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钙对废用性骨质疏松大鼠血清钙、血钙、锌、铜、akp、肝mda的影响
随着社会的发展和人民生活水平的提高,人口结构逐渐进入老龄化。老年人疾病,如骨质疏松症和心脑血管病,迅速增加。这些疾病可能导致骨折和瘫痪,导致骨葬,降低老年人的生活质量。有研究表明,废用性骨质疏松,使骨的结构损害,骨小梁变细、中断,数量减少等,从而造成显微骨折,又有研究证明了骨折患者血清中铜、锌等微量元素均发生变化。骨质疏松的主要病理机理为骨再建负平衡和骨转换加快,在这个过程中,血清各微量元素、矿物质含量、各种酶等也都要发生变化。本试验以废用性骨质疏松大鼠为模型来研究不同钙对骨质疏松大鼠体内血锌、血铜及血AKP(碱性磷酸酶),肝MDA(脂质过氧化物),以及对骨密度的影响,为预防废用性骨质疏松提供依据。1材料和方法1.1测试对象选用健康SD大鼠50只,雌雄各半,体重200.8±6.3g,由本院实验动物中心提供。1.2碳酸钙基础饲料:新乡医学院实验动物中心提供,含钙量7.200g/kg。碳酸钙:上海四联华工厂,分析纯;生物钙(骨钙):牛骨+白醋—高温高压2小时—绞碎成黄豆粒大小—过胶体磨—过匀质机—浆体—干燥制成牛骨钙粉剂。1.3推行废用性皮质松茸模型将实验动物随机分为5组,每组10只,单笼喂养。1组为正常对照组,喂基础饲料;2~5组为实验组,均捆绑左下肢,制造废用性骨质疏松模型,其中,2组:阳性对照组,喂基础饲料。3、4、5组除了喂基础饲料外,3组每公斤饲料补加碳酸钙1.440g,4组每公斤饲料补加骨钙1.440g,5组每公斤饲料补加骨钙2.880g。1.4碱性磷酸酶活性测定实验8w,动物眼内毗采血,原子吸收分光光度法测定血清钙、锌、铜;硫化巴比妥酸法测丙二醛(MDA,表示脂质过氧化物含量);用改良金氏法测定碱性磷酸酶(AKP)。BH-6012二维扫描单光子骨密度仪(北京核仪器厂)测动物左侧后肢干骺处骨矿物含量(BMC,g·cm-1)和骨密度(BMD,g·cm-2),用骨模型校准仪器。以镅(241Am)作为放射源。1.5处理数据用SPSS统计学软件包进行统计学处理(t检验)。2结果2.1测试动物的体重各组动物的身长、体重无显著性差异(P>0.05)。见表1。2.2骨密度的测量与阴性对照组相比,阳性对照组骨密度、骨矿物质含量显著降低(P<0.01),而各补钙组下降不明显(P>0.05)。见表2。2.3钙、锌、铜及锌比对与阴性对照组比阳性对照组血清钙、铜、锌及铜/锌明显增高(P<0.05),而血清锌明显降低(P<0.05),而补钙各组血清钙、锌、铜及铜/锌改变不显著,与阳性对照组比补钙各组血清锌明显增高、铜/锌比值明显降低(P<0.05)。见表3。2.4肝mda与血液akp与阴性对照比阳性对照组的肝MDA及血AKP明显升高;与阳性对照组比各补钙组的肝MDA及血AKP明显降低。见表4。3锌与骨折的关系有报道降低老年人生活质量的重要因素之一是骨折。我国老年骨质疏松的发生率男性为60.72%,女性为90.48%。补钙是增加骨密度、预防骨折的方便有效方法,但不同的钙吸收率差别很大,尤其是对废用性骨骼中钙利用的研究,对预防废用性骨骼骨密度降低有着重要的意义。本研究补钙使各实验组骨密度和骨矿物质含量显著升高,各实验组大鼠骨密度和骨矿物质含量基本达到正常对照组的水平,同时表明补碳酸钙和生物钙的作用一致,均可预防和延缓大鼠废用性骨质疏松的发生。锌在骨骼中的作用近几年才被发现。骨是体内锌存在的主要器官,在骨中锌不仅存在于细胞内,也存在于胶原基质中,骨骼中锌的含量较高,机体缺锌可导致骨代谢异常。体内AKP、胶原酶和碳酸酐酶均参与骨的代谢,这3种酶都是含锌酶,锌是酶活性中心的重要组成成分。Relea,P等人发现骨质疏松病人中血锌水平较低,尿锌增加。资料表明锌缺乏可使动物及人体生长发育迟缓,骨龄延迟,缺乏严重时尚可引起动物骨骼畸形。锌缺乏也与妇女经绝期后骨质减少,骨质疏松密切相关。锌可以促进动物骨发育以及骨钙化,实验动物骨折给予锌治疗能加速骨折愈合。并促进体外培养的MC3T3—E1成骨细胞蛋白质及DNA的合成。本实验中发现废用性骨质疏松模型中的血清锌显著下降,补钙后使废用性骨质疏松大鼠的血清锌显著升高,不同钙组间无显著性差异。铜也是构成许多金属酶的主要成分,铜缺乏致骨代谢异常。缺铜主要影响成骨细胞的活性,而破骨细胞活性正常。铜也是单胺氧化酶系的重要成分,血清铜的增加,可使体内氧化基的形成增多,导致膜脂质过氧化速率增高,使MDA升高。MDA是反映体内各元素水平的指标。AKP是成骨细胞的标志酶,参与调节钙化过程,它能分解磷酸盐化合物,产生游离磷酸,磷酸与细胞间质中钙结合形成磷酸钙。AKP是反映成骨细胞在体外分化为成熟骨细胞及基质钙化的一个重要指标。血清碱性磷酸酶又是一种锌依赖酶,它可以反映体内锌的营养状况。血清碱性磷酸酶主要反映骨形成和骨转换的指标,它与钙的营养状况密切相关。而骨质疏松即是一种显微骨折,Cu、Zn等元素对其治疗也有一定的作用,故在补钙防治骨质疏
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