食品安全快速检测技术及其进展课件

食品安全快速检测技术及其进展

食品安全快速检测技术及其进展

1检测技术是保障食品质量安全的重要技术支撑。快速检测技术在鲜活农产品现场监测、市场准入、进出口岸贸易、快速筛查等工作中发挥着越来越重要的作用。食品安全快速检测技术及其进展课件2检测速度快，灵敏度高；特异性、高通量；前处理简单，成本低；快速检测技术特点设备小型化，便携。检测速度快，灵敏度高；特异性、高通量；前处理简单，成本低；快3样品前处理残留分析的两大基本主题检测食品安全快速检测技术样品前处理4快速样品前处理技术

传统样品前处理技术：

索氏提取、液液分配、柱层析等。

现代样品前处理技术：

固相萃取技术(SPE)固相微萃取技术SPME）基体分散固相萃取（MSPD）分子印迹技术（MIP）免疫亲和色谱(IAC)凝胶层析(GPC)加速溶剂提取（ASE）超临界流体萃取技术(SFE)微波辅助萃取MAE）

快速样品前处理技术传统样品前处理技术：固相萃取技术(SP5快速检测技术化学分析技术

化学检测试剂盒（试纸、卡）电化学传感器生物分析技术免疫学方法分子生物学技术生物传感器技术生物芯片快速检测技术化学分析技术生物分析技术6遵从的标准和方法放射免疫测定法/酶免疫法色谱联用分析放射受体分析气相色谱（ECD/NPD）气相色谱（FID）1pg/g1ng/g1ug/g1mg/g高效液相色谱(FLD/UVD)极谱法荧光分光光度法微生物测定法紫外/可见分光光度比色法各种方法检测范围比较遵从的标准和方法放射免疫测定法/酶免疫法色谱联用分析放射受体7快速测定的生物分析方法免疫学方法分子生物技术生物传感器技术生物芯片快速测定的生物分析方法免疫学方法8方法检测对象国内外对比化学检测技术有机磷灵敏度低酶抑制检测技术有机磷和氨基甲酸酯国内假阳性、假阴性率高，二十余家生产厂商，多种速测卡、速测仪，GB/T5009.199-2003；NY/T448-2001国外测定样品和农药种类有限，欧美作为普查农药残留和田间实地检测的基本手段；AOAC官方方法964.17免疫分析法有机磷类、氨基甲酸酯类、硫代氨基甲酸酯类、有机氯类、三嗪类、拟除虫菊酯类和酰胺类等几十种农药国内研究活跃，但未有真正推广使用的商品化产品国外技术成熟，灵敏度高，FAO推荐方法，美国USDA、EPA、AOAC制定了评定标准，但经认证的有限，经EPA认证的免疫试剂盒约有4个厂家的26种试剂盒：EPA方法4010、EPA方法4015EPA方法4040等生物传感器有机磷、氨基甲酸酯国内处于研究阶段国外电导型生物传感器、光寻址电位型传感器、安培型传感器，处于研究和应用阶段，并未广泛推广使用农药快速检测技术方法检测对象国内外对比化学检测技术有机磷灵敏度低酶抑制检测9方法检测对象国内外对比免疫分析法ELISA方法兽药的单残留检测国内盐酸克仑特罗、磺胺二甲嘧啶试剂盒、试纸等20余种产品，假阳性率高，市场占有率大约50%左右兽药的单残留检测、多残留检测国外广泛应用，意大利Tecna公司、美国Idexx公司、英国Randox公司、Laboratories公司和德国R-Biophanm公司等均有产品，2001年国家质检总局推荐Randox公司的ELISA试剂盒作为动物激素和抗生素残留的首选筛查方法，AOAC的官方网站上登记有15个厂家的100多种商品试剂盒，经FDA认证或AOAC确证的试剂盒占50多种放射免疫方法检测同一类抗生素国内DB33/T473-2004：放射免疫快速检测β-内酰胺类、磺胺类和氨基糖苷类链霉素型药物残留量检测同一类抗生素国外美国CHARMScience公司Charm6600/7600抗生素快速检测系统，可测β-内酰胺类、氯霉素类、四环素类、磺氨类、邻氯青霉素等，FDA认可胶体金试纸条少数兽药国内研究活跃，但未有真正推广使用的商品化产品国外灵敏度比ELISA试剂盒低5～10倍，特异性差，仅适合残留限量要求不高的少数兽药的粗筛蛋白芯片多残留兽药的检测国内有微阵列芯片产品，但因价格相对较高，未推广使用国外有多种商品化芯片，但灵敏度需进一步提高兽药快速检测技术方法检测对象国内外对比ELISA方法兽药的单残留检测国内盐酸10方法检测对象国内外对比生物化学快速检测大肠菌群国内鲜乳中菌落总数快速测定（SN/T1749-2006）；畜禽产品大肠菌群快速测定技术规范（NY/T824-2004）；大肠菌群的快速检测（GB/T4789.32-2002）肠杆菌科,李斯特菌,葡萄状球菌国外基于生物化学原理开发的商品化的试剂盒和自动化系统，《FDA细菌分析手册》列出了17个厂家的分析系统，基于生物化学、脂肪酸、核酸等进行检测免疫分析法（ELISA、侧流式技术）单一微生物、多种微生物国内大肠菌群ELTSE快速检验方法（WS/T116-1999）。国外自动ELISA系统官方认可，但交叉反应导致的假阳性率高，美国Biocontrol系统、瑞士Diffchamb系统和美国Detex系统是ELISA主流产品，美国的Real系统、VIP系统是侧流式技术的典型代表，在官方网站上查到70多个厂家生产的8种微生物的84个检测产品，其中包括12个AOAC方法DNA分析法单一微生物国内大多是模仿国外先进技术，且在试制阶段，各质检监督部门所用快速检测方法大多为国外技术和设备，已开发出食源性致病菌实时荧光PCR检测试剂、猪链球菌2型多重PCR检测试剂等国外《FDA细菌分析手册》列出的基于DNA技术（PCR、探针）的商品化检测法有4个厂家建立的7种微生物的16种方法，8～48h可得准确结果、比培养方法快速，比免疫分析方法灵敏；但操作较繁锁，检测费用较高，且未经验证认可微生物快速检测技术方法检测对象国内外对比生物化学快速检测大肠菌群国内鲜乳中菌落11方法检测对象国内外对比免疫分析法：侧流式免疫吸附法（胶体金法）、ELISA黄曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）、伏马菌素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素等国内一步式黄曲霉毒素快速检测试纸、检测试剂盒，玉米赤酶烯酮检测试剂盒、赭曲酶素A检测试剂盒、伏马菌素B1检测试剂盒、河豚毒素检测试剂盒、T2毒素检测试剂盒等，我国部分质检部门检测黄曲霉毒素使用美国CHARM公司生产的CharmII7600系统及ROSA抗生素快速检测仪国外ELISA是主流技术，美国USDA要求在官方检查中使用经认证的快速检测方法，测定谷物中的黄曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）、伏马菌素、玉米赤霉烯酮等，目前USDA已认可10种黄曲霉毒素ELISA试剂盒，检测下限5ppb；12种呕吐毒素试剂盒，灵敏度在0.25-5ppm范围内，其他经AOAC认证或确证的毒素检测试剂盒有玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素和T-2毒素毒素快速检测技术方法检测对象国内外对比免疫分析法：黄曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌12重金属快速检测技术

方法检测对象国内外对比酶抑制检测技术砷、铅、汞、镉等国内研究阶段，还没有经过认证的快速检测方法国外脲酶抑制法，限于饮用水中汞的测定免疫分析法国内研究阶段，未有真正推广使用的商品化产品国外成功用于液体样品中的铟(Ⅲ)、汞(Ⅱ)、镉(Ⅱ)、铅(Ⅱ)和铀(Ⅵ)等的检测，固体样品重金属提取方法需进一步研究化学或传感器检测国内重金属快速测定仪，检汞管速测盒和检砷管速测盒国外电化学传感器：阳极溶出伏安仪，检测时间5min，电极为一次性使用，检出限达ng级；生物传感器：基于脲酶抑制法测汞重金属快速检测技术重金属快速检测技术方法检测对象国内外对比酶抑制检测技术砷13显色前显色后快速检测技术和试剂我国的成就显色前显色后快速检测技术和试剂我国的成就14快速检测仪器和设备

我国的成就快速检测仪器和设备我国的成就15

农药残留快速检测技术问题：酶抑制技术虽然价廉（分析一个样品平均需1.5元左右），但假阳性率高，且检测对象受限等。建议：除解决“关键酶”问题，重点发展具有“类特异性”的免疫分析技术，这也是国外目前发展的主流技术。

存在的问题及建议农药残留快速检测技术问题：酶抑制技术虽然价廉（分析一个样16问题：兽药残留快速检测50%以上依赖进口仪器和试剂盒（卡），价格较高，如莱克多巴胺检测试剂盒3200元/96次，而国产试剂盒因价格与国外进口产品差距不大（是进口产品价格的80%左右），推广受到限制。建议：重点发展“类”兽药残留免疫检测试剂盒和生物芯片，扩大检测靶标物的范围。如国产快速检测试剂盒市场占有率增加，价格将会有所下降。存在的问题及建议

兽药残留快速检测技术问题：兽药残留快速检测50%以上依赖进口仪器和试剂盒（卡），17存在的问题及建议微生物快速检测技术

我国致病微生物快速检测的主流技术为国外技术和产品。建议：重点发展免疫分析技术、PCR技术、DNA探针检测技术。毒素快速检测技术

关于毒素的快速检测技术在国内应用较少，由无锡微生物研究所生产的黄曲霉毒素M1检测试剂盒（800元/24孔）和黄曲霉毒素B1检测试剂盒（400元/24孔）有一定应用；而玉米赤酶烯酮检测试剂盒、呕吐毒素检测试剂盒等（4000元/96孔左右）均为进口产品。建议：发展重要毒素的免疫分析技术。

存在的问题及建议微生物快速检测技术18快速检测技术发展趋势检测速度要求越来越快检测方法的灵敏度要求越来越高检测方法的类特异性要求越来越高多种污染物同时分析检测方法的操作更简便、易操作