河北香菊总黄酮的富集与含量测定

河北香菊总黄酮的富集与含量测定【摘要】目的测定香菊总黄酮含量。方法采用大孔吸附树脂富集，60%乙醇洗脱，得总黄酮，采用紫外分光光度法进行含量测定。结果操作简便，总黄酮的平均含量为%。结论富集率较高且稳定，测定方法准确可靠。

【关键词】河北香菊总黄酮富集

ConcentrationandDeterminationoftheFlavonoidofHebeiBalmyChrysanthemum

Abstract:ObjectiveTodeterminetheflavonoid.MethodsUsingmacroporousresincolumnchromatogram,toget60%ethanolfraction.UsingUVspectrumtodeterminetheflavonoidofthispart.ResultsThemeancontentoftheflavonoidwas%.ConclusionTherateofconcentrationishighandstable,themethodofdeterminationisreliable.

Keywords:Hebeibalmychrysanthemum;Flavonoid;Concentrate

菊花作为药食同源中药，具有疏风清热，平肝明目，解毒，降压之功效［1］。屈原的离骚就有“夕餐秋菊之落英”之句。菊花因其清爽的口感在中国文化中很受欢迎，在人们日常生活中广泛用作保健茶饮。有研究表明［2］，菊花挥发油解热，总黄酮降压，是其疏风清热、平肝明目的物质基础。河北香菊是河北省农科院培育的药用菊花新品种，是目前国内唯一浓香型菊花，其挥发油及总黄酮含量均明显高于其它同类产品，营养保健价值及药用价值均很大，开发前景广阔。故本文对河北香菊总黄酮的富集工艺进行了研究，并采用紫外分光光度法进行了总黄酮含量测定。为河北香菊药用及营养保健价值的进一步开发利用提供科学依据。

1材料与方法

材料

紫外分光光度计；D101型大孔吸附树脂；甲醇；金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷对照品为本实验室自制；河北香菊为河北省农科院药植所提供。

方法［3，4］

对照品溶液的制备精密称取金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷对照品mg,置于50ml容量瓶中，加入甲醇使之溶解，稀释至刻度摇匀，即得对照品溶液。

测定波长的选择取对照品溶液2ml置于25ml容量瓶中,定容，摇匀。将溶液加入比色皿中，于200～800nm波长范围内进行全波长扫描，分别于328，，208nm有吸收峰。用同样的方法测得供试品溶液分别于328，208nm有吸收峰。

标准曲线的绘制精密吸取上述对照品溶液，，，，，ml分别置于25ml容量瓶中，定容，摇匀，置于比色皿中，于选定的波长下测定吸收值A。用最小二乘法得回归方程，并测定线性范围。

总黄酮的富集称取一定质量干燥河北香菊，加入8倍量70%乙醇，于80℃下热回流h,滤出溶液后，再加入7倍量70%乙醇，于80℃下热回流h，合并滤液并适当浓缩，将上述浓缩液，滴加到大孔吸附树脂色谱柱上用蒸馏水洗脱，直至流出液Molish反应呈阴性，再用3000ml60%乙醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，并进一步浓缩至干膏，即得70%乙醇提取物经大孔吸附树脂60%乙醇洗脱部位。如此制得3批此干膏。

精确称取上述干膏mg，用甲醇制成25ml溶液，从中精确吸取ml置于25ml容量瓶中，用甲醇定容，即得供试品溶液。

方法学验证

精密度实验：精密吸取对照品溶液ml置于25ml容量瓶中，以甲醇定容。于选定波长下，重复5次测定其吸收值。

回收率实验：精密称取已恒重的上述干膏5份，每份4mg左右，分别精密加入1mg左右对照品，按“”项方法制备溶液，在选定的波长下测定吸收值，计算平均回收率及RSD。

重复性实验：精密称取“”项制备干膏mg。按“”项制备供试品溶液于选定波长下重复5次测定吸收值。

稳定性实验：取同一供试品溶液分别于0，2，4，8，12，24，48h测定吸收值。

样品含量测定：精密称取3批，每批3份，按项制备的60%乙醇部位干膏，共9份，每份约mg，并按项制备供试品溶液，于选定波长下测定吸收值，计算含量。

2结果

测定波长的选择

对照品和供试品的共有吸收峰328nm为检测波长。

标准曲线和线性范围以对照品质量浓度为横坐标,以吸收值为纵作标，绘制标准曲线，进行线性回归分析，得回归方程为Y=60+51X,r=2，线性范围～μg/ml。

精密度实验

取某一浓度对照品溶液，重复测定5次，RSD值为%。

加样回收率实验加样回收率实验结果表明，金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷对照品的平均回收率为%，RSD为%。结果见表1。表1加样回收率实验结果

重复性实验

重复性实验结果表明，第3批干膏中总黄酮含量为%，RSD为%。

稳定性实验稳定性实验结果表明，样品溶液在48h内稳定性良好，RSD值为%。

样品含量的测定3批60%乙醇部位干膏总黄酮含量分别为%，%，%。平均值为%，RSD值分别为%，%，%。结果见表2。表2样品中总黄酮的含量测定结果

3结论

本文探讨了60%乙醇部位总黄酮的富集工艺。结果发现，利用大孔吸附树脂富集，60%乙醇洗脱10个柱体积，所得总黄酮含量稳定且富集率较高，降压效果显着。该方法可以推广使用；本文采用紫外分光光度法测定了60%乙醇部位总黄酮含量，该方法精密度高，重现性好，测定结果准确，为此部位的进一步开发利用提供基础性研究。

【参考文献】

［1］贾凌云，孙毅，王春阳，等.菊花总黄酮提取工艺研究［J］.中药材，2003，26：36.

［2］戴敏，刘青云,李道中，等.菊花解热、降压作用的物质基础［J］.中药材，2001