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文档简介

衣原体及检验一、概述〔一〕概念衣原体是一群体积较小,能通过细菌滤器,细胞内专性寄生,并有独特发育周期的原核细胞型微生物。由于它具有一些与细菌类似的生物学特性,现归属于广义的细菌范畴。〔二〕分类与命名传统分类法按第九版Bergey细菌学分类手册,衣原体属于衣原体目、衣原体科、衣原体属。依据衣原体的抗原构造和DNA同源性的特点,将衣原体属分为四个种,包括沙眼衣原体、肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体和家畜衣原体。能引起人类致病的主要是前三种。沙眼衣原体可分三个生物亚种,即沙眼生物亚种、性病淋巴肉芽肿生物亚种〔LGV〕及鼠生物亚种。其中沙眼亚种又分A~K14LGV4个血清型L1、L2、L2aL3。前两个亚种对人类有致病性,鼠亚种则不侵害人类。肺炎衣原体是衣原体属中的一个种。只有一个血清型,即TWAR组。分子生物学特性分类法该法主要是从衣原体种系发生上分析和评价传统分类法。二、生物学性状发育生殖周期与形态染色衣原体在宿主细胞内生长生殖有独特的发育周期,可见到两种形态构造不同的颗粒。原体:呈球形或椭圆形,直径约0.3μm为成熟的衣原体。吉姆萨染色呈紫色,Macchiavello网状体又称始体:呈球形或椭圆形,直径0.5~1μm,无胞壁,胞浆内无致密的核质,而有纤细的网状构造。吉姆萨染色和Macchiavello染色均呈蓝色。为衣原体发育周期中的生殖型,代谢活泼,不能自胞外存活,无感染性。衣原体的发育周期:原体当与易感细胞外表的特异受体吸附后,通过细胞的吞饮作用进入细胞,形成吞噬小泡。原体在泡内变软,增大为网状体。约8小时后,网状体在空泡内以二分裂方式生殖、聚拢,构成各种外形的包涵体18~24小时后,网状体浓缩形成具有坚韧细胞壁的原体,最终随宿主细胞裂开而释出,40~72抗原成分衣原体的抗原性相当简洁,有属、种、型等特异性抗原。属特异性抗原:衣原体细胞壁LPS为属特异性补体结合抗原。其与革兰阴性菌LPS构造不同,缺O-多糖和局部核心多糖,无典型内毒素生物学活性。长期应用于衣原体血清学诊断。种特异性抗原:主要位于外膜蛋白〔MOMP〕上。型特异性抗原:也位于MOMP上,用单克隆抗体作微量免疫荧光试验可识别衣原体各血清型。3.分别培育特性衣原体专性细胞内寄生。6~8黄囊膜中找到包涵体、原体和始体颗粒,也可在传代细胞〔HeLa-299Mc-Coy〕中培育。4.抵抗力衣原体抵抗力弱,35~3748503056~60℃5~10原体比沙眼衣原体稳定。对四环素、青霉素、红霉素、螺旋霉素、利福平较敏感。三、临床意义人类衣原体病主要包括:〔一〕沙眼衣原体沙眼由沙眼生物亚种A、B、BaC主要通过眼-眼或眼-手-眼〔常通过公用毛巾等媒介〕的途径进展直接或间接接触传播。包涵体结膜炎由沙眼生物亚种B、Ba、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、K成人两类。婴儿经产道时该亚种可致包涵体结膜炎和婴幼儿肺炎。泌尿生殖道感染主要由沙眼生物亚种D-K是经性接触传播引起的非淋菌性泌尿生殖道感染的主要病原。衣原体感染是男性尿道炎最常见的病因之一。未经治疗者多数转为慢性,周期性加重,或可合并附睾炎、前列腺炎等。在女性可引起尿道炎、宫颈炎、阴道炎、盆腔炎,也可与妇女不孕症有关。衣原体常与淋病奈瑟菌混合感染,淋病奈瑟菌对衣原体的生殖起激活和促进作用。性病淋巴肉芽肿由沙眼衣原体LGV〔L1、L2、L2a、L3〕血清型引起,主要通过性接触传播。引起以化脓性腹股沟淋巴结炎为特征的性病,又称第四性病。主要侵害淋巴组织,女性以累及会阴、肛门、直肠及盆腔淋巴结多见,男性以累及腹股沟淋巴结为常见,发生化脓性炎症和慢性肉芽肿,有些可形成瘘管。〔二〕鹦鹉热衣原体主要引起鸟类或家禽感染,由感染该衣原体的鸟类等动物的粪便污染环境,以气溶胶形式传给人类。使人类发生上呼吸道感染、肺炎和毒血症。典型临床表现为非典型肺炎。也有引起心内膜炎的报道。〔三〕肺炎衣原体其传播方式主要是人与人之间经飞沫或呼吸道分泌物传播。引起青少年急性呼吸道感染,以肺炎为主,常可呈地方性、散发性流行,也可引起支气管炎、咽炎等。该衣原体也可引起慢性感染,其与急性心肌梗死和慢性冠心病的关系越来越引起留意。四、微生物检验1.标本采集与处理沙眼衣原体:沙眼和包涵体结膜炎的患者,取眼穹隆部及睑结膜病灶作刮片。子宫颈炎取子宫颈刮片上皮细胞或分泌物作涂片。标本置于运送培育基中送检,常用的运送培育基为2SP性病淋巴肉芽肿患者可取腹股沟淋巴结脓液,也可取直肠拭子或活检材料送检。鹦鹉热衣原体:实行患者血液、痰液或咽喉含漱液,痰标本用约2~10倍的灭菌肉汤或组织培育液洗脱附着在标本上的病原体,用力振摇,制成悬液,置室温1~2小时后,低速离心取上清液接种。尸检材料取肝、脾、肺等组织,也可采腹腔和心包渗出液。肺炎衣原体:一般利用拭子经鼻前庭插入鼻咽部,旋转后取出,利用转运培育基,冷藏送检。也可采集气管内痰液或肺泡灌洗液。要求24-70℃保存。2.直接显微镜检查染色镜检,查找上皮细胞细胞质内的包涵体。包涵体即指在易感细胞内含增殖的始体和子代原体的空泡。依据包涵体的形态、在细胞内的位置及染色性等特性,对鉴别衣原体有意义。吉姆萨〔Giemsa〕染色:原体呈紫红色,始体呈蓝色,包涵体呈深紫色。沙眼衣原体包涵体密度低,呈空泡形。鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体包涵体呈深密度的卵圆形,肺炎衣原体在HeLa细胞中的包涵体形态与鹦鹉热衣原体格外相像,但不像鹦鹉热衣原体具有多形性。碘液染色:标本经甲醛固定后,用Lugol10富的糖原,可被碘液染成深褐色,而细胞的其他局部呈黄色。沙眼衣原体含糖原,碘液染色阳性。鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体碘液染色阴性。LPS3核酸检测按MOPOPCR、16SrRNA分别培育各种衣原体均可在鸡胚卵黄囊和组织细胞内生长生殖,鹦鹉热衣原体常用小鼠分别。鸡胚卵黄囊接种:将检查标本加适当抗生素〔如链霉素等〕处理后接种于鸡胚卵黄囊分别培育。细胞培育:目前常用的细胞有两种:即经XMcCoyHeLa。不同种的衣原体有McCoyHela229炎衣原体适合用HEP-2HL用DEAE葡聚糖预处理,以便增加分别率,也可以用细胞生长抑制剂,抑制宿主细胞生长,以利于衣原体的分别培育。对沙眼衣原体不敏感,主要用于鹦鹉热衣原体的分别。用小鼠腹腔、颅内或滴鼻接种。检测抗体用补体结合试验、微量免疫荧光法、酶免法检测抗体。五、治疗原则四环素类及大环内酯类对衣原体有较高的活性,青霉素类、磺胺、氧氟沙星以及利福公正也有确定的活性,磺胺对肺炎衣原体无效。孕妇、哺乳期妇女以及儿童禁用四环素而首选红霉素。【例题】以下何种微生物能通过滤器A.军团菌B.分枝结核杆菌C.衣原体D.肺炎克雷伯杆菌E.流感嗜血杆菌『正确答案』C『答案解析』衣原体是一群体积较小,能通过细菌滤器,细胞内专性寄生,并有独特发育周期的原核细胞型微生物。【例题】以下说法正确的选项是A.衣原体与病毒构造相像B.衣原体可引起非典型肺炎C.衣原体对抗生素不敏感D.衣原体无自己的酶系统E.衣原体不能通过滤器『正确答案』B『答案解析』人类衣原体病主要包括沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体。其中,鹦鹉热衣原体主要引起鸟类或家禽感染,由感染该衣原体的鸟类等动物的粪便污染环境,以气溶胶形式传给人。使人发生上呼吸道感染、肺炎和毒血症。典型临床表现为非典型肺炎。【例题】以下关于衣原体网状体的表达正确的选项是A.无感染性B.具有高感染性C.有细胞壁构造D.无生殖力气E.生长成为原体『正确答案』A『答案解析』网状体又称始体,呈球形或椭圆形,直径0.5~1μm,无胞壁,胞浆内无致密的核质,而有纤细的网状构造。姬姆萨染色和Macchiavello染色均呈蓝色。为衣原体发育周期中的生殖型,代谢活泼,不能自胞外存活,无感染性。细菌的形态与构造一、单项选择题细菌单位是A.dm B.cm C.mm D.um E.nm答案:D对以下细菌大小表述错误的选项是葡萄球菌体直径约1um B.大肠埃希菌长约2~3umC.阴沟肠杆菌宽约0.3~0.5um D.霍乱弧菌体长2~3umE.布鲁菌长2~3um答案:E以下细菌菌体形态呈链状排列的是卡他布兰汉菌 B.屎肠球菌 腐生葡萄球菌D.肺炎克雷伯菌 E.淋病奈瑟菌答案:B以下细菌菌体形态呈螺旋形排列的是表皮葡萄球菌 B.产酸克雷伯菌 克氏耶尔森菌D.鼠咬热螺菌 E.鲍氏志贺菌答案:D以下不属于细菌根本构造的是细胞壁B.芽胞 C.细胞膜 D.核质 质答案:B不属于革兰阴性细菌细胞壁成分的是A脂蛋白 B.聚糖骨架 C.四肽侧链 D.五肽交联桥 答案:D革兰阳性细菌细胞壁具有很强抗原性的成分是外膜 B.肽聚糖 C.磷壁酸 D.聚糖骨架 联桥答案:C以下菌有细胞壁外膜层的是粪肠球菌 B.溶血葡萄球菌 C.型隐球菌 克雷伯菌E.克柔假丝酵母菌答案:D以下不属于细菌细胞质根本成分的是水 B.聚糖骨架 C.无机盐、糖 D.蛋白质、脂类 答案:B把握细菌某些特定遗传性状的是A.核质 B.胞质颗粒 C.质粒 D.核糖体 答案:C细菌细胞质中打算菌体嗜碱性的物质是A.核糖核酸 B.质粒 C.蛋白质 D.双链闭环DNA 答案:A细菌的主要遗传物质是A.核糖核酸B.脂类 C.质粒 D.核质 答案:D不属于细菌特别构造的是A.荚膜 B.核质 C.鞭毛 D.菌毛 答案:B对细菌荚膜功能表述不正确的选项是答案:答案:BA.对细菌具有保护作用B.致病作用答案:DD.H抗原E.鉴别细菌的依据之一以下对细菌鞭毛表述不正确的选项是A.是由细胞质伸出的蛋白质丝状物 B.长度超过菌体数倍C.弧菌都具有鞭毛 阴性杆菌都具有鞭毛E.螺菌都具有鞭毛答案:D以下有菌毛的细菌是A.表皮葡萄球菌 B.肺炎链球菌 C.金黄色葡萄球菌 D.霍乱弧菌E.结核分枝杆菌答案:DDNA存在于A.蛋白质B.染色体和质粒中C.细胞质染色体外答案:BE.聚糖骨架中以下不属于细菌细胞膜的构造和化学成分的是A.脂质 B.载体蛋白 C.多糖 D.酶 答案:E以下能将雄性菌的某些遗传物质转移给雌性菌的特别构造是A.单鞭毛 B.一般菌毛 C.性菌毛 D.双鞭毛 答案:CL型细菌菌落是A.油煎蛋样菌落 B.光滑型菌落 C.丝状菌落D.G型菌落 E.F型菌落答案:A细菌的RNA主要存在于A.细胞壁B.聚糖骨架 C.胞质 D.脂多糖 答案:C细菌所含核糖核酸占细菌干重的A.5% B.10% C.15% D.20% E.25%答案:BL型的特点不包括A.形态多形性 B.染色不确定性 C.渗透压敏感性 反响增加E.对抗生素抵抗答案:D50.L型菌落常呈A.颗粒型 B.荷包蛋样C.丝状菌落 D.露珠样 落答案:A细菌需氧呼吸最终电子受体是A.H<sub>2</sub>O B.O<sub>2</sub> C.CO<sub>2</sub>D.ATP E.ADP螺形菌属于A.细菌 B.螺旋体 C.杆菌 D.病毒 答案:A属于细菌遗传物质的是A.脂多糖 B.质粒 C.胞质颗粒 D.荚膜 答案:B细菌的内毒素的化学成分是A.脂多糖 B.质粒 C.胞质颗粒 D.荚膜 答案:A内毒素是G-菌的菌体成分的A.肽聚糖 B.脂多糖 C.磷壁酸 D.胞壁酸 答案:B细菌贮存养分物质的是A.脂多糖 B.质粒 C.胞质颗粒 D.荚膜 答案:C测量细菌大小的单位是cm B.nm C.mm D.um E.dm答案:D细菌的特别构造不包括A.芽孢 B.荚膜 C.中介体 D.菌毛 答案:C,以下不正确的选项是A.维持细菌固有形态 B.与细胞内外的物质交换有关C.打算细菌的分裂D.是细菌外层构造,比较坚韧.且具有高度弹性,打算了菌体的抗原性答案:C革兰阳性菌细胞壁特有成分为外膜 B.磷壁酸 C.脂多糖 D.肽聚糖 答案:B革兰阳性菌细胞壁的特点是A.较疏松 B.无磷壁酸 C.有脂多糖 D.有脂蛋白 含量多答案:E革兰阴性菌细胞壁特有组分是A.肽聚糖 B.磷壁酸 C.氨基酸 D.外膜 答案:D具有物质转运与生物合成和分泌等作用的细菌构造是A.细胞壁 B.细胞质 C.核质 D.异染颗粒 答案:E细菌合成蛋白质的场所是A.中介体B.细胞膜 C.核糖体 D.胞质颗粒 答案:C能维持细菌固有外形的是A.细胞核B.细胞壁 C.细胞膜 D.细胞质 E.中介体细菌核质的特点是A.有典型细胞核构造B.含组蛋白 C.无核膜与核仁 染色体E.DNA呈线状答案:C细菌的遗传物质是A.染色体、核糖体、质粒 、核糖体、转位因子C.染色体、中介体、转位因子 D.染色体、核糖体、中介体E.染色体、质粒、转位因子答案:E质粒是细菌的A.核质RNA B.胞浆中的异染颗粒 C.核质DNAD.染色体外的DNA E.胞浆中的RNA答案:D,正确的选项是A.是细菌侵袭力的组成局部 B.与细菌运动有关 菌分裂有关D.与细菌染色有关 E.与细菌接合有关答案:A细菌的运动器官是A.荚膜 B.芽胞 C.性菌毛 D.鞭毛 菌毛答案:D,正确的选项是A.

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