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文档简介

生命基地091DNA序列测定的应用与发展DNA序列测定的应用?分析基因组核苷酸排列序列分析基因序列基因定点诱变的基础基因工程载体构建中DNA序列定位和排序的基础确定DNA序列中蛋白质的编码区测序技术的最近发展1.商品化测序试剂盒解决了质粒问题,节约了时间,但缺乏灵活性。2.自动化测序仪以酶学测序反应或放标测序产物为基础,微机处理。3.热循环测序使极少数测序产物线性放大。4.测序商品化60--180¥,搞定思考题1.DNA序列测定有哪几种类型?简叙它们各自使用的范围和特点。双脱氧链终止法:该方法需要单链模板和特异寡核苷酸,并需获得大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段的高质量酶制剂,而随着M13噬菌体和噬菌粒载体的发展,也由于现成的合成引物容易获得及测序反应日期完善,双脱氧链终止法如今远比化学降解法应用的广泛。化学降解法:重现性好,所用试剂简单,易于掌握;所测长度比Sanger法短一些,对放射性标记末端250个核苷酸以内的DNA序列效果较好;序列来自原DNA分子而不是酶促合成反应所生成的拷贝;可对合成的寡核苷酸进行测序,用以分析诸如甲基化等DNA修饰的情况,通过化学保护及修饰干扰实验来研究DNA的二级结构及蛋白质-DNA相互作用。比较繁琐费时,过长序列有困难PCR法只需少量

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