特殊细菌药敏试验的规范化操作

特别细菌药敏试验的标准化操作一、目前我国细菌药敏试验现状20CLSI在同一标准下进展质量掌握活动。当前，微生物试验室对常见临床分别细菌的药物敏感试验的水平已有了显著的提高，但对特别细菌的药敏试验的各个环节的标准操作还不能得到普及，对目前还无折点的细菌能否做药敏试验，以及如何推断细菌的药物敏感和耐药，仍旧概念模糊，有待进一步标准和普及。目前常见错误做法：〔一〕铜绿假单孢菌的药敏推断标准用于其他非发酵细菌；嗜血杆菌的标准用于卡他莫拉菌等的错误做法时有发生。〔二〕借用同属细菌敏感标准〔三〕借用同类抗生素的敏感标准二、各菌属的药物敏感性报告及试验方法的CLSI药敏标准〔一〕“嗜麦芽”菌属药敏报告标准CLSI药物名称纸片含量ug/片RIS米诺环素30≤1415-18≥19左氧氟沙星5≤1314-16≥17复方诺明1.25/23.75≤1011-15≥16CLSI药物名称SIR替卡西林/棒酸≤16/232/2-64/2128/2头孢他定≤816≥32米诺环素≤48≥16左氟沙星24≥8复方诺明≤2/38-4/76氯霉素≤816≥32〔二〕无折点细菌的药物敏感试验报告其他药物的敏感性报告:CLSIMIC〔S、I、R〕，MICS、I、R。不要用认为相近细菌的折点代替报告S、I、R，这会误导医生用药。〔三〕洋葱伯克霍德菌的药物敏感试验药物名称纸片含量药物名称纸片含量Ug/RIS片头孢他定30≤1718-20≥21美罗培南10≤1510-19≥20米诺环素30≤1415-18≥19复方诺明1.25/23.75≤1011-15≥16CLSI药物名称SIS替卡西林/棒酸≤16/232/2-64/2≥128/2头孢他定≤816≥32美罗培南≤48≥16米诺环素≤48≥16左氟沙星≤24≥8氯霉素≤816≥32复方诺明≤2/38-≥4/764的折点。〔四〕莫拉菌属的药物敏感试验报告有过报道的病例有该菌属引起的眼结膜炎、气管炎、肺炎、脑膜炎、脑脓肿、心包炎和心内膜炎。试验室药敏报告只能报告MIC值但不能报告敏感性。文献报告的资料是推断性。〔五〕金黄杆菌属的药敏试验报告管有关。CLSI未公布标准操作方法和敏感折点，药敏试验可报告MIC值。该菌属耐药特点：对氨基糖甙类、β-内酰胺类、四环素类、氯霉素类自然耐药；对治疗革兰阳性细菌药物利福平、红霉素、克林霉素、司帕沙星、复方诺明和万古霉素敏感。〔六〕丛毛菌属和食酸菌属的药敏试验推举用肉汤稀释方法或E-test方法，报告MIC值，不适合用纸片药敏方法。〔七〕产碱杆菌属、无色杆菌属和苍白杆菌属的药敏试验MICMIC1．粪产碱杆菌是产碱杆菌的代表株对氨苄西林、氨曲南和庆大霉素耐药。酮和氯霉素耐药，但对派拉西林、替卡西林/棒酸、亚胺陪南、复方诺明及抗假单孢菌头孢菌素敏感。β-内酰胺类耐药，但对亚胺陪南、复方诺明、氨基糖甙类、氟喹诺酮类和四环素敏感。〔八〕布鲁杆菌属药敏试验，β-内酰胺类耐药和氟喹诺酮类有高的体外活性与临床疗效不全都。热病推举首选药物是多西环素加庆大霉素或链霉素。〔九〕军团菌药敏试验E-testMICβ-内酰胺类体外敏感但体内疗效差。〔十〕弯曲菌科细菌的药敏试验CLSIM100-S162006抗生素的可承受范围和质量掌握标准操作程序。常寄生于人的牙周黏膜，可引起人胃肠炎和腹泻，胎儿弯曲菌可引起免疫低下患者菌血症。热病推举对空肠弯曲菌首选药物为红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、多西霉素和克林霉素。幽门螺杆菌对克林霉素的折点是1ug/ml硝唑在体外敏感试验没有标准。〔十一〕厌氧细菌的药敏试验由于大多数用于厌氧细菌感染的药物对临床有很好的预期效果，所以并不推举做常规的厌氧菌药敏试验,但在严峻厌氧菌MICMIC药效学。β-内酰胺酶，局部菌株产生超广谱β-内酰胺酶。越来越多的梭杆菌产生β-内酰胺酶导β-内酰胺酶抗生素耐药。〔十二〕真菌的药敏试验效的全都性至今是本领域需要探讨的重要课题。酵母样真菌药敏试验酵母样真菌的药敏折点1992，NCCLSM-27P，用于检测引起深部感染的酵母样真菌，包括念珠菌、光滑球似酵母和生隐球菌等菌对两霉素-B〔AmB〕、5-氟胞嘧NCCLS〔M-27A〕；2002NCCLS24h48h〔posaconazole〕、雷夫康唑〔ravuconazole〕和伏力康唑〔vuliconazoleVCZ〕MICM-27A2。CLSI药物名称SSDDIRFCZ816-32-≥64ICZ≤0.1250.25-0.5-≥15-FC≤4-8-16≥32AmB----VCZ≤1-2≥4CLSI敏感性FCZVCZS≥19≥17SDD15-1814-16R≤14≤13丝状真菌药敏试验1998M-38P，该方案包括微量稀释法和洪量稀释法，对曲霉菌、M-38A。是描述了测试方案，包括试剂配制、操作方法、质量掌握等程序。关于真菌药敏报告Candida.Krusel结果均应报告耐药。AMB伊曲康唑的折点仅适用于黏膜念珠菌感染,对侵袭性感染时全身性用药并不适用，建议仅报告MIC不报告S、I和R。对5-FC现有的标准是基于联合用药状况下的敏感折点，如单独用药，该标准不适用。MEC，即最低有效浓度〔能使真菌形态发生转变的最低药物浓度〕，用于评价药物的有效性。4．E-testE-test方法可适合多种真菌的药敏测试，包括酵母样真菌，如念珠菌、隐球菌状真菌，如曲霉菌、镰刀菌、毛霉菌、根为“0”或“1”分。例ATBFUNGUS为“0”或“1”分。例ATBFUNGUS2FUNGUS-3试条中氟胞嘧啶只有2个稀释浓度，一个高浓度，一个低浓度，报告以敏感度报告；80%,报告耐药“R”。8080%报告“SDD”。当两个浓度均无真菌生长报告敏感“S”。ATB〔可从bioMerieuxATBFUNGUS3〕。对于每一个抗真菌制剂，从低浓度开头，与生长比照比较，在结果记录纸上登记每一个杯的生长得分。FUNGUS-3B，最小抑菌浓度〔MIC〕是生长完全被抑制的测试杯的浓度〔得分为“0”的测试杯〕；对于氟康唑〔FCA〕〔ITR〕〔VRC〕，鉴于可能存在拖尾生长，最小抑菌浓度〔MIC〕“2”，“1”，或是“0”分。需要留意的是：在杯状凹外围的生长迹象应记录三.MICMIC2ugMIC对临床治疗更有价值。〔一〕抗真菌药敏试验与临床的相关性MIC≤0.125ug/ml0.25-0.5ug/ml，≥1.0ug/ml400mg/d,MIC1.56ug/ml耐药；MCZMIC100；KCZCMCC，白念假设耐药，对其他唑类可穿插耐药。5-FCMIC≥32ug/ml，敏感值为≤4ug/ml；AmBMIC0.8ug/ml可以死亡，NCCLS1.0ug/ml。FCZ16-32ug/ml，但64ug/ml床用药的桥梁。组织浓度100mg/d6μg/ml组织浓度100mg/d6μg/ml400mg/d20-30μg/ml800mg/d40-60μg/mlRexJH,ClinMicrobRev1993,6:367-381〔二〕体外抗真菌药敏试验与体内疗效的全都性M27-A：600MIC150AIDSMIC64μg/ml，并显示MIC90-60对治疗有效〔MahmoudA.G,JCM1996,34:489-495；RexJ,CID2002,35:982-989〕。MIC剂量＜4μg/ml100mg/dMIC剂量＜4μg/ml100mg/d4-8μg/ml200mg/d8-16μg/ml400mg/d16-32μg/ml800mg/dHopenthaletal,DiagnMicrobInfectDis,2004,48:153-160〔三〕真菌药敏试验的应用原则败应当考虑到药敏；当高危患者中念珠菌定植时，建议菌种鉴定，建立当地药敏试验流行病学资料，应当阅历性治疗，当为念珠菌血症及深部感染时，建议鉴定，应用唑类药物时应当考虑药敏试验，并定期把握当地药敏试验流