花椒挥发油对小鼠急性毒性试验

花椒挥发油对小鼠急性毒性试验

青椒是一门古老的蔬菜科，是一种古老的植物青椒科。etzocc或青椒（zalyzerinzhime）干燥成熟的果皮分为秦青椒、川椒、岩椒等几种类型，食物和药物的历史都很古老。花椒味辛,性温,小毒。经文献考证花椒具有温中止痛、镇静、抗炎、局部麻醉、杀虫止痒抗肿瘤等药理活性。花椒中主要成分为其挥发油成分,油中主要含有异茴香醚(estragol)和牻牛儿醇(geraniol)等其具有抗菌作用。花椒主产四川、陕西、河北,近年来陕西产“大红袍”花椒亦享誉中外,大有取代“贡椒”之风。本文就韩城“大红袍”进行试验。1材料表面1.1挥发油的提取取花椒打粗粉置于圆底烧瓶中加水浸泡30min,采用水蒸气蒸馏法(挥发油提取器)提取6h,收集挥发油,挥发油呈淡黄色液体置于棕色容量瓶中密封保存至冰箱冷藏。溶媒为鲁花牌花生油为溶剂稀释后给药。1.2性别间的两性二级昆明种小鼠,月龄:6～8周龄体质量:18～22g性别:雌、雄各半;第四军医大学实验动物研究中心提供,生产合格证号为scxk(军)字第2002-005号。2方法和结果2.1小鼠急性毒性反应后n小鼠灌胃给予花椒挥发油,经预试找其最大致死剂量为5.28ml/kg,最小致死剂量为1.25ml/kg后,以5.28ml/kg为初始剂量,按1:0.75比例依次设置6组,分别给小鼠按表1剂量1次灌胃0.8ml,连续观察14d,每日记录小鼠毒性反应及死亡数,用改良寇氏法计算半数致死剂量(LD50)。从表1中可知i=lgd6-lgd5=0.1249Xm=0.7226LD50=lg-1[0.7226-0.1249(2.8-0.5)]=2.72ml/kg(花椒挥发油的密度为1ml=0.83397g/cm3;下同)=2.27g/kgSx50=0.1249×2.8−1.9210−1−−−−−−√=0.0391=2.27g/kgSx50=0.1249×2.8-1.9210-1=0.0391LD50的95%可信限=lg-1(0.43533±1.96×0.0391)=2.71～1.90g/kgLD50的平均可信限=2.72±(3.25-2.28)/2=3.69～1.75ml/kg=2.68～1.87g/kg2.2监狱小鼠急性毒性试验小鼠腹腔注射给予花椒挥发油,经预试找其最大致死剂量为3.33ml/kg,最小致死剂量为1.41ml/kg后,以3.33ml/kg为初始剂量,按1∶0.75比例依次设置4组,分别给小鼠按表2剂量一次腹腔注射,连续观察14d,每日记录小鼠毒性反应及死亡数,用改良寇氏法计算半数致死剂量(LD50)。2.3小鼠的急性毒性试验小鼠肌肉注射给予花椒挥发油,经预试找其最大致死剂量为6.17ml/kg,最小致死剂量为4.05ml/kg后,以6.17ml/kg为初始剂量,按1∶0.9比例依次设置5组,分别给小鼠按表3剂量一次肌肉注射,连续观察14d,每日记录小鼠毒性反应及死亡数,用改良寇氏法计算半数致死剂量(LD50)。2.4小鼠急性毒性试验小鼠皮下注射给予花椒挥发油,经预试找其最大致死剂量为9.40ml/kg,最小致死剂量为4.91ml/kg后,以9.40ml/kg为初始剂量,按1:0.85比例依次设置5组,分别给小鼠按表4剂量一次皮下注射0.4ml,连续观察14d,每日记录小鼠毒性反应及死亡数,用改良寇氏法计算半数致死剂量(LD50)。3试验小鼠的安全性花椒挥发油对小鼠灌胃的LD50为2.27g/kg,LD5095%可信限为2.71～1.90g/kg,LD50的平均可信限2.68～1.87g/kg。腹腔注射的LD50为2.03g/kg,LD5095%可信限为2.29～1.79g/kg,LD50的平均可信限2.28～1.78g/kg;肌肉注射的LD50为4.64g/kg,LD5095%可信限为5.82～4.87g/kg,LD50的平均可信限5.80～4.85g/kg;皮下注射5.32g/kg,LD5095%可信限为5.82～4.87g/kg,LD50的平均可信限5.80～4.85g/kg。试验过程中可见小鼠少动、嗜睡、肌肉麻痹等中毒症状,皮下注射有8只皮肤出现溃烂(可能与药物渗漏有关),说明花椒挥发油具有一定毒性。从表1中可知i=lgd4-lgd3=0.1245Xm=0.5224LD50=lg-1[0.5224-0.1245(1.6-0.5)]=2.03g/kgLD50的95%可信限=lg-1(0.38545±1.96×0.0269)=2.29～1.79g/kgLD50的平均可信限=2.43±(2.74-2.15)/2=2.73～2.13ml/kg=2.28～1.78g/kg从表3中可知i=lgd5-lgd4=0.0452Xm=0.7903LD50=lg-1[0.7903-0.0452(1.6-0.5)]=4.64g/kgLD50的95%可信限=lg-1(0.74058±1.96×0.0140)=4.89～4.31g/kgLD50的平均可信限=5.56±(5.86-5.17)/2=5.91～5.22mL/kg=4.93～4.35g/kg从表4中可知i=lgd5-lgd4=0.07Xm=0.973LD50=lg-1[0.973-0.07(2.9-0.5)