温脾汤对慢性肾衰竭大鼠的防治作用

温脾汤对慢性肾衰竭大鼠的防治作用

温脾汤是唐孙思理在《急千金方》中提出的一个重要方。食谱包括大黄、附子、干姜、胡萝卜和甘草。温阳和下肢。主要用于脾胃虚弱、手足温热、腕重、腹痛、感冒、长期腹泻等。近代医家将此方用于治疗慢性肾衰竭(CRF),可以起到改善临床症状、改善肾功能以及延缓其病程的作用。本实验切除大鼠一侧肾脏,然后再用腺嘌呤水溶液灌胃造成慢性肾衰竭动物模型(这样可以降低腺嘌呤对如脑、肝、心等器官的不良反应)。通过观察温脾汤对腺嘌呤性慢性肾衰竭大鼠的体重、尿量、肾重与体重之比,尿、血Ca2+、P3+及血SCr、BUN的影响,研究该方对大鼠慢性肾衰竭的保护作用。1实验材料1.1实验动物Wister雄性大白鼠(北京维通利华实验动物技术有限公司提供),体重200±20g,健康,100只。1.2试剂和药物腺嘌呤(由欣经科生物技术有限公司提供),温脾汤(北京市中药综合研究所提供)。2实验方法2.1假手术组的技术Wister雄性大白鼠,100只,随机分为3组,正常组10只、假手术组15只、手术组75只。然后对假手术组行假手术,即从大鼠左肋脊角下方剪开皮肤及肌层,取出肾脏,分离肾包膜,然后再纳回肾脏,最后分别缝合肌层和皮肤。手术组进行大鼠左侧肾脏的切除术,除了切除左侧肾脏之外,其余步骤同假手术组。大鼠适应性喂养1周,手术组大鼠再随机分为5组,分别是:模型组,尿毒清组,温脾汤小、中、大剂量组。2.2灌胃药物的时间正常组、假手术组每天用饮用水灌胃一次,模型组及各治疗组每天上午以200mg/kg体重腺嘌呤水溶液灌胃,下午相应组别药物灌胃,造模时间和药物预防治疗的时间相同,均为4周。2.3大鼠尿量的测定在药物灌胃前、灌胃第2周后和第4周后分别称量动物的体重,灌胃第2周和第4周时分别留取每组动物10只大鼠的24h尿量,灌胃第2周取血。4周后处死大鼠取肾组织,血经低温离心后吸出血清4℃存放待测指标。2.4统计处理用SPSS11.5系统进行数据分析,数据用x¯±sx¯±s表示,结果采用q检验。3结果3.1各组体重、中、大剂量对比用药2周后,与模型组比较,温脾汤组体重都有明显增加(P<0.05或P<0.01)。用药4周后,与模型组对比,尿毒清组体重增加8.17%,温脾汤小、中、大剂量组分别增加4.34%、2.46%、3.73%。说明温脾汤可以增加腺嘌呤性慢性肾衰竭大鼠的体重,其中温脾汤小剂量组对体重的改善最好。见表1。与模型组比较*P<0.053.2影响大鼠肾脏组织病理学的影响3.2.1肾组织病理学检测①正常组和假手术组:肾脏大小正常,被膜光滑,有光泽。②模型组:肾脏肿胀,体积大,质地松软,呈灰白色,缺乏光泽,包膜薄易剥脱,皮髓质界限不清,为“大白肾”。③尿毒清组:肾脏肿大,表面深红色和灰白色点相间,不光滑,缺乏光泽,皮髓质界限大体清晰,包膜薄易剥脱。④温脾汤组:肾脏肿胀,体积较模型组为小,表面呈浅红色,缺乏光泽,皮髓质界限清晰,被膜结合紧,不易剥脱。其中以温脾汤中剂量组作用为明显。3.2.2肾间质及肝肾组织中功能①模型组:肾小管上皮细胞坏死,脱落,肾小管管腔明显扩大,肾小管中有大量金黄色结晶,可见蛋白管型、细胞管型,肾间质重度纤维化,可见肾小球囊腔扩大,肾小球系膜细胞中度增生。②尿毒清组:肾小管中度扩张,肾小管中有少量金黄色结晶,轻度间质纤维化,可见少量肾小管上皮细胞脱落,肾间质中度纤维化,肾小球系膜细胞轻度增生。③温脾汤组:肾小球系膜细胞轻度增生,肾小管轻度扩张,肾小管上皮细胞脱落较少,肾间质轻度炎性细胞浸润与纤维化,肾小管管腔内有少量嘌呤代谢产物结晶。其中以温脾汤中剂量组作用为明显。3.3预防治疗药物模型组动物尿量减少,与之比较,温脾汤组和尿毒清组大鼠尿量接近正常,所以预防治疗药物对于改善肾功能、增加腺嘌呤性肾衰竭大鼠的尿量有一定的作用。见表2。与模型组比较*P<0.05,**P<0.013.4各组大鼠血ca2+、3g+尿Ca2+、P3+:与模型组相比较,温脾汤组有显著的改善(P<0.01),其中以中剂量组对Ca2+、P3+的改善最明显。见表3。血Ca2+、P3+:与模型组比较,尿毒清组和温脾汤组的血Ca2+均有所提高,温脾汤小剂量组有显著改善(P<0.05),中剂量组和大剂量组有极显著改善(P<0.01)。见表3。与模型组对比,温脾汤小剂量组降低16.4%,中剂量和大剂量组血P3+水平改善显著(P<0.01),其中温脾汤的大剂量组效果最好。见表3。与模型组比较*P<0.05,与模型组比较**P<0.013.5肾重/体重比值肾重/体重×103的结果显示:与模型组比较,尿毒清组和温脾汤中剂量组的肾重/体重比值明显降低(P<0.05),温脾汤大剂量组肾重/体重比值显著降低(P<0.01),说明温脾汤对于改善腺嘌呤性慢性肾衰竭大鼠肾脏的损伤程度和尿毒清功效相当。见表4。3.6温脾汤对大鼠血胱炎及尿毒清功效的影响SCr:与模型组比较,尿毒清组和温脾汤中、大剂量组血肌酐均有明显改善,其中尿毒清组、温脾汤中剂量组改善显著(P<0.01),而温脾汤大剂量组改善明显(P<0.05)。说明温脾汤对于改善腺嘌呤性慢性肾衰竭大鼠血肌酐的水平和尿毒清功效相当,其中温脾汤中剂量组效果最好。见表4。BUN:与模型组比较,尿毒清组和温脾汤小、中、大剂量组分别降低15.6%、28.3%、27.6%、16.8%,说明温脾汤在改善腺嘌呤性慢性肾衰竭大鼠的BUN方面效果为优,其中温脾汤小剂量组最好。见表4。与模型组比较*P<0.05,**P<0.014正离子在肾损害沟通中的作用腺嘌呤性慢性肾衰竭大鼠模型以肾小管损伤为主。腺嘌呤进入体内,通过黄嘌呤氧化酶的作用变为不溶于水的2,8-二羟基腺嘌呤沉积,影响氮质化合物的排泄和电解质等物质的代谢,病理反应是腺嘌呤代谢物的结晶沉积以及围绕其所生成的肉芽肿,致使肾小管扩张或萎缩、间质水肿、淋巴细胞浸润及间质纤维组织的增生,这与人类肾小管功能减退的病理损害类似。温脾汤由大黄、附子、干姜、人参、甘草等组成。其中大黄功在通腑攻积、活血化瘀。现代研究表明它有抗炎、抗菌、抗病毒、降低胆固醇、降低慢性肾衰竭的BUN、SCr的功效,其作用机制主要是缓解残余肾单位高代谢状态,改善机体氮质以及脂质的代谢,减少残余肾病理改变。附子具有温肾助阳、散寒止痛之功。药理学研究表明它可增加抗氧化酶活性,减少脂质过氧化,降低自由基代谢产物的含量以及提高机体抗自由基能力,并且可以通过改善细胞膜脂的流动性而保证细胞膜的完整性和正常功能的维持。干姜健脾通阳,药理作用有镇痛抗炎、降血脂、抗血小板聚集、抗病原微生物、抗氧化作用、抗缺氧等作用。人参益气补血,双向调节机体的功能和代谢作用,主要在机体功能低下的情况有正向调节的作用,提高机体的免疫力。甘草健脾益气,具有皮质激素样作用,抗炎、抗免疫,还有解毒降血脂和抗利尿作用。本实验结果显示,温脾汤可以改善腺嘌呤性慢性肾衰竭动物的体重、尿量、肾