五种抗鸽球虫药物的筛选试验

五种抗鸽球虫药物的筛选试验

鸽子是鸽子最重要的疾病之一。主要症状包括腹泻、食欲减少、瘦体重、生长发育缓慢。如果严重，可能会导致大量死亡。该病主要危害幼鸽,一旦暴发球虫病死亡率很高,成年鸽一般为亚临床感染,体重出现下降。据报道,美国华盛顿地区曾暴发过鸽球虫病,鸽子在1-2d内全部死亡。国内也有因鸽球虫病引起鸽子死亡的报道。目前,尚没有专用于鸽的抗球虫药,防治鸽球虫病的药物均为抗鸡球虫药。为增加抗鸽球虫病的药物种类,我们选择常用的5种抗鸡球虫药,采用人工感染的方法进行鸽球虫病防治试验,评价其抗鸽球虫病的防治效果,为养鸽户提供更多可选择的抗球虫药物。1材料和方法1.1培养培养学生子从上海某养鸽场采集粪便,实验室分离球虫,孢子化后接种乳鸽传代增殖,收集培养孢子化后,4℃保存备用。经对球虫种类初步鉴定,所收集到的球虫卵囊为混合虫种,其中拉氏艾美耳球虫(Eimerialabbeana)约70%、鸽艾美耳球虫(E.columbae)约30%。1.2测试鸽子2月龄左右肉鸽,饲养于经高温消毒的、无球虫的笼子中,饲喂玉米,自由饮水。感染前连续检查3d粪便,确保无球虫感染。1.3克球、卡尔、托曲珠利选择5种常用的抗鸡球虫药物。地克珠利:山东达易科技开发有限公司烟台药业分公司,商品名“定克球”,批号20090403,使用有效浓度1×10-6。磺胺喹恶啉钠:天津生机集团股份有限公司,商品名“克球”,批号20081102,使用有效浓度300×10-6。磺胺氯吡嗪钠:施瑞客(天津)生物技术有限公司,商品名“球可伏”,批号20090401,使用有效浓度300×10-6。托曲珠利:四川拜耳动物保健品有限公司,商品名“百球清”,批号2009032501,使用有效浓度25×10-6。白头翁散:河南鼎盛生物医药有限公司,商品名“球必妥”,批号20090401,使用有效浓度500×10-6。1.4平均局部感染设5个感染用药组、1个感染不用药组、1个不感染不用药组,每组5只鸽,每批35只鸽。重复3次,共计105只。在确定鸽子无球虫感染后,随机分组并调整各组体重基本相同,用药组感染前2d开始通过饮水给药,至感染后5d。各感染组每只鸽经嗉囊接种孢子化卵囊15×104个。感染后每天观察鸽子的临床症状。在感染后第0、3、6、9、12、15天,收集粪便,参照《动物球虫病诊断技术》国家标准进行定量检查,检测各组每克粪便卵囊数(OPG)。感染后15d,试验结束。1.5测试指标1.5.1临床症状观察对死亡率、鸽的精神、食欲、饮水、粪便等常规情况观察。1.5.2卵囊相对减少率卵囊相对减少率=(感染对照组OPG-用药组OPG)/感染对照组OPG×100。2结果2.1虎的一般情况试验期间,鸽子没有发生因球虫感染或药物因素发生的死亡。鸽的精神、食欲、饮水比较正常。感染对照组的粪便在感染后第6-9天略微变稀,第9天后逐渐正常,其余各组都排出青白色正常粪便。2.2克珠利和抗鲍球虫的感染情况第1批试验结果见表1。从表1可知,感染不用药组从感染后第3-15天的粪便中均有卵囊排出,排卵囊高峰出现在接种后第9天。所有药物均对鸽球虫的繁殖具有明显抑制作用,均是在感染后第6天开始有卵囊排出,而在感染后第15天均未发现卵囊。其中磺胺氯吡嗪钠和磺胺喹恶啉钠的效果最好,仅在感染后第6天发现极少量的卵囊,相对卵囊减少率分别为99.9%和99.8%。其次为白头翁散和托曲珠利,相对卵囊减少率分为为95.6%和93.1%。地克珠利的效果一般,相对卵囊减少率仅为67.4%。不感染不用组的粪便在整个试验中未发现有卵囊。第2批试验结果见表2。从表2可知,磺胺氯吡嗪钠组在感染后第3-15天未发现有卵囊,完全抑制了球虫的繁殖。磺胺喹恶啉钠组仅在接种后第9天发现有少量卵囊排出,卵囊减少率为99.7%;白头翁散组仅在感染后第6天和第9天有少量卵囊排出,卵囊减少率为99.8%,二者几乎完全抑制球虫的繁殖。托曲珠利在感染后第6、9、12天有少量排出,卵囊减少率为92.7%。地克珠利组效果较差,感染后第3-15天均有卵囊排出,卵囊减少率仅为79.6%。第3批试验结果见表3。从表3可知,磺胺氯吡嗪钠组仅在感染后第6天有极少量排出,磺胺喹恶啉钠组仅在感染后第6、9天有少量卵囊排出,2组的卵囊减少率分别为99.9%和99.8%。白头翁散在感染后第6、9、12天有卵囊排出,卵囊减少率为91.0%。托曲珠利和地克珠利在感染后第3-12天均有卵囊排出,卵囊减少率分别为88.4%和77.9%。综合以上结果可知,磺胺喹恶啉钠、磺胺氯吡嗪钠的抗鸽球虫效果最好,3批试验的平均相对卵囊减少率分别为99.9%(99.9%-100%)和99.5%(98.8%-99.8%),几乎杀死所有虫体。其次为白头翁散和托曲珠利,平均相对卵囊减少率分别为96.7%(91.0%-99.8%)和92.0%(88.4%-93.1%)。地克珠利的效果一般,平均相对卵囊减少率仅为75.6%(67.3%-79.6%)(见表4)。3磺胺类药物的联合应用鸽的饲养一般以饲喂玉米、黄豆、大麦等粮食原料为主,故一般药物很难混入饲料,因此,选择防治鸽球虫病的药物一般以饮水剂为宜,利于现场使用。本次试验所用抗球虫药物均为饮水剂,所用剂量均是参照鸡的使用推荐量,在试验中未发现因药物而产生的中毒现象,说明药物对鸽子是安全的。在3次试验中,均设立了不感染不用药组,在整个试验过程中均未发现有球虫,说明试验中未发生球虫交叉感染。本研究结果显示,磺胺氯吡嗪钠、磺胺喹恶啉钠的抗鸽球虫效果最好,其次为白头翁散和托曲珠利,而地克珠利效果一般。磺胺喹恶啉钠、磺胺氯吡嗪钠为磺胺类药物,该类药物不仅能治疗球虫病,而且有杀菌作用,因此该类药物是治疗球虫病首选药物之一。已报道的用于鸽球虫病防治的磺胺类药物有磺胺二甲嘧啶、磺胺喹恶啉、三甲氧苄胺嘧啶、磺胺氯吡嗪等。在本研究中,磺胺氯吡嗪和磺胺喹恶啉均几乎完全抑制了球虫的繁殖,表明该两种药对鸽球虫具有高效作用,值得在鸽球虫病的临床防治中推广应用。但是该类药物有较强的毒副作用,特别是对雏禽,易导致出血性综合征,与抗菌增效剂联合应用可使药效显著提高,降低毒性反应。地克珠利和托曲珠利均为三嗪类药物,具有广谱的抗球虫活性。在本次试验所选用的5种药物中,地克珠利的抗鸽球虫效果最差,平均卵囊减少率仅为75.6%;而托曲珠利的卵囊减少率为92.0%,效果明显好于地克珠利。不同于已有研究,宁长申等、张晓根等在治疗肉鸽球虫病中,以0.5mg/kg剂量地克珠利饮水连用5天,球虫卵囊转阴率达33.3%-66.7%,平均卵囊减少率高达92.9%-99.5%,而25mg/kg剂量百球清组的卵囊转阴率为16.7%-60%,卵囊减少率为35%-91.4%,效果差于地克珠利。造成这种差异的原因可能是由于用药方法不同:本试验为预防性用药,而宁长申、张晓根等为治疗性用药。妥曲珠利抗球虫机制是干扰球虫细胞核的分裂和线粒体的作用,从而影响虫体的呼吸、代谢功能,对球虫在细胞内的所有发育阶段均有杀灭作用。Vercruysse研究发现,5、10和15mg/kg妥曲珠利均能有效抑制卵囊的繁殖,卵囊减少量与剂量呈正相关,完全抑制鸽球虫卵囊排出的最小剂量为20mg/kg·d。本研究所用剂量为25mg/kg,在感染后第15天均未发现有球虫排出,与已有研究一致。白头翁散是一个中药制剂,具有清热解毒、凉血止痢之功效,对细菌、阿米巴等具有明显的抑制作用。球虫主要在肠道上皮细胞内大量增殖,破坏了肠黏膜的完整性,引起肠黏膜发