牵引黄黄草水提取物对正常大鼠胆汁分泌量及血清l、gg、as和ai的影响

牵引黄黄草水提取物对正常大鼠胆汁分泌量及血清l、gg、as和ai的影响

乔伊草科植物。收载于《中药大辞典》和《四川中药志》。其性温、味甘,具有清热、利尿消肿、解毒、退黄等功效,主治黄疸、水肿、经闭,以及各型肝炎、胆囊炎、脂肪肝等,尤其对黄疸性肝炎疗效显著。但目前对赶黄草的现代研究很少,仅见几篇化学成分研究报道,少见药理研究报道。本文对赶黄草水提取物的利胆退黄作用进行了药理研究。1材料和方法1.1材料表面1.1.1检测试剂和试剂盒赶黄草水提取物(取市售赶黄草,每次用8倍量水煎煮1h,共2次,合并2次煎煮液,浓缩,备用);α-萘异硫氰酸酯(alpha-naphthylisothiocyanate,ANIT):Sigma生产,批号04903EC;优思弗胶囊(熊去氧胆酸):LosanPharmaGmbH生产,批号06B17277L;茵栀黄口服液:北京双鹤药业生产,批号272064;思美泰注射液:美国雅培公司生产,批号39S158E04;TBIL、ALT、AST检测试剂盒:上海荣盛生物技术有限公司生产,批号分别为20061030、20060920、20061012;ALP、GGT检测试剂盒:南京建成生物工程研究中心生产,批号分别为20061116、20061120。1.1.2动物合格scxkSD大鼠,雌雄各半,体重180~250g,SPF级,由南方医科大学实验动物中心提供,动物合格证号:SCXK(粤)2006-0015。1.1.3仪器紫外可见分光光度计:北京普析通用公司制造,型号:TU-1901。1.2方法1.2.1乌拉坦麻醉前处理取SD大鼠60只,随机分为空白对照组、茵栀黄口服液组、赶黄草水提取物低剂量组、赶黄草水提取物中剂量组、赶黄草水提取物高剂量组,共5组,每组12只。各组大鼠实验前禁食不禁水12h,实验时按10ml/kg腹腔注射10%乌拉坦溶液使其麻醉,开腹分离总胆管,于近肝脏端封闭,远肝脏端结扎,在封闭段朝肝脏方向剪一V字型缺口,插入口径约为0.6mm的塑料管,结扎固定,松开近肝脏端,待稳定15min后,收集30min内胆汁分泌量。给药各组分别通过十二指肠给与相应药物,空白组给予相应体积的0.9%生理盐水,分段收集胆汁(30、60、90、120min),测量收集到的胆汁体积。分别合并每只大鼠给药后收集到的胆汁,按照试剂盒操作测定TBIL值。1.2.2开腹后分离总有及其溶胶质模型取SD大鼠70只,随机分为正常对照组、假手术组、模型对照组、优思弗胶囊组、赶黄草水提取物低剂量组、赶黄草水提取物中剂量组、赶黄草水提取物高剂量组,共7组,每组10只,除正常对照组外,各组大鼠开腹后分离总胆管,上下端结扎后剪断总胆管,造成梗阻性黄疸模型,假手术组开腹后分离总胆管但不进行结扎,缝合。各组大鼠在手术后5d,按10ml/kg体重进行灌胃给药,1次/d,共10d,空白对照组、假手术组、模型对照组给等体积蒸馏水。末次给药后1h,各组大鼠眼眶取血,3000r/min离心10min分离血清,按照试剂盒操作方法测定其TBIL、AST、ALT、ALP、GGT值。1.2.3灌胃给药大鼠模型分组取SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型对照组、思美泰组、赶黄草水提取物低剂量组、赶黄草水提取物中剂量组、赶黄草水提取物高剂量组,共6组,每组10只,各组大鼠按10ml/kg体重进行灌胃给药,1次/d,共5d,其中思美泰组按照1ml/kg腹腔注射配制好的溶液,正常对照组、模型对照组给等体积蒸馏水。末次给药后1h,除正常对照组外,其余各组动物均腹腔注射100mg/kgANIT植物油溶液进行造模,造模后继续按剂量灌胃给药,1次/d,48h后各组大鼠取血,3000r/min离心10min分离血清,按照试剂盒操作方法测定其TBIL、AST、ALT、ALP、GGT值。2结果2.1多元引物对大鼠脏器脏器tbil含量的影响给药后赶黄草水提取物低、中、高剂量组各时间点的胆汁分泌量与空白对照组比较,均有显著性差异(P<0.01或0.05),说明赶黄草水提取物能够显著提高正常大鼠胆汁分泌量;此外,赶黄草水提取物低、中、高剂量组的胆汁中TBIL含量与空白对照组比较,均无显著性差异(表1)。提示赶黄草水提取物能促进正常大鼠胆汁的分泌,但对胆汁中TBIL的含量无明显影响。2.2不同给药剂量对出现梗阻性对tbir、alt和ast活性的影响赶黄草水提取物低、中、高剂量组均能显著降低胆管结扎大鼠血清中TBIL含量、ALP活性、GGT活性、ALT和AST活性(赶黄草水提取物低、中、高剂量组的TBIL含量、ALP活性、GGT活性、ALT和AST活性与模型对照组比较,P<0.01或0.05,表2),提示赶黄草水提取物能够抑制胆管结扎所致的梗阻性黄疸,具有较好的退黄功效。2.3不同剂量利用p活性、降血活性、alt和ast活性对k-ras基因突变的影响赶黄草水提取物低、中、高剂量组均能显著降低ANIT所致大鼠血清中TBIL含量、ALP活性、GGT活性、ALT和AST活性(赶黄草水提取物低、中、高剂量组的TBIL含量、ALP活性、GGT活性、ALT和AST活性与模型对照组比较,P<0.01或0.05,表3),提示赶黄草水提取物能够抑制ANIT所致的胆汁淤积,具有显著退黄功效。3中草药对对大鼠脏器病理学的作用黄疸是由于胆色素代谢障碍,血浆中胆红素含量增高,使皮肤、巩膜、粘膜等被染成黄色的一种病理变化和临床表现。按病因学分为溶血性、肝细胞性、胆汁淤积性和先天性非溶血性黄疸。胆汁淤积性黄疸又分为肝内胆汁淤积性黄疸和肝外胆汁淤积性黄疸。黄疸可引起机体多系统的改变,包括中枢神经系统功能障碍、继发性胆汁性肝硬化、肝损伤、肝细胞凋亡、脂肪泻、内毒素血症、心动过缓、心肌收缩力下降、血压下降、肾功能不全、免疫功能失调等。因此积极治疗黄疸有重要意义。目前治疗黄疸的西药主要着眼于改善肝功能,增加胆红素代谢和排泄,增加胆汁分泌;而中医药多以清热解毒、利湿退黄为主要治疗方法,兼顾活血、化瘀。赶黄草为苗族民间草药,在民间有悠久的用药史,被誉为“神仙草”,临床可用于治疗各种急慢性肝炎、肝源性胃及十二指肠溃疡、肝纤维化和药物性肝损伤等,是中成药肝苏颗粒的主药。有研究者从赶黄草的水溶性物质中分离得到具有抗乙肝病毒和保