2第二章中药制剂分析鉴别教程

第三章中药制剂的鉴别【目的要求】把握中药制剂的常用鉴别方法和鉴别依据生疏中药制剂鉴别工作的根本程序。了解中药制剂鉴别的目的、意义以及在中药制剂质量把握与质量评价中的作用。思考题中药制剂的性状应当如何描述？描述的内容有哪些？中药制剂的显微鉴别与单味药材的粉末鉴别有何异同?以下哪些制剂可以使用显微鉴别法？各制剂相关药味显微鉴别特征是什么？六味地黄丸，口炎清颗粒，归芍地黄丸，牛黄解毒片，小建中合剂，七厘散思考题中药制剂常用的鉴别方法有哪些？为什么对一个药品的鉴别试验常承受几种鉴别方法？试阐述中药比照品、比照药材和比照提取物在中药制剂鉴别中的作用和意义。影响中药成方薄层色谱行为的主要因素有哪些？如何考察薄层色谱方法的专属性、重现性和耐用性？根本概念中药制剂定性鉴别利用中药制剂中各单味药材的形态、组织学特征及所含化学成分的构造特征、化学反响、光谱特征、色谱特征及某些物理化学常数来鉴别中药制剂各单味药材的真伪及存在与否的分析方法。其次节鉴别中药制剂的鉴别药味的选取原则如下单味制剂；复方制剂，按照君臣佐使依次选择药味药味较多时，应首选君、臣药、贵重药、毒药鉴别处方中每一药味均鉴别，选择尽量多的药味写入质量标准，不少于处方1/3药味。生物鉴别鉴别方法理化鉴别法显微鉴别法化学反响法微量升华法毛细管电泳法光谱法色谱分析法性状鉴别法颜色形态外形气味其他CyclenameAddYourText第一节性状鉴别〔Description〕一、根本内容主要中药剂型的性状要求

大山楂丸－本品为棕红色或褐色的大蜜丸；味酸、甜。三黄片－本品为糖衣片，除去糖衣后显棕色，味苦，微涩。小儿化毒散－本品为杏黄色至棕黄色的粉末；味苦，有凉快感。正骨水－本品为棕红色的澄清液体，气芳香。金刚藤胶囊－本品为胶囊剂，内容物为棕黄色或棕褐色的颗粒，气微香，味苦、涩。第一节性状鉴别〔Description〕折光率旋光度比旋度熔点凝点相对密度反映药物的纯洁程度二、物理常数第一节性状鉴别〔Description〕折光率：20℃，用钠光谱的D线(589.3nm)测定供试品相对于空气的折光率。区分不同的油类或检查药品的纯杂程度旋光度和比旋度：20℃，用钠光谱的D线(589.3nm)测定旋光度，除另有规定外，测定管长度为1dm。比旋度α为测得的旋光度L为测定管长度dmd为液体的相对密度区分或检查药品的纯杂程度，或测定含量例：薄荷油“折光率应为〔附录VIIF〕旋光度取本品，依法测定〔附录VIIE〕，旋光度应为-17°至-24°”第一节性状鉴别〔Description〕相对密度：比重瓶法〔液体〕韦氏比重秤法〔易挥发液体〕熔点：毛细管测定法毛细管法测定熔点第一节性状鉴别〔Description〕鉴别内容粉末组织、细胞或内含物等生物学特征由药材粉末直接制成的制剂或添加有局部药材粉末的制剂主要药味化学成分不清晰或尚无化学鉴别

其次节显微鉴别(microscopicidentification)显微定性鉴别的特点—简洁、相互干扰。重现性差①依据制剂特点进展预处理。②原中药粉末的显微特征，不愿定能作该制剂的鉴别特征。③选择各原料药中较具专属性的显微特征作为鉴别依据。

其次节显微鉴别显微定性鉴别的方法了解制剂处方，制法及可进展显微鉴别的药材品种，比照分析其中各药味的粉末特征。排解穿插干扰，明确专属特征。要求：显微特征在处方中和处方外均具有专属性其次节显微鉴别牛黄解毒片中大黄的显微鉴别所用器材显微镜：光学显微镜、电子显微镜、扫描电镜等。留意事项显微特征明显，易查见，否则可能做出假阴性的判定。取样留意代表性。

其次节显微鉴别其次节显微鉴别一、制片方法1．散剂、胶囊剂取粉末，直接加水或水合氯醛透扮装片。2．片剂用刀片直接从药片断面刮取少量粉末或研碎后取少量样品透扮装片。3．水丸、锭剂研成粉末后取少量直接透扮装片。4．蜜丸由于蜂蜜粘结药材粉末的细胞核组织，难于观看，需去除粘结使解离，方法有：水洗后离心法。其次节显微鉴别一、制片方法5.解离组织制片〔1〕氢氧化钾法；〔2〕硝铬酸法；〔3〕氯酸钾法。样品中含有木化组织较多或集成较大群束，不易进展观看。其次节显微鉴别假设观看细胞内含物外形，应选用不同试剂制片

淀粉粒水或甘油醋酸试液；糊粉粒甘油；水溶性内含物乙醇或水合氯醛试液(不加热)其次节显微鉴别(一)根及根茎类原生木质部；皮层；维管束；石细胞；淀粉粒；草酸钙结晶。茎类皮类木类表皮细胞、垂周壁的形状，气孔，毛茸；导管；

管胞；

纤维；

草酸钙结晶。薄壁组织碎片、石细胞。不应含有木质部组织，如导管、管胞等。

纤维、石细胞、草酸钙簇晶细胞壁通常均木化。不应有木栓细胞及绿色组织等导管、管胞、木纤维、木射线及木薄壁细胞。

其次节显微鉴别(二)茎木类其次节显微鉴别(三)叶类1．表皮2．气孔3．毛茸留意毛茸的种类。

其次节显微鉴别(四)花类1．苞片及花萼构造类同叶片，外表上可见到气孔及毛茸2．花冠上表皮细胞常呈乳头状或绒毛状突起而无气孔，下表皮细胞常不呈乳头状，细胞壁微波状弯曲。维管束组织细小。其次节显微鉴别3．雄蕊1〕花粉囊内壁细胞的壁不均匀地增厚，呈网状、螺旋状、环纹状及点状等；2〕花粉粒具圆形、长圆形或多面形等多种外形。通常具内外两层壁，外壁多数具各种雕纹。4．雌蕊柱头的表皮细胞呈乳头状突起，或分化成绒毛状其次节显微鉴别(五)果实类1．果皮细胞的外形、大小。2．外果皮上可能有非腺毛及腺毛。3．中果皮内的分泌组织4．内果皮石细胞，大小、细胞壁的厚薄，如为镶嵌层，则应留意其排列形式。有无分泌组织及细胞的内含物。细胞大小、外形、壁厚、色泽、细胞内含物-表皮毛的形状、细胞壁的厚薄、是否木化、有无纹理；石细胞外形、大小、色泽散布及细胞壁的增厚状况。栅状细胞及油细胞。-细胞外形、厚度、内含物。种皮内胚乳外胚乳子叶其次节显微鉴别(七)种子类

其次节显微鉴别应用实例1牛黄解毒丸显微鉴别处方：牛黄、雄黄、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片、甘草。2.九分散显微鉴别处方：马钱子粉、麻黄、乳香〔制〕、没药〔制〕其次节显微鉴别作业：1.六味地黄丸的显微定性鉴别熟地黄；山茱萸；山药；牡丹皮；茯苓；泽泻。块根果实根茎皮类菌核根及根茎作业2.银翘解毒片：金银花、连翘、薄荷、荆芥、淡豆豉、牛蒡子〔制〕、桔梗、淡竹叶、甘草金银花、桔梗以生药粉投料，可显微鉴别3.蛇胆川贝散：蛇胆汁、川贝母。川贝母粉碎成细粉入药，可显微鉴别4.小儿惊风散：全蝎、僵蚕、雄黄、朱砂、甘草。五味药以生药粉投料，均可显微鉴别。显微化学鉴别法

升华法〔Sublimation〕(一)原理利用某些成分的升华性，在确定温度下将其从制剂中升华分别出来，并以升华物所具有的某些理化性质作为制剂鉴别的依据。〔二〕特点升华法具有简便、有用等特点，由于升华性仅为少数中药化学成分所具有且升华物纯度较高，故该法专属性亦较好。升华法〔Sublimation〕对升华物可：在显微镜下观看其晶形。在可见或紫外光下观看其颜色或荧光。参与确定试剂处理后显出不同颜色或荧光。升华法-实例中药制剂中常见的具有升华性的成分有冰片、大黄中蒽醌类成分；牡丹皮中丹皮酚、薄荷中薄荷醇；斑蝥中斑蟊素等。

显微化学鉴别法实例升华法万应锭中冰片的鉴别：取制剂粉末，进展微量升华，收集冰片升华物，显微镜检升华物的结晶性状后，参与香草醛硫酸溶液，白色结晶发生化学反响呈现紫红色其次节显微鉴别显微化学鉴别法作业1.牛黄解毒丸中冰片、大黄微量升华鉴别。2.明目地黄丸的升华鉴别。3.养阴清肺膏的微量升华鉴别。第三节理化鉴别

〔PhysicochemicalIdentification〕一、理化鉴别的概念和意义利用制剂所含化学成分的理化性质，通过化学反响法，光谱法和色谱法等分析方法和技术来推断真伪的分析方法。依据中药制剂配伍，首选君药、臣药、毒剧药和珍贵药进展理化鉴别。关键：专属、灵敏、快速、准确第三节理化鉴别

目前中国药典收载的理化鉴别方法有：化学反响法〔多为试管反响〕色谱法：薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法毛细管电泳法光谱法：荧光鉴别法、分光光度法〔紫外、红外〕一、化学反响法

〔GeneralChemicalReaction〕〔一〕原理：利用检测试剂与制剂中的所含化学成分〔有效成分或指标性成分或成分群〕发生化学反响，依据所产生的颜色、沉淀或气体等现象，来推断某些成分或某些药味的有无。一般化学反响法即通常所说的显色反响和沉淀反响等〔试管反响〕。一、化学反响法

〔GeneralChemicalReaction〕特点：专属性差，操作简洁。适用对象：多用于中药制剂中矿物药的无机成分、动物的蛋白质类成分以及处方单一或组方简洁的制剂中植物性药材成分类群的鉴别。马钱子散中生物碱的鉴别

化学反响法常鉴别的成分化学反响法主要用于鉴别制剂中的：1.生物碱类；2.黄酮类；3.蒽醌类；4.香豆素、内酯类；5.皂苷类；6.氨基酸、多糖类7.各种矿物类成分：砷、汞等。生物碱沉淀试剂Borntrager反响盐酸-镁粉反响Gibbs反响；异羟肟酸铁反响Liebermann-Burchard反响α-萘酚-浓硫酸反响〔二〕前处理提取酸性乙醇回流提取，检验酚类、有机酸、生物碱等。水室温浸泡提取，检验氨基酸、蛋白质等。60℃热水浸泡，检验单糖、多糖、皂苷、鞣质及其他苷类成分。乙醚提取，检验醌、内酯、苷元；药渣挥去乙醚后，用甲醇回流提取，检查各种苷类。升华法，用于提取和检查能升华的成分。水蒸气蒸馏法，用于提取和检查挥发性成分。1.生物碱1.碘化铋钾反响产生红棕色沉淀2.碘化汞钾反响产生类白色沉淀3.硅钨酸反响产生白色沉淀4.苦味酸反响产生黄色结晶性沉淀需在酸性条件下进展，留意事先排解其它成分的干扰。少数生物碱不与上述通用沉淀试剂反响，而具有专属性较强的其它反响。化学反响法常鉴别的成分2.黄酮类化合物盐酸-镁粉反响呈紫红色。大山楂丸〔山楂〕抗骨增生丸〔淫羊藿〕参茸保胎丸〔黄芩〕等。此外，黄芩提取物承受二氯氧锆-盐酸显色反响进展检识。3.蒽醌类化合物主要承受碱液反响〔Borntrager反响〕，阳性反响呈红色，加酸红色褪去呈黄色。例如大黄流浸膏。化学反响法常鉴别的成分4.香豆素、内酯类和酚类常用的检识反响有：氯亚氨基-2,6-二氯醌-四硼酸钠反响〔Gibbs反响〕，呈现蓝色。异羟肟酸铁反响呈红色

应用品种有：养阴清肺膏〔牡丹皮〕、前列舒丸〔牡丹皮〕等。5.皂苷常用的定性鉴别反响有：泡沫反响样品水溶液振摇后，产生长期性泡沫。醋酐-浓硫酸反响〔Liebermann-Burchard〕甾体皂苷呈现污绿色，三萜皂苷呈现红、红紫色。浓硫酸反响呈现红、红紫色。

地奥心血康胶囊〔黄山药和穿山龙薯蓣的提取物〕养心定悸膏〔甘草、红参、麦冬〕。7.矿物药朱砂、石膏、雄黄等为中成药中常见的矿药。1.朱砂〔主含HgS〕主要承受铜片反响天王补心丹等中成药中朱砂的鉴定2.石膏、牡蛎、海螵蛸此类药物均富含钙盐，主要承受草酸铵反响止咳桔红口服液〔石膏〕、安胃片〔海螵蛸〕龙牡壮骨颗粒〔牡蛎、龙骨、乳酸钙、葡萄糖酸钙等〕8.挥发性成分主要使用香草醛-浓硫酸反响检识此类成分，正反响呈红、红紫色。

应用品种主要有：万应锭〔冰片〕、牛黄解毒片〔冰片〕、养心定悸膏〔桂枝、生姜〕等。牡荆油胶丸则承受溴-三氯甲烷反响鉴别之。化学反响鉴别实例1马钱子散中马钱子鉴定“取本品10g,加浓氨试液数滴及氯仿10ml,浸泡数小时,滤过,取滤液1ml蒸干,残渣加稀盐酸1ml使溶解,加碘化铋钾试液1-2滴,即生成黄棕色沉淀。”浓氨水的作用？稀盐酸的作用？地龙的排解？牛黄解毒片中大黄、黄芩的定性鉴别反响取本品6片(去包衣)，研细，加乙醇10ml，温热10分钟，过滤，滤液作如下反响：(1)取滤液5ml，加镁粉少量与盐酸0.5ml，加热，即显红色(2)另取滤液4ml，加氢氧化钠试液，显红色，再加30％过氧化氢溶液，加热，红色不消逝，加酸或酸性时，红色变为黄色。

化学反响鉴别实例2黄芩中有大量黄酮大黄中含有羟基蒽醌蟾蜍、朱砂、雄黄的定性鉴别反响

〔牙痛一粒丸〕(1)取本品约0.1g，研细，加氯仿5ml，浸泡1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酐少量使溶解，再滴加硫酸，初显蓝紫色，渐变为蓝绿色。(2)取本品约0.2g，研细，加水潮湿后，加氯酸钾的硝酸饱和溶液2ml，振摇，放冷，离心，取上清液，加氯化钡试液0.5ml，摇匀，溶液呈白色浑浊，离心，弃去上层酸液，再加水2ml，振摇，沉淀不溶解。(3)取本品适量，研细，用盐酸潮湿后，在光滑的铜片上摩擦，铜片外表即显银白色光泽，加热烘烤后，银白色消逝蟾蜍雄黄朱砂一、化学反响法

〔GeneralChemicalReaction〕(1)慎重使用专属性不好的分析反响，如泡沫生成反响、三氯化铁显色反响等。(2)分析前对样品进展分别、精制，除去干扰分析反响的物质，借此改善鉴别方法的专属性。(3)承受阴性比照和阳性比照的方式，对拟定的鉴别方法进展反复验证，防止消逝假阳性。一般化学反响法用于中药制剂鉴别应留意：一、化学反响法

〔GeneralChemicalReaction〕1.一般化学反响法具有操作简便，适用性较强等特点。2.专属性较差。否认大于确定，某些一般化学反响法已被专属性较强的薄层鉴别法取代。2023年版《中国药典》在鉴别制剂中的大黄。决明子、何首乌等药味时，已不再承受蒽醌类化合物的颜色反响，而收载了薄层鉴别法。二、光谱法紫外光谱法荧光法红外分光谱法近红外光谱法〔一〕紫外光谱法问题：为什么可以在紫外光区有特征吸取？哪些化学成分具有紫外光谱特征？紫外光谱鉴别的特点：操作简洁，快速，样品用量少；特征性和专属性较差；测定前需作纯化处理。〔一〕紫外光谱法2.比较紫外光谱参数的全都性1.比较光谱的一致性3.紫外光谱谱线组法4.紫外导数光谱法紫外光谱鉴别法有：荧光鉴别法〔Fluorescence〕原理：利用某些具有紫外吸取特征的化学成分，在受激发光照射后可放射荧光的特性进展中药制剂鉴别的方法。特点：1操作简洁、灵敏度高2易受拉曼峰和散射光等背景的影响以及受共存组分的干扰，专属性差。荧光鉴别法〔Fluorescence〕荧光鉴别法适合检测成分为：黄酮类、蒽醌类、香豆精类、鞣质类、酚酸类和某些生物碱类成分。有的成分本身不具荧光性，但加酸、碱处理后，或经其它化学方法处理后也可产生荧光供鉴别用。检测波长254nm或365nm实例l天王补心丹中当归的鉴别彩图〔2〕红外光谱法存在问题：中药材目前尚缺乏标准红外光谱图，需要做大量的争论工作。中药制剂的生产中药制剂经适当前处理，通过与计算机软件连接处理数据，建立模式制剂标准红外图谱。用于中药制剂真伪鉴别和制剂生产过程的快速在线检测。六味地黄丸生产过程的监控。波长范围m,该区域主要是含氢基团〔ＣＨ、ＯＨ、ＮＨ〕的倍频和合频吸取。吸取强度低，需样本量大，并且数据难以处理。傅里叶变换光谱学和计算机技术进展。中药的傅里叶变换近红外漫反射光谱包含了样品极为丰富的组成信息。操作简洁，无需处理即可分析，简便快速，完成一次样品采集，即可实现多项性能指标测定。近红外光谱法(Near-Infraredspectrophotometry)近红外光谱法(Near-Infraredspectrophotometry)三、色谱法〔chromatography〕〔一〕薄层色谱法〔TLC〕〔二〕纸色谱法〔PC〕〔三〕高效液相色谱法〔HPLC〕〔四〕气相色谱法〔GC〕三、色谱法〔chromatography〕(一)薄层色谱法〔TLC〕使用本法鉴定中药制剂，通常是在同一块薄层板上点入样品和适宜的比照物，承受同一条件依法层析开放，经显色或用其他方法检精彩谱斑点后，将样品与比照物所得的色谱图进展比照，作出鉴定。薄层色谱法操作方法薄层板制备

常用固定相材料、

颗粒大小

薄层板类型

操作要求薄层色谱法操作方法〔一〕薄层色谱3.显色与检视方法可见光有颜色，直接检视自身有荧光或参与试剂可激发荧光的成分，在365或254nm观看。化学显色：通用型和专属性较好的显色剂薄层色谱-生物自显影法影响薄层色谱的因素有哪些？〔一〕薄层色谱供试品溶液的制备展开剂的选择薄层板的选择对照物的选择展开剂蒸气饱和温度和湿度1.薄层色谱供试品预处理依据主要的检测成分选择提取溶剂常用的预处理方法有：升华法，蒸馏法，溶剂提取法，小型层析柱的柱色谱法、离子交换法等。〔一〕薄层色谱影响因素固定相选择硅胶G、硅胶GF254生物碱：氧化铝黄酮类、酚类：聚酰胺1.薄层色谱〔一〕薄层色谱1.薄层色谱条件系统适用性试验三、色谱法〔chromatography〕开放系统选择Rf值0.2-0.8避免拖尾问题配比一致避免边缘效应低毒溶剂温度和湿度无水乙醇-苯（1:4）苯-三氯甲烷（1:3）丙酮-甲醇（1:1）极性三、色谱法〔chromatography〕〔一〕薄层色谱1.薄层色谱条件注意问题〔一〕薄层色谱2.薄层色谱比照物的选择比照提取物比照法比照品比照法比照药材比照法阳性比照法阴性比照法三、色谱法〔chromatography〕标志着今后以测定一组成分渐渐取代测定单一指标成分〔二〕纸色谱法PC

固定相：水流淌相：BAW系统〔极性比较大〕载体：纤维素鉴别范围：氨基酸、动物类药物、多糖等极性组分。鉴别依据：供试品色谱中，在与比照品、比照药材、比照药材提取物相应的位置显一样颜色的斑点，Rf值来表示。薄层鉴别应用实例1.大黄及含大黄的成药1〕供试液制备取各样品适量，加甲醇20ml浸渍1h，过滤，取滤液5ml，蒸干，加水10ml使溶解，再加HCl1ml，水浴加热30min，立刻冷却，乙醚提取两次，20ml/次，合并乙醚液，蒸干，残渣加氯仿溶解成1ml。2〕比照液制备取大黄比照药材0.1g．按供试液制备作为比照药材溶液；另取芦荟大黄素，大黄酸，大黄素，大黄素甲醚，大黄酚比照品，加甲醇制成1mg/ml的溶液，作为比照品溶液。3〕薄层板硅胶H加0.3％CMC-Na溶液的自制板；厚度：300um4〕点样分别点样4uL。5〕开放剂石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)放置后的上层溶液。6〕开放方式上行开放；展距：7cm。7〕显色置紫外光灯(365nm)下检视。8〕色谱识别紫外光灯(365nm)下，供试品色谱中，在与比照药材色谱相应的位置上，显一样的五个橙黄色荧光主斑点。9〕备注在局部成药样品的色谱中，除大黄的五个蒽醌成分的斑点外，尚有其它荧光斑点，为处方中的其它成分1234567891011121314151617样品：1．芦荟大黄素；2．大黄酸；3．大黄素；4．大黄素甲醚；5．大黄酚；6．大黄(掌叶大黄)比照药材；7．大黄(唐古特大黄)比照药材；8．大黄流浸膏；9．小儿化毒散；10．槟榔四消丸；11．木香槟榔丸；12．枳实导滞丸；13．牛黄上清丸；14．清宁丸；15．一捻金；16．牛黄解毒片；17．牛黄解毒丸薄层鉴别应用实例薄层鉴别应用实例2.黄连、黄柏及含黄连、黄柏的成药1〕供试液制备取各品种药粉适量，加甲醇5ml，置水浴回流15min，过滤，滤液浓缩至1ml。2〕比照液制备取盐酸香槟酒小檗碱，硫酸黄连碱，硫酸表小檗碱，非洲防己碱，药根碱，盐酸巴马汀比照品，加甲醇制成每0.5mg/ml的溶液，作为比照品溶液。3〕薄层板硅胶G自制板；厚度：500um4〕点样分别点样1-2ul5〕开放剂苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试液(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)；另槽中参与与开放剂等体积浓氨试液。薄层鉴别应用实例6〕开放方式开放箱预平衡15分钟；上行开放；展距：8cm7〕显色置紫外光灯(365nm)下检视。8〕色谱识别中国药典黄连项下收载有味连，雅连，云连三种，总体分析黄连可见4～5个主要的黄色荧光斑点，自下而上，分别为l.非洲防己碱+药根碱(量少)；2.巴马汀；3.小檗碱；4.表小檗碱(云连不含，雅连含量低)；5.黄连碱(味连含量高)。黄柏主要检出巴马汀及小檗碱，可与黄连区分。123456789101112131415161718

样品：1.黄连(味连)；2.黄连；3.黄连(雅连)；4.黄连(云连)；5.黄连(野连)；6.黄连(日本黄连)；7.小儿化毒散；8.万应锭；9.大补阴丸；10.木香槟榔丸；