千柏鼻炎片的质量评价

千柏鼻炎片的质量评价

千柏树鼻的片剂含有在中国的药店中。它由七味药物组成，如千里光、卷柏、决明子等。清热解毒、活血祛风、宣肺通窍,为治疗各类鼻炎、鼻窦炎的常用中成药。原质量检验标准仅有千里光的薄层色谱鉴别,对处方中的主药卷柏缺定性、定量检验。穗花杉黄酮是卷柏药材的特征性化学成分,可作为控制卷柏质量的指标性成分。本实验利用HPLC对千柏鼻炎片中穗花杉黄酮进行了定量分析,为千柏鼻炎片的内在质量评价提供了可靠的方法。1合成设药号Agilent1100色谱工作站。穗花杉黄酮对照品(含量99.3%,自制);千柏鼻炎片(广东奇星药业有限公司,批号:9810068,2139;广东省信宜市制药厂,批号:030112;广东省惠州市中药厂,批号:20020328;广东粤华药业有限公司,批号:021101;广东怡康制药有限公司,批号:20020907;吉林修正药业公司,批号:20021001);聚酰胺(60～90目,浙江省台州市路桥四青生化材料厂);试剂均为分析纯,水为重蒸馏水。2方法和结果2.1流动相、检测波长色谱柱:Elite-ODS(5μm,150mm×4.6mm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(60:40:1);流速:1.0mL·min-1;检测波长:330nm;柱温:25℃。2.2聚酰胺溶液的制备取样品20片,除糖衣,精密称定,研细,精密称取适量(约10片量),置具塞锥形瓶中,加入甲醇50mL,加塞,超声0.5h,滤过。用10mL甲醇洗涤残渣,合并甲醇,蒸至约5mL时加聚酰胺1g,搅拌均匀后蒸干。置已处理好的聚酰胺柱(3g,内径1cm)上,先后分别用水、20%乙醇、70%乙醇各150mL洗脱,收集70%乙醇洗脱部分,蒸干,残渣加甲醇使溶解,并用甲醇定容于5mL量瓶中,摇匀备用。2.3对照品储备液取穗花杉黄酮,精密称定后置于50mL量瓶中,加甲醇20mL,超声振荡使溶解,放冷,甲醇定容至刻度,溶液浓度为112.0μg·mL-1,作为对照品储备液。2.4阴性样品溶液的制备按处方和工艺制备不含药材卷柏的阴性样品,按“2.2”项下方法制得阴性样品溶液。结果在相应的保留时间处,阴性样品无穗花杉黄酮的色谱峰。2.5标准曲线及分析精密量取对照品标准储备液,按一定梯度加甲醇稀释,得到2.8,14.8,28.0,56.0,112.0μg·mL-1不同浓度的对照品溶液,分别进样10μL,测定峰面积。以峰面积(y)对浓度(x,μg·mL-1)进行回归分析,结果回归方程为y=22.92+45.14x,r=0.9999(n=5)。表明穗花杉黄酮在2.8～112.0μg·mL-1的线形关系良好。2.6精密度实验取穗花杉黄酮溶液(28.0μg·mL-1)10μL,连续进样,测定峰面积,RSD=1.94%(n=5)。2.7重复实验取同厂家同批号样品5份,按“2.2”项下方法制备,“2.10”项下方法测定,结果穗花杉黄酮RSD=2.13%。2.8:1sb1ml-1ml取对照品穗花杉黄酮溶液(28.0μg·mL-1),在12h之内每隔3h进样考察,结果RSD=1.88%(n=5)。表明穗花杉黄酮12h内稳定。2.9穗花杉黄酮标准储备液的制备取含量已知的样品(批号20020907)5份,精密加入一定量的穗花杉黄酮标准储备液,按“2.2”项方法制备,“2.10”项下方法测定,结果见表1。2.10样品测定分别制备各样品溶液,精密量取10μL,进样,以峰面积计算样品中所含穗花杉黄酮的含量,结果见表2。3结果的检测结果3.1因处方中化学成分复杂而相互干扰的原因,甲醇简单地加热回流或超声提取得到样品的HPLC分离效果并不好。经过多次实验比较,利用对黄酮类有选择性吸附的聚酰胺进行梯度洗脱,结果达到了较为满意的分离效果,这样既可避免主成分的损失,又清除了大量的其它干扰性化学成分,同时也更好地保护了色谱柱。3.2通过摸索,实验选择了C18硅胶为固定相,甲醇-水-冰醋酸溶液系统为流动相,检测波长为穗花杉黄酮的最大吸收330nm处,这样保证了检测的灵敏度。3.3作为处方主药的卷柏的特征性化学成分穗花杉黄酮,测定其含量应该具有特别的意义。实验结果表明,各生产企业的千柏鼻炎