更换一次相同质量浓度新配的染毒溶液。试验中观察试验动物的活动状况,随时取出死亡个体,试验动物的死亡以镊子触碰无反应为准,试验周期为96h,期间不投喂,记录各质量浓度组试验动物在24、48、72、96h时的死亡数量。1.3试验数据的分析利用SPSS统计软件对试验数据进行线性回归统计分析,得出24、48、72、96h累计死亡率(经验公式:SC=96hLC2结果与分析2.1吡虫啉对克氏原螯虾的毒性作用放入吡虫啉溶液中的大部分试验虾并未有异常反应,随着时间的延长,部分试验虾开始聚集抱团,活力下降,静伏在水底,直至死亡。只有60mg/L质量浓度组的个别试验虾上下窜游,随后腹部向上,只有游泳足游动。死亡个体尾部蜷曲,体色发白,极少数个体体色发红。刚放入辛硫磷溶液中的试验虾游动快速,异常活跃,随后适应,随着时间的延长,试验虾的活力随之下降,排泄物增加,有部分活力较好的试验虾趴在活力较差的个体上,死亡个体腹部朝上,尾部卷曲,体色发白。不同质量浓度吡虫啉对克氏原螯虾的毒性作用见图1。当吡虫啉质量浓度≤1.865mg/L时,24h克氏原螯虾的活力与对照组无差异,无明显异常和死亡,24h后个别克氏原螯虾活动缓慢且失去平衡,死亡率逐渐升高;当吡虫啉质量浓度为30mg/L时,24h内克氏原螯虾的死亡数量达到半数,且剩余克氏原螯虾活力下降;当吡虫啉质量浓度为60mg/L时,克氏原螯虾在72h全数死亡。不同质量浓度辛硫磷胁迫下克氏原螯虾96h内的死亡数量和质量浓度—累计死亡率见图2。当辛硫磷质量浓度≤0.001563mg/L时,克氏原螯虾的活力在24h内均与对照组无差异;当辛硫磷质量浓度为0.0125mg/L时,24h内克氏原螯虾的死亡率为25%;当辛硫磷质量浓度为0.0250mg/L时,克氏原螯虾的死亡数急剧增加,且在48h全数死亡。2.2质量浓度吡虫啉对中华绒螯蟹的毒性作用放入吡虫啉溶液中的大部分试验蟹并未有异常反应;随着时间的延长,部分试验蟹整体出现抱团现象,向气石处聚集,且活动缓慢,静伏于水中;死亡个体肢体完整、外形无异常。刚放入辛硫磷溶液中的试验蟹反应强烈,来回快速游动,急于逃离试验环境;随着时间延长,反应减弱,沉于水底;死亡的中华绒螯蟹大部分足脱落,腹部向上,眼睛呈白色,体色也由暗转淡。不同质量浓度吡虫啉对中华绒螯蟹的毒性作用见图3。当吡虫啉质量浓度≤10mg/L时,中华绒螯蟹的活力与对照组无差异,仅在96h时出现个别死亡;当吡虫啉质量浓度≤20mg/L时,24h内中华绒螯蟹反应与对照组无明显差异,未见死亡,在48h时,个别中华绒螯蟹死亡;当吡虫啉质量浓度为80mg/L时,48h中华绒螯蟹的死亡率为50%,且持续上升。不同质量浓度辛硫磷胁迫下中华绒螯蟹96h内的死亡率见图4。当辛硫磷质量浓度为0.1mg/L时,48h内中华绒螯蟹无明显异常,有极个别活动缓慢,在72h时出现死亡现象,死亡个体肢体完整;当辛硫磷质量浓度≥0.2mg/L时,随着时间的增加,中华绒螯蟹的死亡率逐渐升高;当辛硫磷质量浓度≥2mg/L时,48h中华绒螯蟹的死亡率超过50%。2.32线性回归法计算采用线性回归法计算吡虫啉对克氏原螯虾在24、48、72、96h半致死质量浓度分别为35.949、26.193、12.320、3.547mg/L,安全质量浓度为0.354mg/L;辛硫磷对克氏原螯虾在24、48、72、96h半致死质量浓度分别为0.018、0.013、0.012、0.010mg/L,安全质量浓度为0.001mg/L(表3～4)。采用线性回归法计算吡虫啉对中华绒螯蟹在24、48、72、96h半致死质量浓度分别为432.252、280.366、211.901、171.831mg/L,安全质量浓度为17.183mg/L;辛硫磷对中华绒螯蟹在24、48、72、96h半致死质量浓度分别为3.051、2.326、1.817、1.294mg/L,安全质量浓度为0.129mg/L(表4、表5)。3讨论3.1解决稻田常用农药虾蟹的毒性效应稻田套养虾蟹作为一项水田经营新模式,变单一经营为综合经营、变平面生产为立体生产,充分利用本地资源优势,是发展生态农业的良好途径。解决稻田常用农药对虾蟹的毒性效应,对于指导稻田套养的合理用药具有重要的实践意义,因此科学评价不同药剂品种对水生生物的毒性,并划分风险性等级,可为药剂的安全合理使用提供科学指导。农药对克氏原螯虾和中华绒螯蟹的毒性等级划分参考《化学农药环境安全评价试验准则》3.2吡虫啉用量对中华绒螯蟹的安全性评价吡虫啉是一种硝基亚甲基类内吸性杀虫剂,主要作用于动物的烟酸乙酰酯酶受体,从而破坏动物的中枢神经正常传导,使昆虫神经麻痹后迅速死亡,具有广谱、高效等特点本试验结果表明,吡虫啉对中华绒螯蟹的毒性较小,因此在套养中华绒螯蟹的稻田中适量使用吡虫啉具有可行性,且不会造成中华绒螯蟹的死亡,而短期内克氏原螯虾幼虾在常规用药的环境中是不安全的。但是常规用药和毒性试验的操作方法上存在着差异,常规用药时为喷雾,其中一部分药液会落在稻叶上,水体中实际的药物剂量要低于配制剂量,随着时间的延长,其剂量会越来越低3.3辛硫磷对虾的安全性辛硫磷又名倍腈松、肟硫磷,是一种有机磷光谱杀虫制剂,有机磷农药通过抑制动物体内乙酰胆碱酯酶4克氏原螯虾的安全质量在本试验条件下,吡虫啉对克氏原螯虾的安全质量浓度为0.354mg/L,属于中毒、低中等风险等级;辛硫磷对克氏原螯虾的安全质