腐植酸钠对绵羊瘤胃消化代谢的影响

腐植酸钠对绵羊瘤胃消化代谢的影响

腐植酸钠是腐植酸钠。这是一种用化学法提出的有机弱酸盐，具有良好的耐候性，是一种罕见的黑色粉末或黑色颗粒，密度为1.33.1.44。它在水中很可溶，是一种性质很弱的离子。它对重金属离子也有很强的离子交换能力，具有吸附和脱离作用。腐植酸及其复合盐类作为饲料添加剂在畜禽养殖业上的应用效果已有一些报道。唐志成等(2000)用腐植酸和尿素饲喂中国荷斯坦奶牛,结果奶牛产奶量得到了提高。马玉胜(1995)用腐植酸钠饲喂奶牛(每日13g),可提高11%的产奶量。王内贵等(2001)用腐植酸钠-尿素在小尾寒羊上试验,处理组比对照组1个月多增重4.33kg。Islam等(2005)试验证明用腐植酸钠饲喂家禽,有减少粪便异味,加速动物生长的作用。高静等(2007)将主要成分为饲料级黄腐植酸的动物营养素均匀拌入饲喂奶牛的精饲料中,结果表明,添加动物营养素后牛奶产量增加、质量提高,有效产奶期延长。但是,关于腐植酸钠对动物消化代谢作用的研究报道很少。陈伟华等(1983)报道,在饲喂含尿素的山羊日粮中添加腐植酸钠,可促进瘤胃中微生物的生长,但不能延缓尿素在瘤胃中的分解。本文在前人相关试验基础上,研究添加不同水平的腐植酸钠对绵羊瘤胃消化代谢的影响,为合理利用腐植酸钠和认识其作用机理提供进一步的科学依据。1材料和方法1.1腐植酸钠试验用腐植酸钠购自新疆双龙腐植酸有限公司,腐植酸含量(干物质基础)63.4%,水分含量14.6%,pH值9.9。1.2腐植酸钠对需要添加的反应物的影响选4只安装有永久性瘤胃瘘管和十二指肠瘘管的中国美利奴(新疆型)细毛羊,采用4×4拉丁方设计,分别添喂腐植酸钠0、2、4、6g/d(分别称之为腐植酸钠0g组、2g组、4g组和6g组),以研究添加不同水平的腐植酸钠对绵羊瘤胃消化代谢的影响。每期试验预试期11d,正试期6d,正试期前3d采集瘤胃液,后3d采集十二指肠食糜。1.3玉米秸秆的精特性试验动物单笼饲养,每只羊每日喂给混合精料320g(混合精料配方见表1),棉籽壳400g,分别于9:00、21:00两次等量饲喂,自由采食粉碎的玉米秸秆,先精后粗,自由饮水。腐植酸钠每天分两次等量混合于精料中让动物充分采食。每日记录试验羊实际采食量。1.4样品的采集和处理1.4.1饲料样品的收集正试期开始,连续采集6d的剩料,阴干混合后以四分法采样贮存于样品袋中,同时采集所喂的精、粗料样品贮存,备常规分析。1.4.2瘤ph测定以正试期早晨采食时间为0h,分别于0、1.5、3、6、9、12h采集瘤胃液30mL,立即测定其pH值,然后用200目的尼龙袋过滤,于滤液中滴加2～3滴饱和氯化汞溶液,标号,-20℃冷冻保存备测。连续采集3d,测定时将3d所采集的同一时间点的样品等量均匀混合。1.4.3东南角相对人的东南角,把食糜作为一个时间点的食糜量表1,2.在正试期的后3d采集十二指肠食糜样品。分别于正试期第4天的1:00、7:00、13:00、19:00,第5天的3:00、9:00、15:00、21:00,第6天的5:00、11:00、17:00、23:00,各采集十二指肠食糜20mL,将每只羊12个时间点的食糜等量混匀,于-20℃冰箱内保存,待测。1.5纤维原料的测定瘤胃液pH值采用Cyberscan510型pH计直接测定;钙的测定参考傅启高(1996)方法测定;NH3-N采用氧化镁蒸馏法测定,每次瘤胃液蒸馏量为2mL;样品干物质、有机物、木质素、纤维素、酸性洗涤纤维(ADF)、中性洗涤纤维(NDF)、磷等的测定根据动物营养常规分析方法测定(杨胜,1993)。粗蛋白测定采用RapidNⅢ(德国ElementarAnalysensysteme生产)氮分析仪测定。瘤胃液中乙酸、丙酸、丁酸含量参考赵景婵等(2001)的方法,采用AtlantisdC18(Waters公司,5μm,4.6mm×150mm)柱反相高效液相色谱法(RP-HPLC)进行分离,外标法定量。1.6统计分析数据统计分析采用SPSS11.0软件进行分析,试验数据以平均数±标准差表示,均值的多重比较采用Duncan法进行。2腐植酸钠对监狱大鼠体内瘤胃液氨态氮、程序和基本蛋白的影响2.1添加不同水平的腐植酸钠对绵羊瘤胃液pH的影响由表3可知,无论添喂腐植酸钠与否,采食后各组绵羊瘤胃液pH值表现出相同的变化趋势,在采食后0～1.5h,各组的pH值均缓慢上升,且在1.5h达到峰值,从1.5～6hpH都有所下降,并在6h到达最低点。采食后3h,添喂腐植酸钠都显著降低了瘤胃液pH值(P<0.05),各腐植酸钠添加组之间则很接近(P>0.05)。2.2添加不同水平的腐植酸钠对绵羊瘤胃液NH3-N浓度的影响由表4可知,各试验组瘤胃液NH3-N浓度表现为相同的波动性变化。采食后1.5h,各组瘤胃液NH3-N浓度均出现峰值;采食后3h,各腐植酸钠添加组瘤胃液氨态氮浓度分别比对照组降低了13.75%(P<0.01)、18.09%(P<0.01)和16.03%(P<0.01),但各腐植酸钠添加组之间没有显著不同。采食后9h,与6g组相比,2g组、4g组绵羊的瘤胃液NH3-N浓度显著下降(P<0.05)。2.3添加不同水平的腐植酸钠对绵羊瘤胃液挥发性脂肪酸浓度的影响由表5可以看出,对乙酸而言,在采食后3h,各腐植酸钠添加组的瘤胃液乙酸显著高于对照组(P<0.05),在其余各时间点均不显著。采食后3h,各腐植酸钠添加组的瘤胃液丙酸浓度高于对照组(P<0.05);在采食后9h,4g组和6g组的瘤胃丙酸浓度高于2g组和对照组(P<0.05)。在采食后9h和12h,各腐植酸钠添加组的瘤胃液丁酸浓度高于对照组(P<0.05)。总挥发性脂肪酸浓度在采食后9h,各腐植酸钠添加组高于对照组(P<0.05),但4g组和6g组之间差异不显著。2.4添加不同水平的腐植酸钠对干物质等在瘤胃的表观消失量(率)及到达小肠粗蛋白的影响从表6可以看出,随着腐植酸钠添加量的增加,干物质、有机物和纤维素的前胃消失量和消失率均有增加的趋势,且添加量为4g/d时各量达到最大值,添加量为6g/d时各量却有所下降。各试验组与对照组相比,4g组干物质、有机物的前胃消失量和消失率差异显著(P<0.05),6g组干物质的前胃消失量差异显著(P<0.05);纤维素和半纤维素的消失量和消失率有所提高,但各组之间差异不显著(P>0.05)。微生物蛋白到达小肠量有随腐植酸钠添加量的增加而增加的趋势。2g组、4g组和6g组到达小肠的微生物蛋白量分别比对照组提高了5.02%(P>0.05)、9.63%(P>0.05)和14.7%(P>0.05)。2g组和4g组过瘤胃蛋白到达小肠量分别比对照组增加了3.58%和6.37%,但两组均与对照组差异不显著(P>0.05)。3腐植酸钠添加对酶系统和微生物合成的影响3.1添加不同水平的腐植酸钠对绵羊瘤胃发酵参数的影响瘤胃液pH值是反映瘤胃发酵水平的综合性指标。一般情况下瘤胃pH值变动范围在5.0～7.5之间,并随采食时间呈周期性变化,通常于采食后2～6h达最低值(韩正康,1988)。在本试验条件下,添加腐植酸钠后瘤胃内pH处在这一变化范围之内。在本试验中,各腐植酸钠添加组的瘤胃液pH值在采食后3h显著低于对照组,在采食后9h仍有相似的作用趋势。各腐植酸钠添加组的瘤胃液氨态氮浓度在采食后3h极显著低于对照组(P<0.01)。其原因可能是添加腐植酸钠具有吸附氨的作用(John,2006),也与腐植酸钠促进瘤胃微生物合成有关(陈伟华等,1983)。乙酸、丙酸、丁酸等挥发性脂肪酸是瘤胃发酵的主要终产物,其含量和组成反映了瘤胃消化代谢活动程度。在本试验中,乙酸、丙酸、丁酸的浓度在采食后的各个时间的变化与瘤胃液pH具有相似的变化规律,各腐植酸钠添加组瘤胃的乙酸浓度在采食后3h、丙酸浓度在采食后3h和9h、丁酸浓度在采食后3h和9h分别高于对照组,说明腐植酸钠对瘤胃消化代谢具有一定的促进作用。3.2添加不同水平的腐植酸钠对干物质等在瘤胃的表观消失量(率)及微生物合成的影响添加腐植酸钠对干物质、有机物等在瘤胃消化的影响报道少见。在本试验条件下,添加腐植酸钠显著提高瘤胃内干物质和有机物的瘤胃消失量和消失率(P<0.05)。纤维素和半纤维素的前胃消失量和消失率有随添加量的增加而增加的趋势,但差异不显著。这与上述腐植酸钠对绵羊瘤胃发酵参数的影响相吻合。随着腐植酸钠添加量的增加,微生物蛋白到达小肠量有增加的趋势(P>0.05),提示腐植酸钠具有促进瘤胃微生物合成的作用。陈伟华等(1983)报道,在饲喂含尿素山羊的日粮中添加腐植酸钠,可促进瘤胃微生物的生长。蒋安文等(1999)试验证明,腐植酸钠可以吸附在尿素消化中被瘤胃微生物分解出来的过多氨气,被腐植酸钠