植物源性药对治疗鼠干槽症的疗效观察

植物源性药对治疗鼠干槽症的疗效观察

感染性骨关节炎（sr）常发生在后部的一种常见并发症。所有牙关节炎都可以发生在任何形式的创伤性癫痫中，尤其是在下颌障碍后。根据国内外报告，发病率为10%30%。不但疼痛明显,而且复诊次数多,疗程长,给患者带来极大痛苦。常规治疗方法是彻底清创后在拔牙创内严密填塞碘仿纱条。芦荟具有良好的抗菌、消炎、止痛、促进创口愈合、促凝血作用。本实验采用大鼠感染性拔牙创内放入芦荟膏局部给药的方法治疗/预防干槽症,并与传统填塞碘仿纱条治疗干槽症进行对比观察,希望能为临床找出更为有效、简便的治疗/预防干槽症的方法,也为实验室研究干槽症的药物治疗/预防提供参考。1材料和方法1.1芦荟膏的制备库拉索芦荟凝胶冻干粉200∶1(云南元江万绿生物集团有限公司,产品标准:QB/T2489-2000,生产批号:20070602),医用甘油[生产批号:20070330,批准文号:黑卫药准字(2001)第100001号,黑龙江省友谊甘油场],调配成芦荟膏,将制备好的芦荟膏放入茶色磨口瓶中,并放入4℃冰箱中备用。1.2牙关创感染创形试验取Wistar大鼠,雌雄不限,60只,体重130～150g,腹腔注射1.5%戊巴比妥(20～30mg/kg)麻醉后,分别拔除左右上颌第一磨牙,创面进行搔刮后,将蘸有饱和的金黄色葡萄球菌菌种的棉塞(哈尔滨医科大学附属四院微生物教研室提供)放入拔牙创内,4d后形成感染创面。再将这60只大鼠分为2大组,每组30只,腹腔内注射1.5%戊巴比妥(20～30mg/kg),每组左侧均为空白对照组,用过氧化氢溶液彻底清洗创口后,不放入任何药品。一组右侧作为实验组,用过氧化氢溶液彻底清洗创口后,将芦荟膏放入拔牙创内,充满、封闭创口;另一组的右侧作为对照组,采取上述同样方法后,将碘仿纱条(哈尔滨医科大学附属四院手术室提供)放入拔牙创内,颊舌向缝合以防止纱条脱落。在1周时麻醉(方法、剂量同前)对照组大鼠,将碘仿纱条取出,观察创口愈合情况。同时分别在1、2、4、6、8、12周时,麻醉(方法、剂量同前)下肉眼观察2组大鼠拔牙创软组织的愈合情况,同时由一名不知情医生测量创口面积,并予以纪录。之后每组分别处死5只大鼠,完整取下上颌骨,修整后立即放入4%甲醛液中固定1周。混合脱钙液充分脱钙,逐级脱水,石蜡包埋,沿骨长轴作矢状连续切片,常规HE染色,光镜下观察。1.3统计方法所得数据用x¯±sx¯±s表示,数据分析采用裂区设计的方差分析的方法进行整体检验,配合单因素方差分析及t检验进行分析。2结果2.1肉眼观察4天的感染伤口拔牙创内为一层灰黄污秽物覆盖,恶臭,四周牙龈红肿,颇似人类干槽症。2.2两组实际创创时创不同肉眼观察1周时实验组和对照组创口均明显缩小,2组没有明显差别;2周时的实验组创口明显比对照组创口缩小;4周时的实验组创口表面几乎接近正常,对照组创口表面仍残留少许创面;6周时的实验组创口表面完全恢复正常,而对照组创口表面几乎接近正常;8周时的对照组创口完全恢复正常(表1)。2.3两组感染愈合速度比较实验组拔牙后的感染创口面积与对照组拔牙后的感染创口面积差异有显著性(P<0.05),表明实验组创口愈合速度优于对照组(表2)。2.4牙槽骨的组织现状镜下观察4d后的感染创面,拔牙创内空虚或仅有少许残渣,有的有血块残存,底部呈明显溶解状态。牙槽骨壁骨细胞消失,骨陷窝空虚。拔牙创4周时骨髓腔有炎症细胞浸润。1、2、4、6、8、12周时实验组和对照组感染创面见表3及图1～6。3在牙相关方面的应用拔牙术是口腔颌面外科最为常见的手术之一,术后可能引起出血、疼痛、肿胀和干槽症等,从而影响患者的日常生活。特别是下颌阻生的第三磨牙拔除术,术后出现比较严重的术后反应和并发症的概率较高。如一旦发生干槽症,表现为剧烈的疼痛,而且一般的止痛方法没有明显效果,给患者带来极大的痛苦。自1896年Grawford首次报道DS一百多年以来,许多学者对其病因、预防及治疗进行了大量的研究,但迄今其机制仍未完全明了。多数学者认为,感染和创伤是致DS的两大主因。其实质为骨创感染,发病的主要机制是拔牙创内血块缺失,使之失去了自然的保护物,加之口腔内温度和湿度适宜,营养供给丰富,适合各类微生物的生长,使之易发生感染。DS实质上是一种由混合菌引起的骨创感染,厌氧菌起重要作用。为了预防和减少拔牙术后的并发症,国内外学者提出了许多方法,比如全身或局部使用药物、牙槽窝局部填塞等,但效果均不甚理想。有学者在较为空虚的拔牙窝内放置碘仿明胶海绵或抗生素粉末等,但DS的发生率仍在2%～24.1%。Poeschl等研究认为,拔牙后口服抗生素对预防拔牙术后的并发症并无明显效果。Reekie等报道,使用甲硝唑凝胶预防干槽症效果并不显著。而Ishihama等报道使用口服阿奇霉素来预防拔牙后干槽症;Torres-Lagares等报道使用洗必泰冲洗拔牙创预防干槽症,都取得了一定的疗效。Alkan等在拔牙创面使用止血药物并用纱布填塞3min,发现实验组和对照组的术后肿胀并无明显差异,但同时也指出,实验组由于使用纱布填塞,操作时间要长于对照组,可能影响了实验结果。芦荟是广泛存在于自然界的百合科多浆植物,在360多种芦荟中真正具有药用价值的只有4种,库拉索芦荟(Aloeveral)是其中之一。目前研究已证实,芦荟的化学成分复杂,主要含有蒽醌类化合物、多糖、有机酸、蛋白质、氨基酸、多肽、酶类、植物固醇、皂苷、多种微量元素等有效化学成分。库拉索芦荟凝胶冻干粉是选用成熟的库拉索芦荟鲜叶,将叶肉与表皮分离,经科学提取、稳定化处理、常温膜除菌,再用膜分离常温浓缩工艺制成,使之具有止血、消炎、封闭创口及促进肉芽组织生长的功效。甘油是一种无色、澄明的糖浆状液体,味甜,可作为溶媒剂使用。我们将上述两种物质制成芦荟膏状制剂。对于芦荟的安全性,广东省食品卫生监督检验所已按食品安全性毒理学评价程序对其提取物作毒理试验,表明芦荟为无毒级物质,无蓄积毒性,对骨髓细胞、精子及试验菌株的基因均无致突变作用。芦荟素A、创伤激素和聚糖肽甘露(KS-2)等具有抗病毒感染,促进血液循环,增强免疫活性,促进上皮细胞再生等作用。本研究中Wistar大鼠感染性拔牙创口局部应用芦荟膏1周时,镜下观察到实验组拔牙创内有少量中性粒细胞浸润,纤维血管组织增生,能看到少量淡灰色结构模糊类似植物细胞样物质(考虑为芦荟颗粒),而对照组拔牙创及其周围有较多中性粒细胞浸润,有死骨形成。实验组在2周时可见到骨样组织,8周时板层骨增多,12周时完全由板层骨填充,而对照组在12周时仍见较多编织骨。对照组拔牙创内置入碘仿纱条,碘仿遇血后缓慢释放出游离态碘,通过碘化和氧化作用起到杀菌作用,也可能促进肉芽组织生长促进拔牙创愈合;另一方面,碘仿纱条置入拔牙窝后可尽量避免唾液及食物进入拔牙创,可能是其减少干槽症发生的重要原因。缺点是碘仿纱条需1周后取出,操作繁琐,可能会影响到实验结果。而将芦荟膏放入感染性拔牙创,芦荟膏类似于牙膏,质地松软略有流动性,能被血凝块吸附,芦荟的生物相容性又起到了隔离屏障作用,可将创面与口腔隔离,阻挡细菌及食物的侵入,防止由于唾液的冲刷或因咀嚼压力造成血块脱落,且占据血块中心可达数日之久,并且可作为细胞支持的框架以维持血细胞的聚集,因而简便易行,较碘仿纱条有较多的优越性。从试验结果中可以看出:拔牙创局部应用芦荟膏能明显促进创口内成纤维细胞增殖,加速血凝块的机化和肉芽组织的生长,加快新骨组织的形成,从而有效地促进拔牙创的愈合。在拔牙创伤修复中,机体本身的自然愈合是一个被动过程,而芦荟膏能促使创口周围细胞增殖,加速创面的愈合,是一个主动过程。局部应用芦荟膏促进拔牙创愈合的原理可能是:(1)芦荟膏加速血凝块形成后,促进成纤维细胞生长,导致毛细血管快速生长,肉芽组织形成就早;(2)芦荟膏可以促进上皮细胞生