实验血药法测定扑热息痛片的生物利用度1(精)

实验二血药法测定对乙酰氨基酚片的生物利用度一、实验目的：掌握血药法测定固体口服制剂生物利用度的原理及方法。掌握药动学参数的求算。熟悉生物利用度在药物评价中的意义。了解血清生物样品的处理方法。二、仪器：1．仪器：具塞离心管10ml3支;20ml16支；刻度吸管1ml1支;5ml3支;10ml1支；滴管2〜3支；玻璃漏斗3〜4cm直径8个;5ml塑料离心管8支；紫外－可见分光光度计其他：滤纸、试管架、刀片、塑料夹、酒精棉球、脱脂棉、注射器、注射针头、兔盒等物件。2．试药：0.12N氢氧化钡溶液：取分析纯氢氧化钡19克，加新鲜煮沸放冷的蒸馏水溶解并稀释至1000ml,静置过夜，过滤即得。2%硫酸锌溶液：取分析纯硫酸锌20克，加蒸馏水溶解并稀释至1000ml即得。三、实验内容：．家兔空白血的采集：取体重3kg左右家兔一只，心脏取血约30ml,于10ml具塞离心管中，37°C水浴中保温1小时，以5000转/分的转速离心10min,取空白血清供标准曲线制备用。2．标准曲线的制备：精密称取扑热息痛对照品50mg，置100ml容量瓶中，以蒸馏水溶解，并添加至刻度摇匀，精密吸取10ml于50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度摇匀即成100卩g/ml的标准溶液，分别吸取表1中“标准液取量”于20ml具塞试管中，分别加定量蒸馏水使成10ml,然后各加上述血清1ml混匀，再各加0.12N氢氧化钡4.5ml，混匀，放置2分钟，再分别加入2%硫酸锌溶液4.5ml,混匀，即现出明显乳状浑浊，用双层滤纸过滤，去初滤液，收集续滤液于10~15ml干燥具塞试管中，以1号管溶液作空白对照，于245nm处测定吸收度(A),结果记录于表1。3．家兔体内血药浓度的测定：血样品的采集：取体重3kg的健康家兔一只，实验前二天下午禁食，实验当日晨耳静脉取血4ml,作为空白，然后即口服给予扑热息痛片，剂量为500mg/只，在给药后0.25、.50、1、2、3、4、5小时耳静脉采血4ml,供测定血药浓度用，喂药4小时后可以喂食，采血时间于表2。血药浓度测定：将采取的血样按前空白的处理方法处理后，精密吸取血清1ml,加蒸馏水10ml,余下按标准曲线制备中“……再各加0.12N氢氧化钡溶液4.5m1”起进行操作，测得值记于表2。

表1标准曲线测定结果管号12345678标准液取量(ml)00.40.81.21.62.02.42.8血药浓度C(yg/ml)04080120160200240280H2O(ml)109.69.28.88.48.07.67.2吸收度A表2血药浓度测定结果表2血药浓度测定结果兔重：给药量：给药时间：四、实验结果及数据处理：1．标准曲线的回归分析及绘制：以表1中吸收度A对标准曲线中血药浓度C直线回归，求得直线回归方程A=a+bC,并计算相关系数r。以A为纵坐标，C为横坐标绘制标准曲线。测得样品A值，代入回归方程，计算出C值2．药时曲线的绘制：表2中的实验数据，以浓度C对时间t作图，即得药物浓度经时变化曲线。3．消除速率常数k的求算：文献载扑热息痛的体内过程系一室模型，血管外给药一室模型动力学方程的解为：C—A(e-k一e-kat)A—其中kFXA—其中ao、V\k-k)假设k>k，当t充分大时，①式中e~kd首先趋向于零，而可忽略，故①式可改写为:a②式两端取对数：IgC=—IgC=—k2.303t+lgA用药时曲线中尾部近似于直线上的3点，即尾部数据，代入式③作直线回归，求出系数：a=b=贝9：k=-2.303bA=Lg-1a半衰期匕2的计算：t=0.693/k1/2药时曲线下面积AUC0的计算：0—»8将表2中时间t和浓度C代入下式即可求出AUCO0—>81CAUC=_》[(C+C)(t-1)]+亠0tw2(a-1)aa(a-1)k扑热息痛片相对生物利用度计算：若已知扑热息痛片某一标准制剂(如半合成脂肪酸脂)的AUC0=1093(Mg-h•ml-1)，则用下式可计算出扑热息