反应速度为最大值的一半时的底物浓度课件

第八章酶通论第八章酶通论1酶

enzyme生命体内催化化学反应的物质：新陈代谢是生命的基础，构成生命代谢的物质和能量的变化，都是在酶的催化下进行——生命的活动伴随着酶的存在而进行。希腊语原意:

inyeast*细胞中大部分球蛋白为酶酶enzyme生命体内催化化学反应的物质：2八千年以前我国人民在开始利用酶公元前21世纪夏禹时代人们会酿酒1814公元前12世纪周代已能制作饴糖和酱2000多年前春秋战国时期用曲治疗消化不良疾病1810年JasephGaylussac发现酵母可将糖转化为酒精1833年Payen&Persoz从麦芽抽提液得到了ferment（酵素）,可使淀粉水解成可溶性糖，称之为diastase【即现在的amylase】1835-1837年Berzelius提出催化作用的概念

ferment起的是催化作用酶学研究史(1)八千年以前我国人民在开始利用酶酶学研究史(1)31857年Pasteur认为发酵酒精发酵是酵母细胞活动的结果只有活的酵母细胞才能进行发酵（而Liebig认为发酵是由溶解于酵母细胞中的酶引起）1857年Kuhne给酶一个统一名字：Enzyme1897年Buchner兄弟制备了不含酵母细胞的抽提液，并证明其亦能使糖发酵，说明发酵与细胞活动无关---发酵是酶作用的化学本质。(获1910年诺贝尔化学奖）1926年Sumner得到了Urease的结晶，证实其蛋白质性质1930-1936年Northrop和Kunitz证实酶是一种蛋白质(Sumner,Northrop和Kunitz获1949年诺贝尔化学奖)80年代初Cech和Altamn发现了具有催化功能的RNA—核酶,打破了酶是蛋白质的传统概念(Cech和Altamn获1989年诺贝尔化学奖)1986年Schultz和Lerner研制成抗体酶酶学研究史(2)1857年Pasteur认为发酵酒精发酵是酵母细胞活动的4（一）酶和一般催化剂的比较

具有共同性：能加快化学反应

酶本身在反应前后不发生变化（一）酶和一般催化剂的比较

具有共同性：能加快化学反应

酶5（二）酶作为生物催化剂的特点1、酶易失活使蛋白质等生物大分子变性因素可引起酶的失活2、酶具有高催化效率（以消化食物为例）酶的转换数（kcat)：表示酶的催化效率，指一定条件下每秒每个酶分子转换底物的分子数，或每秒每微摩尔酶分子转换底物的微摩尔数。（大多数：1—104）3、酶催化反应具有高度专一性4、酶的活性易受调节和控制（二）酶作为生物催化剂的特点1、酶易失活6二、酶的化学本质及组成（二）酶的化学组成（仅就蛋白酶）（1）单纯蛋白（2）缀合蛋白：全酶=脱辅酶（酶蛋白）+辅因子

（一）酶的化学本质除具有催化活性的RNA酶，其它都是蛋白质；近来有报道有DNA亦具有催化作用。二、酶的化学本质及组成（二）酶的化学组成（仅就蛋白酶）（一）7酶的化学本质及组成辅基，prostheticgroup辅酶，co-enzyme共价结合非共价结合Cofactor辅因子酶蛋白与底物结合，决定酶催化的专一性辅酶在酶催化中起传递电子、原子和某些化学基团作用酶的化学本质及组成辅基，prostheticgroup辅8（三）单体酶、寡聚酶、多酶复合体根据肽链或亚基构成：1、单体酶：一条多肽链构成2、寡聚酶：两个或两个以上亚基组成3、多酶复合体：几种酶靠非共价键彼此嵌合形成所有相关反应依次连接，有得于一系列反应的连续进行（三）单体酶、寡聚酶、多酶复合体根据肽链或亚基构成：9三、酶的命名及分类(一）习惯命名法（1961年以前）:1、根据其催化底物来命名：如淀粉酶2、根据所催化反应的性质来命名：如脱氢酶3、结合上述两个原则来命名：如琥珀酸脱氢酶4、有时在这些命名基础上加上酶的来源或其它特点。三、酶的命名及分类(一）习惯命名法（1961年以前）:10（二）国际系统命名法系统名称包括底物名称、构型、反应性质，最后加一个酶字。例如：习惯名称:谷丙转氨酶系统名称:丙氨酸：

-酮戊二酸氨基转移酶酶催化的反应:谷氨酸+丙酮酸

-酮戊二酸+丙氨酸（二）国际系统命名法系统名称包括底物名称、构型、反应性质，最11编号例如：EC1.2.31：表示氧化还原酶EC（EnzymeCommision)号的第一个数字1.oxidoreductase氧化还原酶类2.transferase转移酶类3.hydrolase水解酶类4.lyase裂合酶类5.isomerase异构酶类6.ligase/synthetase连接酶（合成酶）类（三）国际系统分类法及酶的编号编号例如：EC1.2.31：表示氧化还原酶（三）国际系12（四）六大酶的特征和举例氧化-还原酶催化氧化-还原反应。主要包括（1）脱氢酶类（2）氧化酶类（加氧反应）如：乳酸(Lactate)脱氢酶催化乳酸的脱氢反应。(1)氧化还原酶Oxidoreductase（四）六大酶的特征和举例氧化-还原酶催化氧化-还原反应。(113转移酶催化基团转移反应，即将一个底物分子的基团或原子转移到另一个底物的分子上。

例如，谷丙转氨酶催化的氨基转移反应。(2)转移酶Transferase转移酶催化基团转移反应，即将一个底物分子的基团或原子转移到另14水解酶催化底物的加水分解反应。主要包括淀粉酶、蛋白酶、核酸酶及脂酶等。例如，脂肪酶(Lipase)催化的脂的水解反应：(3)水解酶hydrolase水解酶催化底物的加水分解反应。(3)水解酶hydrol15裂合酶催化从底物分子中移去一个基团或原子形成双键的反应及其逆反应。主要包括醛缩酶、水化酶及脱氨酶等。例如，延胡索酸水合酶催化的反应。(4)裂合酶Lyase裂合酶催化从底物分子中移去一个基团或原子形成双键的反应及其逆16异构酶催化各种同分异构体的相互转化，即底物分子内基团或原子的重排过程。

例如，6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。(5)异构酶Isomerase异构酶催化各种同分异构体的相互转化，即底物分子内基团或原子的17连接酶，又称为合成酶，能够催化C-C、C-O、C-N以及C-S键的形成反应。这类反应必须与ATP分解反应相互偶联。A+B+ATP+H-O-H===A

B+ADP+Pi

例如，丙酮酸羧化酶催化的反应。丙酮酸+CO2

草酰乙酸(6)连接酶LigaseorSynthetase连接酶，又称为合成酶，能够催化C-C、C-O、C-N以及C18四、酶的专一性1、结构专一性（1）绝对专一性：只作用于一种底物（2）相对专一性：基团专一性；键专一性2、立体异构专一性（1）旋光异构专一性：L-型，D-型（2）几何异构专一性：顺反式四、酶的专一性1、结构专一性19*几种常见蛋白酶的专一性1、羧肽酶2、氨肽酶3、胃蛋白酶：—芳香族或疏水AA的羧基或氨基形成的肽键4、胰凝乳蛋白酶：——芳香AA（或较大非极性侧链AA）-CO-

-5、弹性蛋白酶：——Ala(Gly及短链脂肪族AA）-CO-

-6、胰蛋白酶：——Lys(Arg)-CO-

-7、糜蛋白酶：——Phe(Trp或Tyr)-CO-

-*几种常见蛋白酶的专一性1、羧肽酶20（1）锁钥学说：认为整个酶分子的天然构象是具有刚性结构的，酶表面具有特定的形状。酶与底物的结合如同一把钥匙对一把锁一样(二)酶作用专一性的机制

（1）锁钥学说：认为整个酶分子的天然构象是具有刚性结构的，酶21（2）诱导契合学说该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定形状，而只是由于底物的诱导才形成了互补形状.（2）诱导契合学说该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定22五、酶的活力测定和分离纯化（一）酶活力测定1、酶活力：是指催化某一化学反应的能力，可用在一定条件下所催化的某一化学反应的反应速率表示。通常用单位时间内产物生成量表示。一般用初速率测定酶的活力，因为此时反应速度与酶量呈线性关系。五、酶的活力测定和分离纯化（一）酶活力测定232、酶活力单位规定：（U)酶活力大小即酶含量多少，用酶活力单位表示，即酶单位（U）。酶单位定义：一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需酶量。酶含量用U/g或U/ml酶制剂表示。（1）国际单位（IU）：25℃下，每分钟催化1mol底物转化为产物所需酶量为一个活力单位。1IU=1mol/min（2）Kat单位（1972年国际酶学委员会规定）：每秒催化1mol底物转化为产物所需酶量。1Kat=60×106IU不同的酶在实际催化中其活力有不同的规定。2、酶活力单位规定：（U)24（二）酶的分离和纯化*分离纯化遵守的重要原则：1、低温2、防巯基氧化3、防金属离子衡量分离纯化效果用如下一些指标：酶的分离纯化指标：（1）总活力=活力单位数/（mL酶液）

×总体积（mL)（2）比活力=总活力（U）/总蛋白（mg）（3）纯化倍数=每次比活力/第一次比活力（4）回收率=每次总活力/第一次总活力（二）酶的分离和纯化*分离纯化遵守的重要原则：25酶的活力单位:1Kat定义为mol/sec的酶酶的分离纯化过程中一定要随时追踪酶的活性比活:specificactivity酶单位数(U)/mg蛋白质酶的活力单位:酶的分离纯化过程中一定要随时追踪酶的活性比活:26六、核酶（ribozyme)1、发现：1980s,Cech和Altman各自独立发现RNA具有生物催化功能。共获1989年诺贝尔化学奖。2、定义：具有催化功能的RNA分子。*近来发现某些DNA分子也具有催化活性，酶的概念进一扩展。六、核酶（ribozyme)1、发现：1980s,Cech27七、抗体酶1、发现：1986年Schultz和Lerner两个实验室同时在美国Science上发表论文，报道成功得到具有酶催化活性的抗体。2、定义：具有催化功能的抗体。七、抗体酶1、发现：1986年Schultz和Lerner两28八、酶工程简介1、定义：指酶的生产、纯化、固定化技术、酶分子结构的修饰及在工农医和理论研究方面的应用。2、化学酶工程（初级酶工程）（1）天然酶（2）化学修饰酶：通过对酶分子的化学修饰改善酶的性能。（3）固定化酶：用物化方法处理酶，使之不溶于水，但仍具酶活性。（4）人工模拟酶：用化学方法合成人工酶催化剂。八、酶工程简介1、定义：指酶的生产、纯化、固定化技术、酶分子29酶工程简介3、生物工程酶（高级酶工程）：是酶学和DNA重组技术结合的产物。（1）克隆酶：用基因工程技术大量生产的酶。（2）突变酶：进行遗传修饰。（3）设计新酶基因，合成自然界不曾有

的酶。酶工程简介3、生物工程酶（高级酶工程）：是酶学30第九章酶促反应动力学1、概念：酶促反应动力学是研究酶促反应的速率及影响此速率的各因素的科学。2、影响因素：（1）底物浓度（2）抑制剂：构成对酶的抑制作用（3）温度（4）pH值（5）激活剂第九章酶促反应动力学1、概念：酶促反应动力学是研究酶促反31在低底物浓度时,反应速度与底物浓度成正比，表现为一级反应特征。随着底物浓度，反应速率不再按正比升高，反应表现为混合级反应。当底物浓度达到一定值，几乎所有的酶都与底物结合后，反应速度达到最大值（Vmax），此时再增加底物浓度，反应速度不再增加，表现为零级反应。一、底物浓度对酶促反应速度的影响酶催化的反应速率变化现象在低底物浓度时,反应速度与底物浓度成正比，表现为一级反应特32（一）中间络合物学说根据上述反应现象，Henri和Wurtz提出酶--底物中中间复合物学说：

在酶催化的反应中，第一步是酶与底物形成酶－底物中间复合物。当底物分子在酶作用下发生化学变化后，中间复合物再分解成产物和酶。E+S====E-S

P+E

许多实验事实（P355-356)证明了E－S复合物的存在。E－S复合物形成的速率与酶和底物的性质有关。（一）中间络合物学说33根据中间复合物学说假设E+SES的平衡迅速建立（平衡态）反应初速由最高速度与底物浓度决定

v=Vmaxf([S])y=f(x)

v=Vmax/(1+Ks/[S])Ks为ES解离常数

或

v=（米氏方程）1、Michaelis-Menten方程(1913年)Vmax[S]Ks+[S]根据实验数据推导S+EESE+P（二）酶促反应的动力学方程根据34稳态理论Briggs&Haldane提出稳态理论，对米氏方程修正：E+SESP+E反应分上述两步进行，均可逆；反应进行一段进间后，复合物ES生成速率与分解速率相等，浓度保持不变，这种反应状态称为稳态。k1k2k3k4稳态理论Briggs&Haldane提出稳态理论，对米氏35酶催化的反应中各成份的变化S+EESE+PS:substanceP:productE:enzyme发最初的一段时间虚线之间为稳态酶催化的反应中各成份的变化S+EES36Briggs&Haldane提出稳态理论，对米氏方程修正：E+SESP+Ek1([E]-[ES])[S]=k2[ES]+k3[ES]k2+k3([E]-[ES])[S]k1[ES][ES]=[E][S]/(Km+[S]),Km=(k2+k3)/k1

因为

v=k3[ES],

而Vmax=k3[E]所以v=Vmax[S]/(Km+[S])Michaelis-Menten方程(1925年)k1k2k3k4=*反应初速度阶段，产物浓度很低，K4这一步忽略不计。Briggs&Haldane提出稳态理论，对米氏方程修正37米氏方程曲线米氏方程曲线38米氏方程Km即为米氏常数，Vmax为最大反应速度当反应速度等于最大速度一半时,即V=1/2Vmax,Km=[S]米氏常数物理意义：反应速度为最大值的一半时的底物浓度。因此,米氏常数的单位为mol/L。米氏方程Km即为米氏常数，当反应速度等于最大速度一半时,即392、动力学参数的意义（1）米氏常数的意义A、Km是酶的一个重要的特征物理常数：Km大小只与酶性质有关，与酶浓度无关。Km随测定底物、反应温度、pH及离子强度而变化。B、

Km可判断酶的专一性和天然底物1/Km值近似表示酶与底物之间的亲和程度：1/Km值大表示亲和程度大;1/Km值小表示亲和程度低。（条件：k3<<k2）2、动力学参数的意义（1）米氏常数的意义40（2）Vmax和k3(kcat)的意义一定酶浓度下，酶对特定底物的Vmax是一个常数，不同底物及其它条件也影响其数值。K3表示当酶被底物饱和时每秒每个酶分子转换底物的分子数，又称转换数，通常称催化常数（kcat),其值越大，表明催化效率越高。Kcat/Km值：可以比较不同酶或同一种酶催化不同底物的催化效率。（2）Vmax和k3(kcat)的意义41Lineweaver-Burkplot(双倒数作图)

1/v

=Km/Vmax

×1/[S]+1/Vmax

3、利用作图法测定Km和VmaxLineweaver-Burkplot(双倒数作图)1/42反应速度为最大值的一半时的底物浓度课件43反应速度为最大值的一半时的底物浓度课件44（三）（多）双底物的酶促反应动力学1、序列反应：底物的结合和产物的释放有一定的顺序，产物不能在底物完全结合前释放。（1）有序反应：参与反应的两底物有序与酶结合进行反应。（2）随机反应：参与反应的两底物随机与酶结合进行反应。2、乒乓反应上述反应机制见364-365页图示。（三）（多）双底物的酶促反应动力学1、序列反应：底物的结合和45二、酶的抑制作用几个概念（P368）：1、失活作用；酶已变性2、抑制作用：酶未变性3、抑制剂4、变性剂（一）抑制程度表示方法：P368二、酶的抑制作用几个概念（P368）：46（二）抑制作用的类型1、不可逆抑制抑制剂与酶反应中心的活性基团以共价形式结合，引起酶的永久性失活。如有机磷毒剂二异丙基氟磷酸酯。不能通过透析、超滤等物理方法去除抑制剂而恢复酶的活性。

（二）抑制作用的类型1、不可逆抑制472、可逆抑制抑制剂与酶蛋白以非共价方式结合，引起酶活性暂时性丧失。抑制剂可以通过透析等方法被除去，并且能部分或全部恢复酶的活性。根椐抑制剂与底物的关系，又可以分为三类。2、可逆抑制48(1)竞争性抑制某些抑制剂的化学结构与底物相似，因而能与底物竞争与酶活性中心结合。当抑制剂与活性中心结合后，底物被排斥在反应中心之外，其结果是酶促反应被抑制了。竞争性抑制通常可以通过增大底物浓度，即提高底物的竞争能力来消除。(1)竞争性抑制某些抑制剂的化学结构与底物相似，因而能与底49竞争性抑制竞争性抑制50(2)非竞争性抑制酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构象变化，并导至酶活性下降。由于这类物质并不是与底物竞争与活性中心的结合，所以称为非竞争性抑制剂。如某些金属离子（Cu2+、Ag+、Hg2+），通常能与酶分子的调控部位中的-SH基团作用，改变酶的空间构象，引起非竞争性抑制。(2)非竞争性抑制酶可同时与底物及抑制剂结合，引起酶分子构51非竞争性抑制非竞争性抑制52(3)反竞争性抑制酶只有与底物结合后，才能与抑制剂结合。反竞争性抑制作用常见于多底物反应中，而在单底物反应中少见。(3)反竞争性抑制酶只有与底物结合后，才能与抑制剂结合。53竞争性抑制(Competitiveinhibition):E+SESE+P+IKiEI反竞争性抑制(Uncompetitiveinhibition):E+SESE+P+IKiESI

酶反应的三种不同抑制Ki=[E]*[I]/[EI],Eo=E+EI+ESEo=E+ESI+ES竞争性抑制(Competitiveinhibition):54非竞争抑制(Noncompetitiveinhibition):E+SESE+P+IKi

+IKiEI

ESI

非竞争抑制(Noncompetitiveinhibitio55不同类型抑制作用的米氏方程不同类型抑制作用的米氏方程56I竞争性抑制反竞争性抑制非竞争性抑制I竞争性抑制反竞争性抑制非竞争性抑制57（五）一些重要的酶的抑制剂1、不可逆抑制剂（1）非专一性不可逆抑制剂：作用于酶的一类或几类基团，作用后引起酶失活。（2）专一性不可逆抑制剂作用于某一种酶活必部位的必需基团，作用后引起酶失活。2、可逆抑制剂最重要和最常见的是竞争性抑制剂。（五）一些重要的酶的抑制剂1、不可逆抑制剂58非专一性不可逆抑制剂（1）有机磷化合物：能抑制某些蛋白酶及酯酶活力，与酶分子活性部位的丝氨酸共价结合，抑制胆碱酯酶活力。常见：DFP、敌敌畏、敌百虫、对硫磷等。（2）有机汞、有机砷化合物：与酶分子中半胱氨酸残基结合，抑制含巯基的酶。（3）重金属盐（4）烷化试剂：含活泼的卤素原子与酶作用。（5）氰化物、硫化物和CO：能与酶中金属离子形成较为稳定的化合物，抑制酶活性。（6）青霉素；与糖肽转肽酶活性部位丝氨酸羟基结合，使酶失活。非专一性不可逆抑制剂（1）有机磷化合物：能抑制某些蛋白酶及酯59专一性不可逆抑制剂（1）Ks型不可逆抑制剂：具有底物类似的结构，可和酶结合，同时带的一个活泼的化学基团，能与酶分子中必需基团反应进行化学修饰，抑制酶活性。（2）kcat型不可逆抑制剂：不但具有天然底物的类似结构，且本身是酶的底物，能与酶结合发生类似于底物的变化，还有一个潜伏反应基团，当酶对它进行催化时，该反应基团暴露，作用于酶的必需基团或酶的辅基，使酶不可逆失活，又称为自杀性底物。专一性不可逆抑制剂（1）Ks型不可逆抑制剂：具有底物类似的结60可逆抑制剂最常见的是竞争性抑制剂。（1）对氨基苯磺酰胺：是对氨基苯甲酸的竞争性类似物。抑制二氢叶酸合成酶的对对氨基苯甲酸的催化合成二氢叶酸的活性。（2）过渡态底物类似物：与过渡态底物相似，能障小，与酶结合容易。其与酶结合能力远大于底物与酶的结合。从而起抑制作用。可逆抑制剂最常见的是竞争性抑制剂。61三、温度的影响一方面是温度升高,酶促反应速度加快。另一方面,温度升高,酶的高级结构将发生变化或变性，导致酶活性降低甚至丧失。因此大多数酶都有一个最适温度。在最适温度条件下,反应速度最大。最适温度不是酶的特征性常数，随多种因素互会改变。P379三、温度的影响一方面是温度升高,酶促反应速度加快。62四、pH的影响在一定的pH下,酶具有最大的催化活性,通常称此pH为最适pH。pH影响酶活力的原因：（1）构象改变（2）解离状态：酶的解离，底物解离四、pH的影响在一定的pH下,酶具有最大的催化活性,63如何解释酶活性与pH的变化关系，假如其最大活性在pH=4或pH=11时，酶活性可能涉及那些氨基酸侧链？

解答：(1)过酸、过碱影响酶蛋白的构象，甚至使酶变性失活。(2)pH改变不剧烈时，影响底物分子的解离状态和酶分子的解离状态，从而影响酶对底物的结合与催化。(3)pH影响酶分子中另一些基团的解离，这些基团的解离状态与酶的专一性及酶分子的活性中心构象有关。如果酶的最大活性在pH=4时，可能涉及酸性氨基酸：天冬氨酸、谷氨酸；如果酶的最大活性在pH=11时，可能涉及碱性氨基酸：赖氨酸、组氨酸和精氨酸。

如何解释酶活性与pH的变化关系，假如其最大活性在pH=4或p64五、激活剂对酶的影响凡是能够提高酶活性的物质都称为酶的激活剂。大部分是无机离子和小分子有机化合物。如唾液淀粉酶的激活剂是：Cl-五、激活剂对酶的影响凡是能够提高酶活性的物质都称为酶的激活剂65习题Kcat酶工程固定化酶中间产物学说金属酶比活性

全酶与蛋白酶

多酶体系

辅基

诱导契合学说乳酸脱氢酶经过透析后，其活性大大降低或消失，这是因为：A亚基解聚B酶蛋白变性C失去辅酶D缺乏底物与酶结合所需要的能量E以上都不对下列对酶的叙述，哪一项是正确的？A所有的蛋白质都是酶B所有的酶均以有机化合物作为底物C所有的酶均需特异的辅助因子D所有的酶对其底物都具绝对特异性E上述都不对习题Kcat酶工程固定化酶中间产物学说金属酶66习题测酶活性时，反应速度对底物应呈：A一级反应B混合级反应C零级反应D二级反应

温度对酶活性的影响是：A.低温可使酶失活B.催化的反应速度随温度的升高而升高C.最适温度是酶的特征性常数D.最适温度随反应的时间而有所变化E.以上都不对关于研究酶反应速度应以初速度为准的原因中，哪项不对？A.反应速度随时间的延长而下降，B.产物浓度的增加对反应速度呈负反馈作用，C.底物浓度与反应速度成正比，D.温度和pH有可能引起部分酶失活，E.测定初速度比较简单方便习题测酶活性时，反应速度对底物应呈：67习题*非竞争抑制作用是：A.抑制剂与酶活性中心外的部位结合B.酶与抑制剂结合后，还可与底物结合C.酶与底物结合后，还可与抑制剂结合D.酶－底物－抑制剂复合物不能进一步释放产物E.以上都不对酶促反应达最大速度后，增加底物浓度不能加快反应速度的原因是：A.全部酶与底物结合成E-S复合体B.过量底物对酶有负反馈抑制C.过量底物与激活剂结合影响底物与酶的结合D.改变了化学反应的平衡点E.以上都不是底物浓度饱和后，再增加底物浓度，则A.反应速度随底物浓度的增加而增加B.随着底物浓度的增加酶逐渐失活C.酶的结合部位被更多的底物占据D.再增加底物的浓度反应速度不再增加E.形成酶—底物复合体增加习题*非竞争抑制作用是：68习题有机磷农药

A.对酶有可逆性抑制作用B.可与酶活性中心上组氨酸的咪唑基结合，使酶失活C.可与酶活性中心上半胱氨酸的巯基结合使，酶失活D.能抑制胆碱乙酰化酶E.能抑制胆碱酯酶非竞争性抑制剂的存在，使酶促反应动力学改变为：AV不变，km变小BV不变，km变大CV变小，km变大DV变小，km不变EV变小，km变小FV变大，km变大

含唾液淀粉酶的唾液经透析后，水解淀粉的能力显著下降，其原因：A、酶变性失活B、失去Cl—C、失去Ca2+D、失去辅酶pH对酶促反应速度的影响，下列哪能项是正确的：ApH对酶促反应速度影响不大B不同的酶有其不同的最适pHC酶的最适pH都在中性即pH=7左右D酶的活性随pH的提高而增大EpH对酶促反应速度影响最大的主要在于影响酶的等电点习题有机磷农药69