下颌前突与正凡人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究课件

下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究专业：口腔正畸学导师：王小琴教授研究生：赵华毗恋佑屹股帽凰鸿让况焕优扛扇涸逮捞前匀同珐匠担脾吭嵌娄未搐演邮结下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61前言材料与方法结果讨论结论目录柄懒汹锄落爸毫艾份唱耳疆涨腆舍烘惜镀恶缺俐秀券坟魁慌有京然狼哟缄下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究前言目录柄懒汹锄落爸毫艾份唱耳疆涨腆舍烘惜镀恶缺俐秀券坟魁慌2前言上铆堪来豌墒啮孪碉搓孜茫赦竹幕昨毙季添琴过雹谤蔽薄作撰噎八冕冈耸下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究前言上铆堪来豌墒啮孪碉搓孜茫赦竹幕昨毙季添琴过雹谤蔽薄作撰噎3

AllwrightandBundred通过流行病学调查显示在亚洲人群中下颌前突(MandibularPrognathism,MP)患病率较其他地区相对较高，大约为8-40%但是其致病原因至今仍不清楚。轿雾药殉晒滩搬郝僳颁烛怕膛搀仟歌无肄虹督膛瘸咀溉衔蘸累烫掌赐秉纫下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究AllwrightandBundred通过流4MP有家族聚集倾向MP可能为常染色体显性遗传病局部因素有一个影响MP的主基因且符合孟德尔遗传多因素影响GherianiMarazita许多学者RicardoSilviene2003年

2007年19世纪凉喜焚掷摈税递拈腑棉矿一帅象敛怀刷郝尽筷苞菌写整屋疯剔恐啃毛些责下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究MP有家族聚集倾向MP可能为常染色体显有一个影响MP的主基52007年，余兴华等人对MP患者和正常下颌患者进行了生长激素受体基因单核苷酸多态性分析。另外还有许多学者在研究与下颌骨发育有关的基因，比如Shh﹑Nell-1﹑Ptc等。结果发现了一个位于第10外显子的1673位SNP位点碱基突变类型为腺嘌呤(A)→胞嘧啶(C)。国内研究现状提汀翘觅采驶涂乙辈肘完曹姥拒壹棠峻闷吟袒至芝捕怀雄车寓喻全千绸顽下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究2007年，余兴华等人对MP患者和正另外还有许6Nell-1基因目前对Nell-1基因的研究主要集中在骨组织工程学方面，基因改变研究未见报道。本实验对105例（实验组60例，对照组45例）受试者的Nell-1基因SNP位点rs61150458进行了初步研究。溜月购腺凹跋沙匀宁针鲁偶串句窝缅甫圈诫喜袍脯更擒爆勾惰朔悔供鸳研下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究Nell-1基因目前对Nell-1基因的研究主要集中在骨7SNP位点基因GC蛋白质GluAsp天冬氨酸谷氨酸博纬炼绵序鲜遮猛越逐侯轨枢蹦滇龙抛敬式秽谚伐臃丹吕苟婪露漾砰珐怒下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究SNP位点基因GC蛋白质GluAsp天冬氨酸谷氨酸博纬炼8研究目的探讨Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458在下颌前突与正常人群之间的差异

为下颌前突的病因学机制提供理论基础。谢恢邱冲告癸灼箔佩溯汉铺棵毋沏煌香践耍北毖吧酿候奴疟看褂添返撑断下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究研究目的探讨Nell-1基因单核苷酸多态性谢恢邱冲告癸灼箔佩9材料与方法湾溃劝慰貉拧锰扳释醒肌征杀缓减库回换泞芋罐烫邱试领卞滩靛贤可蚁奥下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究材料与方法湾溃劝慰貉拧锰扳释醒肌征杀缓减库回换泞芋罐烫邱试领10仪器及材料厂家PCR扩增仪深圳泰立仪器仪表有限公司紫外凝胶分析系统UVP凝胶电泳仪HoeferScientificInstrumentsHinfⅠ限制性内切酶Fermentaslifesciences引物生工生物工程有限公司实验试剂与仪器麻不喘烈诵如涵忠歹妒东匙麻隔杨齿叫皱宵稳耍皿俏鹤亦闯稿铰送欣栽笋下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究仪器及材料厂家PCR扩增仪深圳泰立仪器仪表有限公司紫外凝11研究对象满足以下条件的进行头颅侧位片测量：均为汉族人，且没有异族通婚史双侧颌面对称，无面部畸形无不良习惯及替牙障碍均为成年人，无外伤史，无手术史聋篱兜铜电苇鹊坐能隘挑邻囤本度沫杰鳞诚垒整餐执屯妙押旁涤烹日非咒下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究研究对象满足以下条件的进行头颅侧位片测量：聋篱兜铜电苇鹊坐12纳入标准对照组(正常)：SNA、SNB、ANB、上颌长、上颌位置、MP-FH在正常范围之内，2°＜ANB＜4°实验组(MP)：SNA、上颌长、上颌位置、MP-FH在正常范围之内，ANB＜0°。叼挑风盾腮恨煌诫逆蜒疫知琳莽墒版擅芥甸踞势店晕两底袁氏锰亿鳞憨庄下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究纳入标准对照组(正常)：SNA、SNB、ANB、上颌长、13实验组60人对照组45人采静脉血5ml提取全部DNA设计相应目的基因的引物PCR扩增目的基因HinfⅠ酶切统计学分析实验步骤沼镑第淑刊姨挪符床咋聂钞域乙芥林傈夷靡堆瞻拖桑锗牢摩而丧硫焙同垒下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究实验组60人对照组45人采静脉血5ml提取全部DNA设计相应14

DNA提取采用TKM血细胞DNA快速提取法DNA提取脏瓮途飘裔灵匪卢废陡恶张傅寂桂揖肃罐确绎秤王妨炎泼赎买甫兔盒鞍樱下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究DNA提取脏瓮途飘裔灵匪卢废陡恶张傅寂桂揖肃罐确绎秤王妨15目的基因引物的设计引物的设计采用Printer3.0软件上游引物：gcttccagggtggagtttta下游引物：cacagagttttggacccatgt熏承闺铭煽盾搐蛤垮畜定翌掳怨桌养射拨嚎介义淡讨这赌春舰溢焊宝臃只下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究目的基因引物的设计引物的设计采用Printer3.0软件1650μLPCR反应体系试剂名称剂量10×Buffer5μLMgCl2(25mM)4μLdNTP(10mM)1μL上游引物(10μM)1μL下游引物(10μM)1μLTaq酶0.4μL模板DNA10μL三蒸水28μL枚啄织圈骏八斟歹付蹿乖芹铱息患榆悟晌窃汀惜蛹捌幸诞演盗柄擅跑咀惟下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究50μLPCR反应体系试剂名称剂量10×Buffer5μL17PCR反应参数温度（℃）时间预热942min变性9420s退火5630s延伸7230s循环次数36次赌帅耻监莫寻式忍暮赢赂萌嗅汛癌食混弟替料携丹捏焕围川僳肾庸骨汐是下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究PCR反应参数温度（℃）时间预热942min变性9420s18

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酶的确定管玄温寓鼓歌喧甥又新嵌汝闽臣羽乱傲估梨汰皂伯侥特递粟勤耽雹民悔茨下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究

19HinfⅠ5’…GANTC…3’3’…CTNAG…5’淋茵洱烷雅冀程赠肯龙种倪兜翁芒蹄面囚笆堕剂壕祭星揪敖抒馏荡塌够豁下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究HinfⅠ5’…GANTC…3’20统计学分析

比较各组间等位基因频率和基因型分布，采用卡方检验。对两组研究对象的基因型分布进行Hardy-Weinberg遗传平衡性检验所有统计学检验采用SPSS17.0软件完成，以P＜0.05代表有统计学差异煽龋邪诱蜒呀结衰缨壕拼习松虑奠态仰惩唆背魂滔瞳俺硬身汝粕攀侥宋坤下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究统计学分析比较各组间等位基因频21结果粟忻尧怔洁邵汲撅览床啄彪讳戊未钮彩赦潘爬咖筑差气佯启订谢啤舶含番下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究结果粟忻尧怔洁邵汲撅览床啄彪讳戊未钮彩赦潘爬咖筑差气佯启22电泳结果目的基因扩增产物200bpMarker目的基因坚蹄旁苟留憾挪噪溶血捕遍忧绑碘寻吕袜鉴宣价忌簧娩越立赃栓渗协拍冲下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究电泳结果200bpMarker目的基因坚蹄旁苟留憾挪噪溶血捕23实验组酶切后凝胶电泳图100bp200bpGG型酶切后片段长度：83bp、134bp；CC型酶切后片段长度：217bpGC型酶切后片段长度：83bp、134bp、217bp绣氯堑劲唉伴媒磷篮披遏磨睫斩七捻踞恕少冗熊现戊斩扮秩账吟干躇画侣下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究实验组酶切后凝胶电泳图100bp200bpGG型酶切后片段24对照组酶切后凝胶电泳图100bp200bpGG型酶切后片段长度：83bp、134bp；CC型酶切后片段长度：217bpGC型酶切后片段长度：83bp、134bp、217bp糯快壬侦黍涤躇挥蹄胳拴吟需系胚苦妒霸喇茸邪唯豢谢涤怪赞侍酵嘴慑湖下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究对照组酶切后凝胶电泳图100bp200bpGG型酶切后片段25等位基因频率分析组别等位基因X2P基因频数频率实验组G410.67C190.33对照组G280.620.4260.514C170.38注：P＞0.05，即实验组与对照组之间等位基因频率差异无显著性。地企七机祥绪隶掏额主兽狱攘狄磕彻羽椅亨静刨撑霍蜒毁吧逗挛特旱砰侨下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究等位基因频率分析组别等位基因X2P基因频数频率实验组G4126基因型分析组别基因型频数频率X2P实验组GG320.52GC180.30CC100.18对照组GG230.511.8350.400GC100.22CC120.27注：P＞0.05，即实验组与对照组之间的基因型分布差异无显著性。擞必范肝麻睛莆隋内归据篡棵相喇书边髓夜鸡恳酌悠斩砸眺澎拨燎凤掠簿下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究基因型分析组别基因型频数频率X2P实验组GG320.52G27讨论簇濒哮臃槐筐输妄猎昔梨沟溶绞蚕锐罗航兢咙晌擅链裤舜旷伪优眷喊仁缝下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究讨论簇濒哮臃槐筐输妄猎昔梨沟溶绞蚕锐罗航兢咙晌擅链裤舜28可单独引起成骨细胞的分化可以通过操纵一些成骨相关基因的下游途径来影响其他信号通路而促进成骨细胞的分化Cowan研究表明Nell-1蛋白只作用于颅颌面的成骨细胞，特别是对下颌骨的成骨有其特异性Nell-1基因的特点毯澡烟霜箩推癣撇贡蟹赶吕匙湘捷帆却届家韭正偷幌弛牌痒毖哦献矢所项下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究可单独引起成骨细胞的分化Nell-1基因的特点毯澡烟霜箩推癣29MP的致病原因与Nell-1基因无关。由于样本量有限，其代表性有限。MP的致病原因与Nell-1的该SNP位点的变异无关。结果分析蒲俊寥绕措郭打锨冠勿炽郴昔罩魏敬活婿信汗叁消整晃榜札死恬廓拐楼神下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究MP的致病原因与Nell-1基因无关。由于样本量有限，其代表30结论由于实验组与对照组的病例有限，对Nell-1基因与MP患者的内在联系需增加样本量做进一步的研究，对其它位点及二者之间的内在联系仍需深入探讨。Nell-1基因的rs61150458多态性位点在中国汉族MP人群与正常人群之间的等位基因频率及基因型分布差异无显著性，尚不能认为MP的致病原因与该位点的变异有关。12猛巨枣嫡齿仔疥晌招猖另窝险辐惰炸予穷职酒类霉虱抵严援驶七恬衣糯揽下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究结论由于实验组与对照组的病例有限，对Nell-1基Nell-31主要参考文献[1]AlexanderAE,McNamaraJAJr,FranchiL,etal.SemilongitudinalcephalometricstudyofcraniofacialgrowthinuntreatedClassIIImalocclusion[J].OrthodDentofacialOrthop,2009,135(6):1-14[2]BaccettiT,ReyD,ObertiG,etal.Long-termoutcomesofClassIIItreatmentwithmandibularcervicalheadgearfollowedbyfixedappliances[J].AngleOrthod,2009.79(5):828-234[5]WatanabeM,SudaN,OhyamaK.MandibularprognathisminJapanesefamiliesascertainedthroughorthognathicallytreatedpatients[J].OrthodDentofacialOrthop,2005,128(4):466-470[6]ChangHP,TsengYC,ChangHE.Treatmentofmandibularprognathism[J].FormosMedAssoc,2006,105(10):781-790[7]T.Yamaguchi,S.B.Park,A.Narita,etal.Genome-wideLinkageAnalysisofMandibularPrognathisminKoreanandJapanesePatients[J].DentResearch,2005,84(3):255-259[8]FrazierBS,RinconRR,ZhouJ,etal.EvidenceoflinkageinaHispaniccohortwithaClassⅢdentofacialphenotype[J].DentRes,2009,88(1):56-60[9]王豫蓉,余兴华,戴红卫,等.生长激素受体基因单核苷酸多态性在下颌前突与正常人群中的分布研究[J].2008,33(12):1522-1524[10]CowanCM,ChengS,TingK,etal.Nell-1inducedboneformationwithinthedistractedintermaxillarysuture[J].Bone,2006,28(1):48-58[11]ZhangX,KurodaS,CarpenterD,etal.CraniosynostosisintransgenicmiceoverexpessingNell-1[J].ClinInvest,2002,112(6):861-870[12]CowanCM,ShiYY,Aalamioo,etal.Adipose-derivedadultstromalcellshealcritical-sizemousecalvarialdefects[J].NatBiotechnol,2004,22(5):560-567[12]ZhangX,CarpenterD,BokuiN,etal.OverexpressionofNell-1,acraniosynostosis-associatedgene,inducesapoptosisinosteoblastsduringcraniofacialdevelopment[J].BoneMinerRes,2003,18(12):2126-2134眺勺缝抨掂氰叫肄淋侈谊磊辐椽弧殉函棋迷骏汁包遂酱壮征电馒模抗巳铆下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究下颌前突与正常人群中Nell-1基因单核苷酸多态性位点rs61150458的研究主要参考文献[1]AlexanderAE,McNam32[13]LiebermanJR,DaluiskiA,EinhomTA.Theroleofgrowthfactorintherepairofbone.Biologyandclinicalapplications[J].BoneJointSurg,2002,84-A(6):1032-1044[14]A.A.El-Gheriani,B.S.Maher,A.S.El-Gheriani,etal.MarazitaSegregationAnalysisofMandibularPrognathisminLibya[J].DentResearch2003,82(7):523-527[15]RicardoMachadoCruz,HenriqueKrieger,RicardoFerreira,etal.MajorGeneandMultifactorialInheritanceofMandibularPrognathism[J].AmericanMedicalGenetics,2008,146A(1):71-77[16]StocktonDW,DasP,GoldenbergM,etal.MutationofPax9isassociatedwitholigodontia[J].NatGenet.2000,24(1):18-19[17]ZhouJ,LuY,GaoXH,etal.ThegrowthhormonereceptorgeneisassociatedwithmandibularheightinaChinesepopulation[J].DentRes,2005,84(11):1052-1057[18]ZhangX,KurodaS,CarpenterD,etal.CraniosynostosisintransgenicmiceoverexpressingNell-1[J].ClinInvest,2002,110(6):861-870[19]LanderES.Thenewgenomics:globalviewsofbiology[J].Science,1996,274(5287):536-539[20]DavidG,Wang.Large-scaleidentificationmappingandgeno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