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文档简介
索翦施思原1对酶相关实验的基本思想和方法的迁移应用
bliYANIJJIAIJIANUKI
考点1酶相关实验设计中的“酶解法”
[素养建构】
1.实验设计中可用酶催化底物分解,根据酶处理后的变化,来证明酶的作
用或底物的成分。
2.鉴定酶本质的“酶解法”模型
“酶解法”——从酶的化学本质上来讲,绝大多数的酶是蛋白质,少数的
酶是RNA。酶必须保持正常的空间结构才能发挥催化作用,因此,可以分别利
用蛋白酶和RNA酶处理某酶,再观察其功能是否受影响来确定该酶的本质。设
计方案如图。
待测陶液
蛋白酶RNA
处理薛处理
检测所催化的反
应是否能够发生
[素能训练】
1.(2021•华中师大一附中模拟)某兴趣小组在生物实验室中发现一酶试剂,
由于标签受损,无法确定该酶的具体种类,已知其可能是淀粉酶或蔗糖酶。为
判断该酶的具体种类和作用条件,该小组成员给出了以下建议,其中不合理的
是()
A.取部分酶和少量淀粉溶液混合,一定时间后,滴加碘液检测
B.取部分酶和少量蔗糖溶液混合,一定时间后,利用斐林试剂检测
C.若已确定该酶是淀粉酶,可使用斐林试剂作检测试剂探究温度对酶活性
的影响
D.若已确定该酶是蔗糖酶,可利用蔗糖来研究pH对酶活性的影响
C[取部分酶和少量淀粉溶液混合,若该酶为淀粉酶,则
淀粉被水解,一定时间后,滴加碘液溶液不变蓝色;若该酶为蔗糖酶,则
淀粉不被水解,一定时间后,滴加碘液后溶液变蓝色,A合理。取部分酶和少量
蔗糖溶液混合,若该酶为蔗糖酶,则蔗糖被水解,利用斐林试剂检测会由现砖
红色沉淀;若该酶为淀粉酶,则不出现烤红色沉淀,B合理。使用斐林试剂检测
时需要水浴加热,因此在探究温度对酶活性的影响时不能使用斐林试剂作检测
试剂,C不合理。可用蔗糖作为底物来探究pH对蔗糖酶活性的影响,D合理。]
2.某科研小组经研究得知X酶存在于人的肝细胞中,能将糖原分解为还原
糖。酶必须保持正常的结构才能发挥催化作用,请利用这一原理设计实验,探
究X酶的化学本质究竟是蛋白质还是RNA。简要写出实验思路,并预期实验结
果及结论(要求:实验包含可相互印证的甲、乙两个组)。
[解析]实验设置甲组和乙组,两组实验分别用蛋白酶和RNA酶处理X酶,
然后与糖原混合检测两组实验中X酶有无活性。检测X酶是否有活性可用斐林
试剂与产物反应是否产生了颜色变化来完成。
[答案]实验思路:甲组:将X酶用蛋白酶处理,再与糖原溶液混合,在适
宜条件下保持一段时间后,检测是否有还原糖产生。乙组:将X酶用RNA酶处
理,再与糖原溶液混合,在适宜条件下保持一段时间后,检测是否有还原糖产
生。预期结果及结论:①若甲组有还原糖生成,乙组没有还原糖生成,则说
明X酶的化学本质是RNA;②若甲组没有还原糖生成,乙组有还原糖生成,则
说明X酶的化学本质是蛋白质
考点2酶实验设计中的“对比法”
[素养建构】
1.对比法验证酶的高效性
(1)设计思路:通过将不同类型催化剂(主要是酶与无机催化剂)催化底物的反
应速率进行比较,得出结论。
(2)设计方案
项目实验组对照组
材料等量的同一种底物
试剂与底物相对应的酶溶液(如生物材料研磨等量的无机催化剂
液)
反应速率缓慢,或反
现象反应速率很快,或反应用时短
应用时长
结论酶具有高效性
2.对比法验证酶的专一性
⑴设计思路:常见的方案有两种,即底物相同但酶不同或底物不同但酶相
同,最后通过观察酶促反应能否进行得出结论。
(2)设计方案
方案一方案二
项目
实验组对照组实验组对照组
材料同种底物(等量)与酶相对应的底物另外一种底物
与底物相对另外一
试剂同一种酶(等量)
应的酶种酶
现象发生反应不发生反应发生反应不发生反应
结论酶具有专一性
[素能训练]
1.下表是过氧化氢分解实验的过程和结果,下列分析错误的是()
试管abCd
3%过氧化氢溶液2mL2mL2mL2mL
置于加2滴加2滴20%的
不作任何
处理措施90℃水浴3.5%的新鲜肝脏研磨
处理
杯中FeCh液
实验结果—+++++++
注:“一”表示无气泡产生;“十”的数量表示气泡产生的多少。
A.a和d对照说明酶具有高效性
B.c和d是对比实验,自变量是催化剂的种类
C.a、c对照说明FeCh具有催化作用
D.a、c、d对照可以说明酶的催化具有高效性
A[a和d对照,只能说明酶能催化化学反应的进行,要证明酶具有高效性,
需要将有酶和有无机催化剂参与的反应进行比较,即a、c、d对照能说明酶的
催化具有高效性;c和d都是实验组,二者形成对比,自变量是催化剂的种类;
a和c对照说明无机催化剂能促进化学反应的进行,即具有催化作用。]
2.某同学进行了如下有关酶的实验:
甲组:淀粉溶液+新鲜唾液一加入斐林试剂主笆避出现砖红色沉淀
水浴力口热
乙组:蔗糖溶液+新鲜唾液一加入斐林试剂------^不出现砖红色沉淀
丙组:蔗糖溶液+蔗糖酶溶液一加入斐林试剂检螂?
下列叙述正确的是()
A.丙组的实验结果是“不出现砖红色沉淀”
B.三组实验中,底物的用量属于自变量
C.该同学的实验目的是验证酶的专一性
D.可用碘液代替斐林试剂进行检测
C[蔗糖酶能催化一分子蔗糖水解成一分子果糖和一分子葡萄糖,果糖和
葡萄糖是还原糖,加入斐林试剂水浴加热会使还原糖生成砖红色沉淀,A项错误;
底物的用量属于无关变量,B项错误;从实验所用的底物和酶的种类分析可知,
该实验的目的是验证酶的专一性,C项正确;唾液淀粉酶能催化甲组淀粉水解成
还原糖,不能催化蔗糖水解,碘液使淀粉呈现蓝色,不能使还原糖和蔗糖呈现
蓝色,使用碘液无法检测乙、丙组的反应,无法得出结论,D项错误。]
3.(2021•辽宁名校联考)据表分析,下列说法正确的是()
组别①②③④⑤⑥
质量分数为3%的淀粉溶液(mL)222222
质量分数为2%的蔗糖酶溶液
—1—1—1
(mL)
质量分数为2%的a-淀粉酶溶液
1—1—1—
(mL)
反应温度(℃)006060100100
碘液2滴2滴2滴2滴2滴2滴
注:表中“一”表示没有添加。
A.淀粉溶液的用量是无关变量
B.①②两组实验可用于验证酶的专一性
C.②④⑥三组实验可说明温度能影响酶活性
D.设计上述实验的目的是验证酶的专一性
A[根据表格数据可知,该实验的自变量是酶的种类和温度,所以淀粉溶
液的用量是无关变量,A正确;①②两组实验的温度不是适宜温度,此温度下酶
不能正常发挥作用,所以不能用于验证酶的专一性,B错误;蔗糖酶不能催化淀
粉水解,故②④⑥不能说明温度能影响酶活性,C错误;该实验的目的是探究温
度对酶活性的影响以及验证酶的专一性,D错误。]
考点3探究酶的最适温度或pH中的“梯度法”
[素养建构】
1.探究酶的最适温度
(1)设计思路
在一定范围内,设计一系列温度梯度实验,其他条件相同且适宜,可得出
最适温度的大致范围,再在此范围内减小梯度,进一步进行实验,直至得出最
适温度。
(2)设计方案
酶液酶液金国)梅液
|温7,|温12…“:[温
|分别保温二段时间~]
|相同温度的旃液和底物混合保温一段时间]
2.探究酶的最适pH
(1)设计思路
在一定范围内,设计一系列pH梯度实验,其他条件相同且适宜,可得出最
适pH的大致范围,再在此范围内缩小梯度,进一步进行实验,直至得出最适
pH。
(2)设计方案
I各自与等量底物混合]
」号应一段时间
[素能训练】
1.(2021•湖北选择性考试模拟)甲同学从某哺乳动物的胃液中分离到了一种
酶。为探讨该酶的最适pH,设计了如下实验方案,其中最合理的是()
方案pH范围温度酶活性测定最适pH
A1-625℃
以pH对酶活性作图,
B1-1425℃每间隔一个pH梯
酶活性最高时对应的
C1-637℃度进行酶活性测定
pH为最适pH
D1-1437℃
C[哺乳动物的胃中存在胃酸,pH都是呈酸性,故选取的pH范围应该是
1〜6。哺乳动物的体温一般为40°C上下和人类的体温差不多,作为本实验无关
变量中的温度应选择较适宜的温度37℃,综上所述,C合理,A、B、D不合理。]
2.(2021•江苏百校联考)小张查阅资料得知,a-淀粉酶的最适温度是55
下表是他为此进行的验证实验,但因各组结果相同而不能达到实验目的。以下
改进措施中可行的是()
3%淀粉溶l%a-淀粉酶溶1min后碘液检
试管实验温度
液<*
150℃2mL1mL溶液呈棕黄色
255℃2mL1mL溶液呈棕黄色
360℃2mL1mL溶液呈棕黄色
A.将实验温度改为0℃、55°C、100℃
B.将淀粉溶液体积改为4mL
C.将a-淀粉酶溶液浓度改为2%
D.将碘液改为斐林试剂
B[验证a-淀粉酶的最适温度是55°C,如果将实验温度设置为0℃、55°C、
100℃,因为温度梯度过大,实验结果不能说明酶的最适温度就是55C,A错
误;分析实验结果可知,三组实验反应一段时间后,滴加碘液都不变蓝色,说
明淀粉都完全水解,因此可以通过增加淀粉溶液的浓度、减小酶的浓度或用量、
缩短反应时间进行改进,B正确;若将a-淀粉酶溶液浓度改为2%,淀粉会在更
短时间内完全水解,滴加碘液都不变蓝色,C错误;斐林试剂检测还原糖需要水
浴加热,会破坏设置的温度条件,D错误。]
3.普通淀粉酶的最适温度在40℃~60C之间,而极端耐热淀粉酶在100℃
仍能保持较高的活性,因此在生产上具有更为广泛的应用前景。请回答有关问
题:
(1)要鉴定该酶的化学本质,可将该酶液与混合,若反应液呈
________色,则该酶的化学本质为蛋白质。
(2)测定淀粉酶活性时,应选择作为该酶作用的底物,反应液中应
加入溶液以维持其酸碱度稳定。
(3)设计实验
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