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1分子生物学期末考试试题一、名词解释1、反式作用因子:能直接或间接地识别或结合各类顺式作用元件核心序列,参与调控靶基因转录效率的蛋白质。2、基因家族:3、C值冲突:C值是指真核生物单倍体的DNA含量,一般的,真核生物的进化程度越高,C值越大,但在一些两栖类生物中,其C值却比哺乳动物大的现象。缘由是它含有大量的重复序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开。4、核型:指一个物种所特有的染色体数目和每一条染色体所特有的形态特征。5、RNA editing:转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、参加或丧失等现象。二、推断:1、真核生物全部的mRNA都有polyA构造。 〔X〕 组蛋白的mRNA没有2、由于密码子存在摇摆性,使得一种tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子。 〔√ 〕3、大肠杆菌的连接酶以ATP作为能量来源〔X 〕 以NAD作为能量来源4、tRNA只在蛋白质合成中起作用〔X 〕 tRNA还有其它的生物学功能,如可作为逆转录酶的引物5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反响都需要引物〔 X 〕 RNA聚合酶的催化反响不需要引物6、真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸〔X 〕 真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲硫氨酸7、质粒不能在宿主细胞中独立自主地进展复制〔X 〕 质粒具有复制起始原点,能在宿主细胞中独立自主地进展复制8、RNA由于不含有DNA基因组,所以依据分子遗传的中心法则,它必需先进展反转录,才能复制和增殖〔X 〕不肯定,有的RNA病毒可直接进展RNA复制和翻译9、细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和ρ因子组成〔X 〕 细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和σ因子组成10、核小体在复制时组蛋白八聚体以全保存的方式传递给子代〔√ 〕11、色氨酸操纵子中含有衰减子序列〔√ 〕12、SOS框是全部din基因〔SOS基因〕的操纵子都含有的20bp的lexA结合位点〔√ 〕三、填空:1、原核生物的启动子的四个保守区域为转录起始点、-10区、-35区、-10区与-35区的距离 。2、依据对DNA序列和蛋白质因子的要求,可以把重组分为同源重组、位点专一性重组/特异位点重组、转座重组、特别重组四类。3、争论启动子功能的主要方法是 启动子的突变,争论酶与启动子间识别与结合的方法有脚印法和碱基修饰法。4真核生物中反式作用因子的DNA结合构造域有螺旋-转角-螺旋(HTH) 碱性-螺旋-环-螺旋(bHLH)锌指(zincfinger) 、碱性-亮氨酸拉链(bZIP)。5、依据DNA复性动力学,DNA序列可以分成哪四种类型?单一序列、轻度重复序列、中度重复序列、高度重复序列四、选择题〔101分〕1、在真核基因表达调控中,( B )调控元件能促进转录的速率。A、衰减子 B、增加子 C、repressor D、TATA Box2、核基因mRNA、的内元拼接点序列为( D )。A、AG…GU B、GA…UG C、UG…GA D、GU…AG3、以下何种因子不会诱变DNA( D )A、亚硝酸 B、UV C、丫啶橙 D、饱和脂肪乳剂4、RNA聚合酶1的功能是( C )A转录tRNA和5sRNA基因;B转录蛋白质基因和局部snRNA基因;C只转录rRNA基因; D转录多种基因5、假设一段DNA产生了+1的译码突变,可以加以校正的是〔D 〕A 突变型氨酰tRNA合成酶B 有突变型反密码子的tRNAC 有切割一个核苷酸的酶D有四个碱基长的反密码子的tRNA6、参与重组修复的酶系统中,具有交换DNA链活性的是〔D 〕A DNA聚合酶I BRecB蛋白C RecC蛋白 DRecA蛋白7、原核RNApol识别的启动子位于:( A )A、转录起始点的上游; B、转录起始点的下游;C、转录终点的下游; D、无肯定位置;8、在争论原核翻译过程中,可用不同的抑制剂争论翻译诸阶段,其中链霉素可抑制:(C)A、起始B、延长C、肽基有P位移至A位D、核糖体移位9、在什么状况下,乳糖操纵子的转录活性最高〔A〕A高乳糖,低葡萄糖B高乳糖,高葡萄糖C低乳糖,低葡萄糖D低乳糖,高葡萄糖105’XYZ3’5’ABC3’,则处于摇摆位置上的碱基为〔C〕A X-C B Y-B C Z-A五、简答:1.表达由一段DNA序列形成多种蛋白产物的机制。答:由一段DNA形成多种蛋白产物的可能机制有:阅读框不同、抗终止作用、可变剪切和RNA编辑。重叠基因在фX174中最早觉察,两个邻近的基因以一种奇异的方式发生重叠,转录出来的mRNA以不同的阅读框阅读并被表达,产生两种以上的蛋白产物。λmRNAρ因子的终止作用以及早期基因编码的抗终止蛋白的抗终止作用造成的。抗终止蛋白与RNA聚合酶结合后修饰了酶的构象,使其不再识别弱终止子,从而使一段DNA可以转录出多种mRNA,从而产生两种以上的蛋白产物。真核生物的hnRNA含有内含子,通过剪接可将其出去形成Mrna,但有的高等真核细胞存在可变剪接,即来自一个基因的RNA,其某个内含子的5‘供体在不同的条件下和不同内含子的3’受体进展剪接,从而将来自一个基因的mRNA前体剪接产生多种mRNA,翻译出不同的蛋白质。另外,在真核生物中存在RNA编辑,将mRNA在转录后进展插入、缺失或核苷酸的替换,转变DNA模板的遗传信息,从而翻译出氨基酸序列不同的多种蛋白质。1请问那种的Tm最低?答: 的Tm值最低。含这种二核苷酸的序列有那些,为什么?〔7分〕答:含有A/T的主要有复制起始点、原核生物启动子的-10区、真核生物启动子的TATA框,此外,还有生物体选择以UAA作为最有效的终止密码子。34DNA-10区、真核生物启动子的TATA框富含AT对,二者之间有两条氢键,在此处易于解开双链,简洁形成起始复合物,使复制和转录过程顺当进展。生物体选择以UAA作为最有效的终止密码子,由于在64的密码子中,假使UAAUAA很少发生无义抑制突变,有利于肽链的正常终止。3、详述大肠杆菌色氨酸操纵子的调控机理〔12分〕答:大肠杆菌色氨酸操纵子的转录受阻遏和衰减两种机制的掌握,前者通过阻遏蛋白和操纵基因的作用掌握转录的起始,后者通过前导序列形成特别的空间构造控制转录起始后是否进展下去。色氨酸操纵子的可阻遏系统:在阻遏系统中,起负调控的调整基因的产物是一个无活性的阻遏蛋白,色氨酸是辅阻遏物;当色氨酸缺乏时,阻遏蛋白无活性,不能和操纵基因结合,色氨酸操纵子能够转录;当色氨酸充分时,阻遏蛋白和它结合而被激活,从而结合到操纵基因上,而色氨酸操纵子的操纵基因位于启动基因内,因此,活性阻遏物的结合排斥了RNA聚合酶的结合,从而抑制了构造基因的表达。色氨酸操纵子的衰减调控在色氨酸操纵子的操纵基因和第一个构造基因之间有一段前导序列LAUG开头的14个氨基酸的编码区,编码区有两个严密相连的色氨酸密码子,后面是一个终止密码子UGA,在开放阅读框下游有一个不依靠因子的终止子,是一段富含G/C的回文序列,可以形成发夹构造,因此可以在此处终止转录。另外前导序列包含41区、2区、341、23、42、3的方式进展配对,从而使前导序列形成二级构造的变化。在细菌中,翻译与转录偶连,一旦RNA聚合酶转录出trpmRNA中的前导肽编码区,核糖体便马上结合上去翻译这一序列。当细胞中缺乏色氨酸时,Trp-tRNATrp的浓度很低,核糖体翻译前导肽至两个连续的色氨酸密码子处就陷入停顿,这时核糖体只占据1区,由RNA聚23区便可配对,4区游离在外,这样就不能形成终止子构造,RNA聚合酶就可以始终转录下去,最终完成trp全部构造基因的转录,得到完整的mRNA分子。当细胞中存在色氨酸时,就有肯定浓度的Trp-tRNATrp,核糖体便能顺当通过两个连续的色氨酸密码子而翻译出整个前导肽,直到前导肽序列后面的UGA1234区配对,形成转录终止子构造,使RNA聚合酶终止转录。实现衰减调控的关键在于时间和空间上的奇异安排。在空间上,两个色氨酸密码子的位置很重要,不行随便更改;在时间上,核糖体停顿于两个色氨酸密码子上时,序列4应当还未转录出来。分子生物学试卷一、名词解释〔共10题,每题2分,共20分〕1、质粒:2、目的基因:3、转录:4、染色体:5、原核生物:6、基因组:7、翻译:8、复制:9、基因表达:10、HGP二、填空题〔共28空,每空1.5分,共42分〕1、DNA与RNA在组成成分上的根本区分包括,DNA含有 、 ,而RNA含有、。2、RNA主要包括 、 、 、共三种。3、真核生物基因组的根本特征包括 、 、、 。而原核生物基因组的根本特征包括、、、。4DNA复制是一个 的过程即子代分子的 来自亲代,而。5、基因工程包括五个根本流程:、、、和。6、病毒依据其遗传物质可分为: 病毒和 病毒。7、基因表达主要生成: 、 。〔361分〕PCR技术有哪三大根本环节?tRNA和DNA的二级构造各有何根本特点?逆转录过程的根本原理是什么?有何医学意义?〔21020分〕1、真核生物与原核生物基因表达调控各自有何根本特点?其意义是什么?2、何谓人类基因组打算,其意义如何?江西省高等教育考试(非主干课程)分子生物学试卷 参考答案一、名词解释(共10题,每题2分,共20分)1、细菌核外环状DNA2、生物技术中的应用基因3、RNA的合成过程4、核内遗传信息贮存形式5、早期细胞类型6、一物种全部基因之和7、蛋白质合成过程8、DNA合成过程9、转录加翻译的信息实现过程10、人类基因组打算二、填空(共28空,每空1.5分,共42分)1、脱氧核糖,T, 核糖, U 2、tRNA, mRNA, Rrna, 3、断裂基因, 基因家族, 重复序列多, 细胞器基因;操纵子, 连续基因, 重复序列少, 无细胞器基因 4、半保存, 一半, 另一半, 高保真性5、分, 切接, 转, 筛, 6、DNA RNA 7、RNA 蛋白质三、简答(共3题,每题6分,共18分)1、变性,退火, 延长, (各2分)2、tRNA含氨基酸臂与反密码环.(3分)DNA含两条平行螺旋链与碱基互补(3分)3、逆转录酶以病毒RNA为模板合成cDNA进一步在缩主细胞转变成前病毒(4分)并予进一步说明医学意义(2分)四、问答(共2题,每题10分,共20分)1、特点:从两类调控的环节与主要环节与方式加以区分(6分)前者环节多于后者,后者以操纵子模式并进一步说明意义(4分)2、对人类自身基因序列等的争论(4分),其意义可从根底,医学,药学等方面说明(6分)分子生物学试题及答案分子生物学试题及答案一、名词解释cDNAcccDNA:cDNAmRNADNA;cccDNADNA。标准折叠单位:蛋白质二级构造单元α-螺旋与β-折叠通过各种连接多肽可以组成特别几何排列的构造块,此种确定的折叠类型通常称610为超二级构造。几乎全部的三级构造都可以用这些折叠类型,乃至他们的组合型来予以描述,因此又将其称为标准折叠单位。CAP〔cAMPCR〔cAMPreceptorproteincAMPCRPCA〔cAMPactivatedprotein〕4.回文序列:DNAmicRNA:RNARNA,mRNAmRNA核酶:具有催化活性的RNA,在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。模体:蛋白质分子空间构造中存在着某些立体外形和拓扑构造颇为类似的局部区域信号肽:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。弱化子:在操纵区与构造基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反响,停顿全部基因的表达。产生这一应急反响的信号是鸟苷(ppGpp)和鸟苷五磷酸〔pppGpp〕。PpGpppppGpp为魔斑。DNA,-10TATA、-35TGACADNADNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。SDmRNA单克隆抗体:只针对单一抗原打算簇起作用的抗体。考斯质粒:是经过人工构建的一种外源DNA载体,保存噬菌体两端的COS区,与质粒连接构成。LacZ〔编码β〕该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株DNA,LacZ顺式作用元件:在DNA中一段特别的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。Klenow:DNAIDNAI5’3’外切酶活性DNAdGdCPCR融合蛋白:真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。二、填空DNADNA〔限制性内切酶酶解〕片段的排列挨次。RNA〔自体催化〕、〔异体催化〕两种类型。3.原核生物中有三种起始因子分别是〔IF-1〕、〔IF-2〕和〔IF-3〕。蛋白质的跨膜需要〔信号肽〕的引导,蛋白伴侣的作用是〔关心肽链折叠成自然构象的蛋白质〕。启动子中的元件通常可以分为两种:〔核心启动子元件〕和〔上游启动子元件 〕。分子生物学的争论内容主要包含〔构造分子生物学〕、〔基因表达与调控〕、〔DNA重组技术〕三局部。证明DNA〔〕、〔T2〕这两个试验中主要的论点证据是:〔生物DNA〕。hnRNAmRNA:〔hnRNAmRNA,〕、mRNA5′m7pGpppmRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴〕。〔DNA〔可以削减蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、〔活性能够格外有效和快速地被翻开和被关闭〕。10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括〔〕、〔构造充实〕、〔最终重排〕。半乳糖对细菌有双重作用;一方面〔可以作为碳源供细胞生长〕;另一方面〔它又是细胞壁的成分〕。所以需要一个不依靠于cAMP—CRPcAMP—CRPS1G〔S2〕开头,G〔S1〕开头。DNA〔基因克隆〕或〔〕。最终目的是〔把一个生物体中的遗传信息DNA〕。典型的DNA试验通常包含以下几个步骤:①提取供体生物的目的基因〔或称外源基因〕,酶接连接到另一DNA分子上〔克隆载体〕,形成一个的重组DNA分子。DNADNADNA13、质粒的复制类型有两种:受到宿主细胞蛋白质合成的严格掌握的称为〔〕,不受宿主细胞蛋白质合成的严格掌握称为〔型质粒〕。PCRDNA〔20〕。b、具有热稳定性的酶如:TagDNAc、dNTPdDNAPCR:〔变性〕、〔退火〕、〔延长〕三个阶段。16、转基因动物的根本过程通常包括:①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中;②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫;③完成胚胎发育,生长为后代并带有外源基因;④利用这些能产生外源蛋白的动物作为种畜,培育的纯合系。17.杂交瘤细胞系的产生是由〔脾B〕细胞与〔〕细胞杂交产生的,由于〔脾细胞〕可以利用次黄嘌呤,〔〕供给细胞分裂功能,所以能在HAT培育基中生长。18.随着争论的深入第一代抗体称为〔多克隆抗体〕、其次代〔单克隆抗体〕、第三代〔〕。目前对昆虫病毒的基因工程改造主要集中于杆状病毒表现在引〔外源毒蛋白基因 〔扰乱昆虫正常生活周期的基因〔 病毒基因进展修饰〕。哺乳类RNATATA、GC、CAAT〔TFIID〕、〔SP-1〕和〔CTF/NF1〕。、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合挨次是: 〔D、A、B、E〕。其中TFII-D的功能是〔与TATA盒结合〕。与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用,转录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种〔 螺旋-转角-螺旋〕、〔锌指模体〕、〔碱性-亮氨酸拉链模体〕。〔5”5”粘端〕、〔3”3”粘端〔在对称轴处切割产生平段〕。质粒DNA具有三种不同的构型分别是:〔 SC构型〕、〔 oc构型〕、〔L构型 〕。在电泳中最前面的是〔SC构型〕。外源基因表达系统,主要有〔大肠杆菌〕、〔酵母〕、〔昆虫〕和〔〕。病毒感染法〕、〔DNA显微注射法〕、〔胚胎干细胞法〕。三、简 答1. 5RNA转运RNA tRNA 转运氨基酸核蛋白体RNA rRNA 核蛋白体组成成信使RNA mRNA 蛋白质合成模板不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前体小核RNA snRNA 参与hnRNA的剪接小胞浆RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分反义RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调整作用核酶 RibozymeRNA 2.原核生物与真核生物启动子的主要差异?原核生物TTGACA---TATAAT 起始位点-35 -10真核生物增加子---GC---CAAT 起始位点-110 -70 -253.对自然质粒的人工构建主要表现在哪些方面?自然质粒往往存在着缺陷,因而不适合用作基因工程的载体,必需对之进展改造构建:a、参加适宜的选择标记基因,如两个以上,易于用作选择,通常是抗生素基因。b、增加或削减适宜的酶切位点,便于重组。c、缩短长度,切去不必要的片段,提高导入效率,增加装载量。d、转变复制子,变严紧为松弛,变少拷贝为多拷贝。e、依据基因工程的特别要求加装特别的基因元件4.cDNA制备两种细胞群体,目的基因在其中一种细胞中表达或高表达,在另一种细胞中不表达或低表达,然后通过杂交比照找到目的基因。例如:在肿瘤发生和进展过程
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