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文档简介

索翦施思原1对酶相关实验的基本思想和方法的迁移应用

bliYANIJJIAIJIANUKI

考点1酶相关实验设计中的“酶解法”

[素养建构】

1.实验设计中可用酶催化底物分解,根据酶处理后的变化,来证明酶的作

用或底物的成分。

2.鉴定酶本质的“酶解法”模型

“酶解法”——从酶的化学本质上来讲,绝大多数的酶是蛋白质,少数的

酶是RNA。酶必须保持正常的空间结构才能发挥催化作用,因此,可以分别利

用蛋白酶和RNA酶处理某酶,再观察其功能是否受影响来确定该酶的本质。设

计方案如图。

待测陶液

蛋白酶RNA

处理薛处理

检测所催化的反

应是否能够发生

[素能训练】

1.(2021•华中师大一附中模拟)某兴趣小组在生物实验室中发现一酶试剂,

由于标签受损,无法确定该酶的具体种类,已知其可能是淀粉酶或蔗糖酶。为

判断该酶的具体种类和作用条件,该小组成员给出了以下建议,其中不合理的

是()

A.取部分酶和少量淀粉溶液混合,一定时间后,滴加碘液检测

B.取部分酶和少量蔗糖溶液混合,一定时间后,利用斐林试剂检测

C.若已确定该酶是淀粉酶,可使用斐林试剂作检测试剂探究温度对酶活性

的影响

D.若已确定该酶是蔗糖酶,可利用蔗糖来研究pH对酶活性的影响

C[取部分酶和少量淀粉溶液混合,若该酶为淀粉酶,则

淀粉被水解,一定时间后,滴加碘液溶液不变蓝色;若该酶为蔗糖酶,则

淀粉不被水解,一定时间后,滴加碘液后溶液变蓝色,A合理。取部分酶和少量

蔗糖溶液混合,若该酶为蔗糖酶,则蔗糖被水解,利用斐林试剂检测会由现砖

红色沉淀;若该酶为淀粉酶,则不出现烤红色沉淀,B合理。使用斐林试剂检测

时需要水浴加热,因此在探究温度对酶活性的影响时不能使用斐林试剂作检测

试剂,C不合理。可用蔗糖作为底物来探究pH对蔗糖酶活性的影响,D合理。]

2.某科研小组经研究得知X酶存在于人的肝细胞中,能将糖原分解为还原

糖。酶必须保持正常的结构才能发挥催化作用,请利用这一原理设计实验,探

究X酶的化学本质究竟是蛋白质还是RNA。简要写出实验思路,并预期实验结

果及结论(要求:实验包含可相互印证的甲、乙两个组)。

[解析]实验设置甲组和乙组,两组实验分别用蛋白酶和RNA酶处理X酶,

然后与糖原混合检测两组实验中X酶有无活性。检测X酶是否有活性可用斐林

试剂与产物反应是否产生了颜色变化来完成。

[答案]实验思路:甲组:将X酶用蛋白酶处理,再与糖原溶液混合,在适

宜条件下保持一段时间后,检测是否有还原糖产生。乙组:将X酶用RNA酶处

理,再与糖原溶液混合,在适宜条件下保持一段时间后,检测是否有还原糖产

生。预期结果及结论:①若甲组有还原糖生成,乙组没有还原糖生成,则说

明X酶的化学本质是RNA;②若甲组没有还原糖生成,乙组有还原糖生成,则

说明X酶的化学本质是蛋白质

考点2酶实验设计中的“对比法”

[素养建构】

1.对比法验证酶的高效性

(1)设计思路:通过将不同类型催化剂(主要是酶与无机催化剂)催化底物的反

应速率进行比较,得出结论。

(2)设计方案

项目实验组对照组

材料等量的同一种底物

试剂与底物相对应的酶溶液(如生物材料研磨等量的无机催化剂

液)

反应速率缓慢,或反

现象反应速率很快,或反应用时短

应用时长

结论酶具有高效性

2.对比法验证酶的专一性

⑴设计思路:常见的方案有两种,即底物相同但酶不同或底物不同但酶相

同,最后通过观察酶促反应能否进行得出结论。

(2)设计方案

方案一方案二

项目

实验组对照组实验组对照组

材料同种底物(等量)与酶相对应的底物另外一种底物

与底物相对另外一

试剂同一种酶(等量)

应的酶种酶

现象发生反应不发生反应发生反应不发生反应

结论酶具有专一性

[素能训练]

1.下表是过氧化氢分解实验的过程和结果,下列分析错误的是()

试管abCd

3%过氧化氢溶液2mL2mL2mL2mL

置于加2滴加2滴20%的

不作任何

处理措施90℃水浴3.5%的新鲜肝脏研磨

处理

杯中FeCh液

实验结果—+++++++

注:“一”表示无气泡产生;“十”的数量表示气泡产生的多少。

A.a和d对照说明酶具有高效性

B.c和d是对比实验,自变量是催化剂的种类

C.a、c对照说明FeCh具有催化作用

D.a、c、d对照可以说明酶的催化具有高效性

A[a和d对照,只能说明酶能催化化学反应的进行,要证明酶具有高效性,

需要将有酶和有无机催化剂参与的反应进行比较,即a、c、d对照能说明酶的

催化具有高效性;c和d都是实验组,二者形成对比,自变量是催化剂的种类;

a和c对照说明无机催化剂能促进化学反应的进行,即具有催化作用。]

2.某同学进行了如下有关酶的实验:

甲组:淀粉溶液+新鲜唾液一加入斐林试剂主笆避出现砖红色沉淀

水浴力口热

乙组:蔗糖溶液+新鲜唾液一加入斐林试剂------^不出现砖红色沉淀

丙组:蔗糖溶液+蔗糖酶溶液一加入斐林试剂检螂?

下列叙述正确的是()

A.丙组的实验结果是“不出现砖红色沉淀”

B.三组实验中,底物的用量属于自变量

C.该同学的实验目的是验证酶的专一性

D.可用碘液代替斐林试剂进行检测

C[蔗糖酶能催化一分子蔗糖水解成一分子果糖和一分子葡萄糖,果糖和

葡萄糖是还原糖,加入斐林试剂水浴加热会使还原糖生成砖红色沉淀,A项错误;

底物的用量属于无关变量,B项错误;从实验所用的底物和酶的种类分析可知,

该实验的目的是验证酶的专一性,C项正确;唾液淀粉酶能催化甲组淀粉水解成

还原糖,不能催化蔗糖水解,碘液使淀粉呈现蓝色,不能使还原糖和蔗糖呈现

蓝色,使用碘液无法检测乙、丙组的反应,无法得出结论,D项错误。]

3.(2021•辽宁名校联考)据表分析,下列说法正确的是()

组别①②③④⑤⑥

质量分数为3%的淀粉溶液(mL)222222

质量分数为2%的蔗糖酶溶液

—1—1—1

(mL)

质量分数为2%的a-淀粉酶溶液

1—1—1—

(mL)

反应温度(℃)006060100100

碘液2滴2滴2滴2滴2滴2滴

注:表中“一”表示没有添加。

A.淀粉溶液的用量是无关变量

B.①②两组实验可用于验证酶的专一性

C.②④⑥三组实验可说明温度能影响酶活性

D.设计上述实验的目的是验证酶的专一性

A[根据表格数据可知,该实验的自变量是酶的种类和温度,所以淀粉溶

液的用量是无关变量,A正确;①②两组实验的温度不是适宜温度,此温度下酶

不能正常发挥作用,所以不能用于验证酶的专一性,B错误;蔗糖酶不能催化淀

粉水解,故②④⑥不能说明温度能影响酶活性,C错误;该实验的目的是探究温

度对酶活性的影响以及验证酶的专一性,D错误。]

考点3探究酶的最适温度或pH中的“梯度法”

[素养建构】

1.探究酶的最适温度

(1)设计思路

在一定范围内,设计一系列温度梯度实验,其他条件相同且适宜,可得出

最适温度的大致范围,再在此范围内减小梯度,进一步进行实验,直至得出最

适温度。

(2)设计方案

酶液酶液金国)梅液

|温7,|温12…“:[温

|分别保温二段时间~]

|相同温度的旃液和底物混合保温一段时间]

2.探究酶的最适pH

(1)设计思路

在一定范围内,设计一系列pH梯度实验,其他条件相同且适宜,可得出最

适pH的大致范围,再在此范围内缩小梯度,进一步进行实验,直至得出最适

pH。

(2)设计方案

I各自与等量底物混合]

」号应一段时间

[素能训练】

1.(2021•湖北选择性考试模拟)甲同学从某哺乳动物的胃液中分离到了一种

酶。为探讨该酶的最适pH,设计了如下实验方案,其中最合理的是()

方案pH范围温度酶活性测定最适pH

A1-625℃

以pH对酶活性作图,

B1-1425℃每间隔一个pH梯

酶活性最高时对应的

C1-637℃度进行酶活性测定

pH为最适pH

D1-1437℃

C[哺乳动物的胃中存在胃酸,pH都是呈酸性,故选取的pH范围应该是

1〜6。哺乳动物的体温一般为40°C上下和人类的体温差不多,作为本实验无关

变量中的温度应选择较适宜的温度37℃,综上所述,C合理,A、B、D不合理。]

2.(2021•江苏百校联考)小张查阅资料得知,a-淀粉酶的最适温度是55

下表是他为此进行的验证实验,但因各组结果相同而不能达到实验目的。以下

改进措施中可行的是()

3%淀粉溶l%a-淀粉酶溶1min后碘液检

试管实验温度

液<*

150℃2mL1mL溶液呈棕黄色

255℃2mL1mL溶液呈棕黄色

360℃2mL1mL溶液呈棕黄色

A.将实验温度改为0℃、55°C、100℃

B.将淀粉溶液体积改为4mL

C.将a-淀粉酶溶液浓度改为2%

D.将碘液改为斐林试剂

B[验证a-淀粉酶的最适温度是55°C,如果将实验温度设置为0℃、55°C、

100℃,因为温度梯度过大,实验结果不能说明酶的最适温度就是55C,A错

误;分析实验结果可知,三组实验反应一段时间后,滴加碘液都不变蓝色,说

明淀粉都完全水解,因此可以通过增加淀粉溶液的浓度、减小酶的浓度或用量、

缩短反应时间进行改进,B正确;若将a-淀粉酶溶液浓度改为2%,淀粉会在更

短时间内完全水解,滴加碘液都不变蓝色,C错误;斐林试剂检测还原糖需要水

浴加热,会破坏设置的温度条件,D错误。]

3.普通淀粉酶的最适温度在40℃~60C之间,而极端耐热淀粉酶在100℃

仍能保持较高的活性,因此在生产上具有更为广泛的应用前景。请回答有关问

题:

(1)要鉴定该酶的化学本质,可将该酶液与混合,若反应液呈

________色,则该酶的化学本质为蛋白质。

(2)测定淀粉酶活性时,应选择作为该酶作用的底物,反应液中应

加入溶液以维持其酸碱度稳定。

(3)设计实验

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