环境卫生检测方法

环境卫生检测方法目录：一、微生物检验室规则二、水样检验方法三、空气沉降菌检验方法四、工作台表面采样与测试方法五、工人手表面采样与测试方法六、评价标准七、采样频率一、微生物检验室规则进入检验室应穿着工作衣，进入无菌室应戴口罩、帽，换专用鞋样品检验前应登记生产日期、批号，详细记录样品检验序号、检验日期、检验程序和结果。室内应经常保持清洁，样品检验完毕后及时清理桌面。凡是要丢弃的培养物，在常压下煮沸后弃去，再应高压灭菌处理；污染的玻璃器皿应洗刷干净后高压杀菌、备用。无菌室应备有专用金属勺、镊子、剪刀，每次使用前和使用后应在酒精灯火焰上烧灼灭菌。无菌室应常备有75%的酒精棉球，用于样品表面消毒以及意外污染消毒。无菌室每次使用前后，用紫外线灯照射30min。使用过的吸管，放在专用的托盘中，要用大量的清水冲洗后进行灭菌处理、备用，不得放在桌面上。工作结束离室前用肥皂洗手冲净，脱去工作衣、帽、专用鞋，检查水、电、门、窗、检验台面，认为妥善后方可离室。水样检验方法操作步骤1.1打开取样阀排放小量液体1.2用75％酒精棉由内到外消互取样阀1.3点燃酒精棉，并使其火焰灼烧取样口15－20秒1.4打开阀门排放样品至阀门完全冷却，取样约150－200ml于已灭菌的三角瓶中。1.5无菌操作吸1ml样品于灭的培养皿中，另入经煮沸后冷却至45℃±1℃的培养基10－152.培养条件检验项目培养基培养温度培养时间培养箱类型好气营养36±124±2小时电热恒温箱空气沉降菌检验方法1.样品采集在动态下进行。室内面积不超过30m2，在对角线上设里、中、外三点，里、外点位置距墙1m；室内面积超过30m2，设东、西、南、北、中5点，周围4点距墙1m。采样时，将含营养琼脂培养基的平板(直径9cm)置采样点(约桌面高度)，打开平皿盖，使平板在空气中暴露5min。2细菌培养在采样前将准备好的营养琼脂培养基置36℃±1℃培养24h，取出检查有无污染，将污染培养基剔除。将已采集的培养基在6h内送实验室，于36℃±1℃培养48h观察结果，计数平板上细菌菌落数。3菌落计算肉眼直接观察计数，标记或在菌落计数器上点然后用5－10倍放大镜检查，是否遗漏空气中细菌菌落总数（cfu/m3）＝平板面积（cm2）*暴露时间（min）四、工作台表面采样与测试方法4.1样品采集工作台：将经灭菌的边长为5cm×5cm的（灭菌）取样板放在被检物体表面，用一浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。4.2细菌菌落总数检测将已采集的样品在6h内送实验室，每支采样管充分混匀后取1mL样液，放入灭菌平皿内，倾注营养琼脂培养基，每个样品平行接种两块平皿，置36℃±1℃培养48h，计数平板上细菌菌落数。4.3计算方法：细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落的平均值*采样液稀释倍数/采样面积（cm2）五、工人手表面采样与测试方法5.1工人手：被检人五指并拢，用一浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。5.2细菌菌落总数检测将已采集的样品在6h内送实验室，每支采样管充分混匀后取1mL样液，放入灭菌平皿内，倾注营养琼脂培养基，每个样品平行接种两块平皿，置36℃±1℃培养48h，计数平板上细菌菌落数。5.3计算方法：细菌菌落总数（cfu/只手）=平均菌落*稀释倍数六、评价标准：一般说来，不同的产品对食品接触面、空气等的要求是不相同的，还有不同的时间段的要求也不同，比如消毒后和工作过程中肯定指标不一样。要根据自己的实际情况，以大量的检测数据为基础才能确定。规定的车间空气是（直径9cm平板，5分钟沉降法）清洁区小于45个/平皿，非清洁区小于500个/平皿；工人的手开工前（消毒后）小于100个/只手，经过清洁水清洗消毒后的设备和工器具食品接触面细菌总数低于100个/cm2为宜对卫生要求严格的工序应低于1O个／cm2沙门氏菌及金黄色葡萄球菌等致病菌不得检出。相应的测试方法和计算公式引用GB15979《一次性使用卫生用品卫生标准》中的附录D：生产环境采样和测试方法。七、采样频率