广州市褐云品牌玛氏杆菌广州管圆线虫病第期幼虫调查

广州市褐云品牌玛氏杆菌广州管圆线虫病第期幼虫调查

广州管圆虫病被认为是一种全球感染。近年来，这种疾病已在台湾、浙江和福建等地传播。人们吃了蜗牛后，出现了许多流行的病例。2006年8月，这种疾病在北京爆发，广州的可疑病例和疫情也在增加。2000年7月和2004年7月我们对广州市以褐云玛瑙螺为主的螺蛳感染广州管圆线虫情况进行了调查,结果报告如下。1材料和方法1.1螺肉的广州管圆线虫第期幼虫感染途径观察将螺蛳按不同收集地点分组,然后逐只螺编号、称重,去壳,再称螺肉净重,将螺肉剁碎,每1g螺肉加入10mL人工消化液(在800ml水中加饱和盐酸7ml和胃蛋白酶2g后加水定容至1L),37℃恒温箱中消化4~5h经筛网过滤,滤液经15~20min静置后的沉淀用生理盐水洗2次,吸取沉渣置于平皿中,解剖镜下检查广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫。1.2小鼠sd织物将分离的第Ⅲ期幼虫通过灌胃感染实验动物。感染虫荷为:BALB/c小鼠40~60条/只;SD大鼠80~100条/只。在感染后不同时间剖杀动物,分别获取4期、5期幼虫和成虫,拍摄记录虫体特征。2结果2.1褐云玛瑙螺感染情况2000年对广州市天河区、海珠区和越秀区三区共计5个地点进行了采样调查,共查褐云玛瑙螺129只,感染第Ⅲ期幼虫的阳性螺为57只,感染率为44.2%(57/129),平均每只阳性螺感染401条线虫(感染度)。2004年对上述地区进行复查发现,121只褐云玛瑙螺中,阳性螺仅为33只,感染率为27.3%(33/121),感染度为72条/螺。两次的感染率差异有显著性(χ2=7.5,P<0.01),表明2004年间褐云玛瑙螺感染比2000年明显下降,见表1、2。2004年在对上述地区进行抽样调查的同时,对海珠区的沥窖村和番禺区的祁福新村2个城乡结合部也进行了褐云玛瑙螺的采样调查。在沥窖村共采集褐云玛瑙螺44只,其中29只阳性感染,感染率为65.9%,感染度为每只螺107条。在祁福新村采集褐云玛瑙螺26只,其中阳性螺12只,感染率为46.2%,感染度为每只螺103条。这2个地区感染率和感染度均高于2000年和2004年调查的平均值。将以上2个采集点计算在内,2004年广州市调查褐云玛瑙螺总数为191只,平均感染率为38.4%,感染度为每只螺感染91条虫,均低于2000年的调查结果。2004年感染率以晓港公园最高,达73.33%,华南农业大学校区最低,仅为19.32%。各地褐云玛瑙螺感染程度轻重不一,平均感染度为91条/螺,华南农业大学校区感染程度最低,为47条/螺,其它地区差别不大,但都高于平均感染度,晓港公园、海珠区沥窖村、番禺区祁福新村和越秀公园感染度分别为98、107、103和102条/螺。在部分褐云玛瑙螺的粪便中查出较多活力旺盛的第Ⅲ期幼虫。另外,在华南植物园内收集到的32只福寿螺(俗称大瓶螺)均未被检测到广州管圆线虫的感染。2.2去壳螺肉+40g组去壳螺肉的率比较2004年对收集的螺只进行螺重与感染度的相关性检查,感染率比较发现去壳螺肉>40g组显著高于<40g组(u=2.22>1.96,P<0.05)。因此,广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫感染率与螺肉重量或正比,即大螺的感染率高于小螺,见表3。2.3各虫体的特征广州管圆线虫BALB/c小鼠感染模型:感染第18d从小鼠脑部收集到第Ⅳ期幼虫,30d从脑部收集到第Ⅴ期幼虫,心肺血管系统未见虫体。广州管圆线虫SD大鼠动物模型:感染后15d时在大鼠脑部检获第Ⅳ期幼虫,25d在脑部检获第Ⅴ期幼虫,35d在大鼠心肺系统检获成虫,62d在鼠粪便中检获第Ⅰ期幼虫。10×10镜下观察虫体特征。第Ⅳ期幼虫:收集于小鼠脑部,虫体长约1cm,肠内可见折光颗粒充盈,亚腹腺较短,位于咽肠连结处。雌雄虫体依稀可辨,雌虫前端可见双管子宫,阴道止于虫体近末端肛孔处,雄虫后端膨大,可见单生殖管位于虫体后半部,显微镜下可见雄性交合刺囊。第Ⅴ期幼虫:收集于小鼠和大鼠脑部,虫体长约1.8cm左右,虫体明显变粗而饱满,显微镜下透明度变低,头端钝圆,泄殖腔形成。雌虫和雄虫容易辨认,雌虫可见阴门,雄虫可见小交合伞,交合刺囊和交合刺较明显,生殖器官尚幼稚。成虫:收集于大鼠肺动脉,雌虫明显长于雄虫,雌虫长约2.8~4.0cm,因肠管内充满血液,可见明显的暗红肠管与白色子宫缠绕的螺旋纹理,非常醒目,尾端呈斜锥形,生殖器成熟而饱满。雄虫呈白色,体宽为雌虫的1/2,体长约1.8~2.8cm左右,交合刺和椭圆形交合伞清晰,腹肋可分辨。3广州管圆线虫第期幼虫感染情况随着人们对生、鲜和烤制食品的偏爱,广州管圆线虫病作为食源性寄生虫病对人民健康的威胁愈加深重,已引起了我国卫生部门和世界卫生组织对该病的高度重视。卫生部在2003年将广州管圆线虫病列为我国“新发传染病”,2005年又告戒人们警惕包括广州管圆线虫在内的食源性寄生虫病。该病主要发生在我国的南方,特别是华东、华南地区,但值得关注的是,近年来北方的病例报道越来越多,“南病北扩”的迹象日渐突出,如2006年8月间发生在北京的一起数百人暴发广州管圆线虫病的事件,提醒我们要加强对该病的重视程度。广州管圆线虫最早是由陈心陶于1933年首次发现并命名的,其中间宿主为螺蛳和蛞蝓等软体动物,终末宿主为鼠类,人是非正常宿主。当人食入了生的或未煮熟的带虫中间宿主,或吃了受到广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫污染的蔬菜、水果可引起广州管圆线虫病,临床主要表现为嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎和/或脑膜脑炎。广州管圆线虫病主要流行在东南亚及太平洋沿岸的国家和岛屿,在北美洲、澳大利亚如悉尼、欧洲国家如瑞士等地均出现过病例报道[7,8,9,10,11,12,13,14,15,16]。我国最早于1945年在台湾报告首个病例,至今黑龙江、辽宁、天津、广东、福建、浙江和北京等地都陆续有过病例报导,并呈现逐年增多的趋势,在台湾、浙江和福建发生过多次暴发流行情况。广州管圆线虫中间宿主种类繁多,能引起人类致病的以携带感染期第Ⅲ期幼虫的螺蛳为主,但我国带虫并致病的螺蛳种类各地区有所不同,如福建、浙江和台湾以福寿螺(俗称大瓶螺)为主,广东则以褐云玛瑙螺(俗称东风螺)为主。各地区的感染率也不相同,近几年间,在发生过广州管圆线虫病暴发流行的地区,潘长旺等报道温州的福寿螺感染率为69.4%,林金祥等报导福建长乐福寿螺的感染率为40.0%,张莹珍等报道福州市区福寿螺的感染率为20.85%。而本次调查结果显示,广州市2000年7月褐云玛瑙螺感染率为44.2%,2004年7月为27.3%,表明2004年比2000年感染率显著降低,也比丁步兰等报道的1981年2月~1982年6月间(29.7%)低,更比暴发过的浙江温州和福建长乐地区低。广州市褐云玛瑙螺的感染率各地区差别较大,2004年沥窖村感染率高达65.9%,当地发现过有个女童出现头痛等嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎症状,并被确诊为广州管圆线虫病。20年前丁步兰等调查广州地区褐云玛瑙螺的感染度均在1000条/只螺以上,而2000年的平均感染度为401条/螺,2004年为72条/螺,单只螺最多的感染数亦少于1000条/螺,比20年前大幅下降并有逐年下降的趋势。感染率和感染度的降低在很大程度上与广州市政环境的改善有关。自上世纪90年代以来,广州市开展了一系列卫生改善措施,孳生地的缩小和草地杀虫药的应用以及垃圾的清理,从广州管圆线虫孳生、中间宿主和终末宿主3个环节上对预防该病的暴发流行起了重大作用。但是许多文献报道过儿童感染病例,虽然他们没有生食或半生食史,但多有螺的密切接触史。本调查证实,螺排泄物中发现有大量活力旺盛的广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫,这些幼虫很有可能钻进幼儿和儿童皮肤的嫩薄处、破损的皮肤或被误食引起感染。色拉、新鲜蔬果和生水都有可能受第Ⅲ期幼虫污染,也可能成为幼儿、儿童和未食螺肉者感染广州管圆线虫病的一个途径。广东人有吃螺的习俗,在酒店和市场可以见到褐云玛瑙螺的出售,在公园可以看到有人采拾褐云玛瑙螺食用或出售,本调查表明,褐云玛瑙螺是广州地区广州管圆线虫的主要中间宿主,广州管圆线虫病散发病例的断续出现,