皱皮甜瓜中绿原酸的测定

皱皮甜瓜中绿原酸的测定

黄瓜是蔷薇科植物的提取物。这种水果几乎是干燥的结果。肝脏、肌肉和胃里都可以去除水分。《中华人民共和国药典》(2005版)Ⅰ部规定木瓜的产地处理为:“置沸水中烫至外皮灰白色,对半纵剖,晒干”。根据我们的调查,实际生产中也有大量未经烫制处理,而是直接对半纵剖、晒干,其成品外观差异不大。绿原酸是一种具有较强生理活性的物质,在抗菌、利胆、抗炎、清除体内自由基等多方面有作用。木瓜药材所含绿原酸(chlorogenicacid)亦为其中的有效成分之一。本文对安徽宣木瓜与湖北资丘木瓜两个产地及用两种不同的初加工方法得到的药材进行比较,对水溶性浸出物、醇溶性浸出物和绿原酸的含量以及总灰分、酸不溶性灰分含量进行测定,研究探讨不同初加工方法对木瓜药材的影响,为木瓜的不同初加工方法是否会导致有效成分产生差异提供参考。1材料和机器1.1样品处理方式1号样品:安徽宣木瓜,按照药典方法烫后晒干;2号样品:安徽宣木瓜,未经过烫制处理直接晒干;3号样品:资丘木瓜,按照药典方法烫后晒干;4号样品:资丘木瓜,未经过烫制处理直接晒干。1.2色谱免疫委员会vwd3DIONEXHPLC(LPG3400PUMP,VWD3400detector);Chromeleon色谱工作站。乙腈(色谱纯)、磷酸(分析纯)、娃哈哈纯净水、绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所)。2测试方法2.1总检察长剂和不溶性酸乙酰氯的测定按照《中华人民共和国药典》(2005年版)Ⅰ部附录ⅨK灰分测定法项下相应规定进行。2.2为测定醇溶胶提取物的含量按照《中华人民共和国药典》(2005年版)Ⅰ部附录ⅩA浸出物测定法项下醇溶性浸出物测定法规定进行。2.3水提取物含量的测定按照《中华人民共和国药典》(2005年版)Ⅰ部附录ⅩA浸出物测定法项下水溶性浸出物测定法之热浸法规定进行。2.4绿色原酸的含量测定参照余良忠、黄志军等文献方法测定。2.4.1对照溶液的制备精密称取绿原酸对照品适量,加甲醇制成38.45mg/L的绿原酸对照品溶液。2.4.2流动相、色谱C18(Kromasil5μm,4.6mm×250mm)色谱柱;流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液(体积比88∶12);检测波长327nm;流速0.8mL/min,柱温30°C。精密吸取对照品溶液20μL注入液相色谱仪,理论塔板数不低于1000。对照品溶液色谱图见图1。2.4.3供试品溶液的制备分别精确称取药材粉末0.5000g,置锥形瓶中,加入50%甲醇25.00mL,精确称定重量,超声处理30min,放置室温,加50%甲醇补足减少的重量,摇匀,过滤,滤液用微孔滤膜过滤作为供试品溶液。2.4.4样品测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μL,注入液相色谱仪,测定含量。3结果与讨论3.1总检察长、酸不溶性偏差、水提取物和醇提取物的测定结果见表1。续表3.2绿色原酸的含量测定结果见表2。3.3数据的分类和统计按照初加工方法的不同对实验数据进行分类和统计,结果见表3。结果表明,烫与未烫差别不大,经t检验,P值均大于0.05,无显著性差异。3.4采用烫制工艺皱皮木瓜的产地加工方法,是一个待解决的问题,目前采用的方法主要有两种:一是药典方法,沸水烫后晒干。二是略去沸水烫这个过程而直接晒干,具体做法大多是将采收的鲜木瓜果实露天堆放上覆薄膜12~24h,使坚硬的鲜木瓜果实变软,将发汗后的木瓜果实用非铁质刀具从中纵切,将切制后的木瓜均匀地铺在水泥地上或竹帘上晒制,在夜晚和没有阳光的时候上覆薄膜捂实,直至干燥。采用烫制方法主要应考虑烫制的温度和时间,避免切开后烫制。如果略去烫制过程可以简化初加工工艺,减少能源费用从而降低成本。木瓜以有机酸、黄酮苷、皂苷为主要有效成分,大多有较好的水溶性,我们选取浸出物含量作为检测指标正是基于这种考虑。本课题研究初步表明,总灰分、酸不溶性灰分、水浸出物、醇浸出物以及绿原酸含量测定结果无显著差异,木瓜产地的不同处理方法对木瓜药材的质量影响不大。另外,两种不同的加工方法对木瓜药材中的还原糖、齐墩果酸和熊果