密蒙花化学成分的分离与鉴定

密蒙花化学成分的分离与鉴定

密蒙花是马钱科醉鱼科的一种植物密蒙花。1仪器、试剂和仪器X-4数字显示显微熔点测定仪(温度计未校正,北京泰克仪器有限公司);BrukerACF-300核磁共振仪(德国Bruker公司,内标为TMS);Agilent1100MSDTrap质谱仪(美国Agilent公司);RE52CS-1旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);ZF-Ⅰ型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂);优普超纯水系统(ULUP-Ⅳ-20T,南京超纯科技有限公司)。SephadexLH-20(50μm,瑞典AmershamBiosciences公司);YMC*GEL(12nmS-50μm,日本YMC公司);薄层色谱硅胶、柱色谱硅胶(100~200目、200~300目,青岛海洋化工厂);显色剂为1%香草醛-浓硫酸-乙醇溶液。所用试剂均为分析纯或色谱纯(南京化学试剂有限公司,国药集团化学试剂有限公司)。密蒙花药材购自安徽亳州药材市场,经本人鉴定,由中国药科大学秦民坚教授复核为马钱科植物密蒙花(BuddlejaofficinalisMaxim.)的干燥花蕾和花序,凭证标本存放于中国药科大学中药资源学系,标本编号No.BO20151016。2正丁醇部位浸膏色谱干燥的密蒙花花蕾和花序15kg,用体积分数95%乙醇80℃热回流提取3次,每次2h,合并提取液,减压浓缩,得总浸膏3.90kg。将总浸膏用水混悬后,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到石油醚部位575g,乙酸乙酯部位213g,正丁醇部位1302g。正丁醇部位浸膏经硅胶100~200目柱色谱,以二氯甲烷-甲醇=20∶1→0∶100梯度洗脱,得14个流分(Fr.1~Fr.14)。Fr.1和Fr.4经硅胶柱色谱和SephadexLH-20柱(三氯甲烷-甲醇=1∶1)反复柱色谱分离纯化分别得化合物1(31mg)和2(28mg)及化合物3(15mg)、4(27mg)和16(23mg);Fr.7、Fr.9和Fr.11经硅胶柱色谱、ODS(甲醇-水系统梯度洗脱)和SephadexLH-20柱(三氯甲烷-甲醇=1∶1)反复柱色谱分离纯化分别得化合物5(23mg)、6(16mg)和9(200mg),化合物12(280mg)、13(17mg)、14(21mg)和15(79mg)及化合物7(12mg)、8(45mg)、10(17mg)和11(26mg)。3黄酮类化合物化合物1:黄色粉末(甲醇),mp263~265℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:283[M-H]化合物2:黄色粉末(甲醇),mp345~347℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:269[M-H]化合物3:黄色粉末(甲醇),mp320~322℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:285[M-H]化合物4:黄色粉末(甲醇),mp254~256℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:469[M+Na]化合物5:黄色粉末(甲醇),mp226~228℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:431[M-H]化合物6:黄色粉末(甲醇),mp256~258℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:447[M-H]化合物7:黄色粉末(甲醇),mp236~238℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色,推测其为黄酮类化合物。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:459[M-H]化合物8:黄色粉末(甲醇),mp262~264℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:445[M-H]化合物9:淡黄色粉末(微溶于甲醇),mp265~267℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:593[M+H]化合物10:黄色粉末(甲醇),mp260~262℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:593[M-H]化合物11:黄色粉末(甲醇),mp180~182℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显黄色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:737[M-H]化合物12:淡黄色粉末(甲醇),mp145~147℃,紫外灯360nm下有蓝色荧光,香草醛-浓硫酸显粉色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:623[M-H]化合物13:红色粉末(甲醇),mp200~202℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显绿色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:675[M+Na]化合物14:暗红色粉末(甲醇),mp220~222℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显绿色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:837[M+Na]化合物15:暗红色粉末(甲醇),mp194~196℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸显绿色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:999[M+Na]化合物16:白色粉末(甲醇),mp178~180℃,紫外灯254nm下有暗斑,香草醛-浓硫酸不显色。ESI-MS给出准分子离子峰m/z:582[M-H]4密蒙花化合物组成密蒙花是传统的眼科用药,在诸多眼科方剂中均有涉及该药用植物。此外,密蒙花在民间还作为天然的食用染料植物,具有较好的开发前景。而目前对该药用植物的化学成分报道较少,药效物质基础不明确。本系统化学成分研究从密蒙花中分离并鉴定了16个化合物,其中11个黄酮类成分,1个苯乙醇苷类成分,3个番红花色素